1. 培養基滅菌的方法
1、高壓蒸汽滅菌:高壓蒸汽滅菌適用於耐高溫培養基、接種器具和蒸餾水的滅菌。培養基在配製過程中混入各種雜菌,分裝後應立即滅菌,滅菌工作至少應在24小時內完成。一般可在0.105MPa壓力、121℃溫度下滅菌15 ~ 30分鍾。消毒時間不能太長,也不能超過規定的壓力范圍,否則有機物,特別是維生素,在高溫下會分解,失去營養功能,使培養基變質、變色,甚至難以凝固。將蒸餾水或自來水放入三角瓶中,含水量一般不超過瓶子的2/3,用牛皮紙或硫酸紙包好密封,然後放入高壓鍋中滅菌,得到無菌水。滅菌後的培養基可以在培養室中預培養3天。如果沒有污染,證明滅菌完成,可以使用。暫時不用的培養基最好保存在10℃下。含IAA或GA3的培養基應在一周內用完,其他培養基最多不超過一個月。2、過濾滅菌:一些植物生長調節劑和有機物質,如IAA、GA3、ZT、CM等。,加熱時易分解,不能用培養基高溫滅菌,所以要用細菌過濾器把雜菌過濾掉。細菌過濾器和濾膜(孔徑0.45微米)在使用前應高壓滅菌。過濾後的溶液應立即加入培養基中。如果是液體培養基,可以在培養基冷卻到30℃時添加。如果是固體培養基,必須在培養基凝固前(50-60℃)加入,溶液必須搖勻,與其他成分混合均勻。
2. 什麼是滅菌水
就是經過滅菌(121攝氏度,15~20分)的水,用於害怕被雜菌污染的試劑配製或操作。