『壹』 哪些公司會用到鏈霉親和素,他們的用途是幹啥,謝謝各位
這些特異的化學物質一般都是生物制劑公司或者是實驗室做光化學實驗用,它的作用你可以參考下面的一些屬性。
鏈霉親和素(streptavidin下稱SA)是與親和素(svidin下稱AV)有相似生物學特性的一種蛋白質。
鏈霉親和素(SA)是streptomyces avidinii菌的分泌物,其分子量及結合生物素的能力與雞蛋清中的親和素相似,等電點6.0,非特異性結合遠比親和素低。
一 、來源:SA 是Streptomyces avicllrdi菌培養過程中的分泌產物,主要通過2一亞氨基生物索親和層析法提純,1L培養液中含蛋白1 0~60mg 。
二、分子量 :鏈霉親和素是四聚體蛋白,大小為66KDa。一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結合,兩者之間的親和力極為強烈,鏈霉親和素-生物素復合物的解離常數處於 10 mol/L 數量級,這一性質常用於分子生物學用途[1]。其中一條完整的SA肽鏈中有159個氨基酸殘基,分子量為16450。
三、比消光系數:消光系數與蛋白中Tyr含量有關, 由於SA 中Tyr的含量比AV 多,所以SA的比消光系數也較AV 為高,兩者分別為E 1mg/ml=3.40和E1mg/ml=1.57。在282nm 上這兩種蛋白結合生物素後並不改變其消光系數,而在233nm上,它們結合生物素後郡便其消光系數值增高,現在一般都是利用蛋白的這種吸光特點來測定它們的活性。
『貳』 鏈霉親和素為什麼可以提高融合率
鏈霉親和素分子由4條相同的肽鏈組成,其氨基酸組成中,甘氨酸和丙氨酸的含量較大,而且結合生物素的活性基團也是肽鏈中的色氨酸殘基;鏈霉親和素是一種稍偏酸性(pH6.0)的蛋白質,並且不帶任何糖基。在蛋白水解酶作用下,鏈霉親和素可在N端10~12和C端19-21間斷裂,形成的核心鏈霉親和素仍然保持完整的結合生物素的能力,所以可以提高融合率。
鏈霉親和素是與親和素有相似生物學特性的一種蛋白質,是streptomyces avidinii菌的分泌物,其分子量及結合生物素的能力與雞蛋清中的親和素相似,等電點6.0,非特異性結合遠比親和素低。
『叄』 免疫組化三抗是什麼
(SAB)辣根過氧化物酶標記鏈霉親和素
『肆』 親和素/鏈霉親和素酶,血清中有什麼物質可以跟鏈霉親和素結合
可以結合來生物素的活性基團也是肽鏈中源的色氨酸殘基,可以高效分離、純化生物素化復合物,如:小分子、肽類、蛋白、抗體、糖類、凝集素、寡核苷酸、DNA/RNA等,血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些蛋白、抗體,小分子、肽類、蛋白、抗體、糖類、,都會與鏈霉親和素結合…………………… ……………………………… 更多具體材料請參考: 親和素/鏈霉親和素酶 http://proct.bio1000.com/100162/
希望採納
『伍』 蛋白純化填料有哪幾種其應用特點是什麼
PurKineHis-TagNi-IDAResin PurKine組氨酸標簽Ni【鎳】-IDA樹脂 Abbkine BMR20000
PurKineHis-TagCu-IDAResin PurKine組氨酸標簽Cu【銅】-IDA樹脂 Abbkine BMR20040
PurKineGST-TagGlutathioneResin PurKine谷胱甘肽S轉移酶標簽谷胱甘肽樹脂 Abbkine BMR20100
PurKineMBP-TagDextrinResin6FF PurKine麥芽糖結合蛋白標簽糊精樹脂(6%交聯) Abbkine BMR20206
PurKineBiotin-TagStreptavidinResin6FF PurKine生物素標簽鏈霉親和素樹脂(6%交聯) Abbkine BMR20306
PurKineBiotin- PurKine生物素標簽鏈霉親和素預裝柱(6%交聯) Abbkine BMC20306
PurKineStrepII-TagStrep-TactinResin4FF PurKineStrepII標簽Strep-Tactin樹脂(4%交聯) Abbkine BMR20400
PurKineProteinAResin PurKine蛋白A樹脂 Abbkine BMR20500
PurKineProteinGResin PurKine蛋白G樹脂 Abbkine BMR20600
PurKineProteinA/GResin4FF PurKine蛋白A/G樹脂(4%交聯) Abbkine BMR20704
PurKineProteinLResin PurKine蛋白L樹脂 Abbkine BMR20800
PurKineProteinATResin4FF PurKine蛋白AT樹脂(4%交聯) Abbkine BMR20904
PurKine抗體純化SulfoLink樹脂 Abbkine BMR21000
-ActivatedResin4FF PurKine抗體純化NHS-激活樹脂(4%交聯) Abbkine BMR21100
PurKineHeparinResin6FF PurKine肝素樹脂(6%交聯) Abbkine BMR21206
PurKineBenzamidineResin4FF PurKine苯甲脒樹脂(4%交聯) Abbkine BMR21306
PurKineEndotoxinRemovalResin PurKine內毒素清除樹脂 Abbkine BMR21400
『陸』 國內做鏈霉親和素磁珠的哪個廠家的用起來效果好啊求推薦~~~~
鏈霉親和素磁珠,主要用於IVD工業磁分離全自動化學發光免疫分析及生物醫葯基礎研究中分離生物素修飾成分的復合物。鏈霉親和素磁珠用於IVD的磁分離全自動化學發光免疫分析,其懸浮穩定性、磁響應速度、非特異吸附及信噪比、結構/性能的儲存穩定性是定性指標,只有這些定性指標同時都滿足要求才能適用,才值得考慮其分離效價和其用於單次測試的成本。用於磁分離全自動化學發光免疫分析的鏈霉親和素磁珠:進口Dynal、JSR產品應用較多,Dynal分離效價接近JSR產品的兩倍,Bangs的產品磁響應速度較慢且非特異性吸附較高;截止2018年8月的國產鏈霉親和素磁珠中,僅重慶博藍鷹生物技術有限公司產品亞型MSP-SAV-Z1測試滿足鹼性磷酸酶和吖啶酯標記系統要求,且該亞型分離效價與Dynalbeads Myone Streptabvidin T1相當,但該公司另一亞型MSP-SAV-F1仍不能滿足化學發光免疫分析要求。用於基礎研究分離生物素修飾成分復合物時,進口和國產鏈霉親和素磁珠產品通常都能用。鏈霉親和素磁珠目前都以質量(mg或g)計量,但不同廠家產品單位質量對應分離效價差異大;針對相同測試/分離對象,以單次測試/分離的成本進行比較更合理,這也是多數廠家的報價依據。但考慮用於化學發光免疫分析的定性指標是否滿足要求,很多國產鏈霉親和素磁珠的報價就太高了。
『柒』 鏈霉親和素瓊脂糖最大離心是多少
可以結合生物素的活性基團也是肽鏈中的色氨酸殘基,可以高效分版離、純化生物素化復合物,權如:小分子、肽類、蛋白、抗體、糖類、凝集素、寡核苷酸、DNA/RNA等,血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些蛋白、抗體,小分子、肽類、蛋白、抗體、糖類、,都會與鏈霉親和素結合
『捌』 如何將兩個生物素標記的顆粒用鏈霉親和素連接起來
抽血檢測,一般用三代酶聯合免疫法 酶聯免疫法,簡稱ELISA。 它的中心就是讓抗體與酶復合物結合,然後通過顯色來檢測。 步驟:ELISA用血清來檢測,首先血液要經過至少半個小時的凝集,然後取血清(這是有些網友不理解為什麼醫院抽完了血對血置之不理的原因,其實是誤會)。將酶復合物用稀釋液稀釋後,加血清及陰性、陽性對照,還有就是質控品(這是嚴格的要求,它的范圍必須在質控范圍內)。經過一個小時的孵育,然後洗板,加底物,半個小時避光反應後加終止液即完成反應部分,然後就是讀數。由數值來判斷結果的陰性或陽性。嚴格的講,如果第一次檢測為陽性的話,無論是哪個實驗室,必須按照CDC的HIV操作規程來進行第二次檢測,第二次的方法必須與第一次的不同,如還是陽性,將送確認實驗室確認。有的醫院很不負責,將初篩陽性的報告發出後就不管了,這是不對的。必須經過確認實驗室確認後才可出陽性診斷。祝大家。PS,第一次檢測為陽性的話,一定要去確認實驗室再做一次,勇敢的去面對,也許結果就不一樣了。 基本原理是:①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,並保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開,最後結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物後,底物被酶催化變為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺刊物定性或定量分析。由於酶的催化頻率很高,故可極大地地放大反應效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用於測定抗原,也可用於測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體,②酶標記的抗原或抗體,③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。 具體方法有: (一)雙抗體夾心法 雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,操作步驟如下: (1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結合的抗體及雜質。 (2)加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合,形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。 (3)加酶標抗體:使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。 (4)加底物:夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產物。根據顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。 根據同樣原理,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物,即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體。 (二)雙位點一步法 在雙抗體夾心法測定抗原時,如應用針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體,則在測定時可使標本的加入和酶標抗體的加入兩步並作一步(圖15-5)。這種雙位點一步不但簡化了操作,縮短了反應時間,如應用高親和力的單克隆抗體,測定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應用使測定抗原的ELISA提高到新水平。 在一步法測定中,應注意鉤狀效應(hookeffect),類同於沉澱反應中抗原過剩的後帶現象。當標本中待測抗原濃度相當高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合,而不再形成夾心復合物,所得結果將低於實際含量。鉤狀效應嚴重時甚至可出現假陰性結果。 (三)間接法測抗體 間接法是檢測抗體最常用的方法,其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下: (1)將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結合的抗原及雜質。 (2)加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結合,形成固相抗原抗體復合物。經洗滌後,固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質由於不能與固相抗原結合,在洗滌過程中被洗去。 (3)加酶標抗抗體:與固相復合物中的抗體結合,從而使該抗體間接地標記上酶。洗滌後,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體,可用酶標羊抗人IgG抗體。 (4)加底物顯色:顏色深度代表標本中受檢抗體的量。 本法只要更換不同的固相抗原,可以用一種酶標抗抗體檢測各種與抗原相應的抗體。 (四)競爭法 競爭法可用於測定抗原,也可用於測定抗體。以測定抗原為例,受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合,因此結合於固相的酶標抗原量與受檢抗原的量呈反比。操作步驟如下: (1)將特異抗體與固相載體連接,形成固相抗體。洗滌。 (2)待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液,使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原,則酶標抗原能順利地與固相抗體結合。如受檢標本中含有抗原,則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結合,競爭性地佔去了酶標抗原與固相載體結合的機會,使酶標抗原與固相載體的結合量減少。參考管中只加酶標抗原,保溫後,酶標抗原與固相抗體的結合可達最充分的量。洗滌。 (3)加底物顯色:參考管中由於結合的酶標抗原最多,故顏色最深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡,表示標本中抗原含量越多。 (五)捕獲法測IgM抗體 血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在,後者會干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗本多用捕獲法,先將所有血清IgM(包括異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上,在去除IgG後再測定特異性IgM。操作步驟如下: (1)將抗人IgM抗體連接在固相載體上,形成固相抗人IgM。洗滌。 (2)加入稀釋的血清標本:保溫反應後血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質成分。 (3)加入特異性抗原試劑:它只與固相上的特異性IgM結合。洗滌。 (4)加入針對特異性的酶標抗體:使之與結合在固相上的抗原反應結合。洗滌。 (5)加底物顯色:如有顏色顯示,則表示血清標本中的特異性IgM抗體存在,是為陽性反應。 (六)應用親和素和生物素的ELISA 親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,可以和4個生物素分子親密結合。現在使用更多的是從鏈黴菌中提取的鏈霉和素(strepavidin)。生物素(biotin)又稱維生素H,分子量244.31,存在於蛋黃中。用化學方法製成的衍生物,生物素-羥基琥珀亞胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產物。親和素與生物素的結合,雖不屬免疫反應,但特異性強,親和力大,兩者一經結合就極為穩定。由於1個親和素分子有4個生物素分子的結合位置,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類似晶格的復合體。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯起來,就可大提高ELISA的敏感度。 親和素-生物素系統在ELISA中的應用有多種形式,可用於間接包被,亦可用於終反應放大。可以在固相上先預包被親和素,原用吸附法包被固相的抗體或抗原與生物素結合,通過親和素-生物素反應而使生物素化的抗體或抗在相化。這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量,而且使其結合點充分暴露。另外,在常規ELISA中的酶標抗體也可用生物素化的抗體替代,然後連接親和素-酶結合物,以放大反應信號。