樹脂載玻片

❶ 免疫熒光甩片能將細胞固定在載玻片上么

免疫熒光基本實驗步驟

基本實驗步驟：
（1） 細胞准備。對單層生長細胞，在傳代培養時，將細胞接種到預先放置有處理過的蓋玻片的培養皿中，待細胞接近長成單層後取出蓋玻片，PBS洗兩次；對懸浮生長細胞，取對數生長細胞，用PBS離心洗滌（1000rpm，5min）2次，用細胞離心甩片機制備細胞片或直接制備細胞塗片。
（2） 固定。根據需要選擇適當的固定劑固定細胞。固定完畢後的細胞可置於含疊氮納的PBS中4℃保存3個月。PBS洗滌3×5 min。
（3） 通透。使用交聯劑（如多聚甲醛）固定後的細胞，一般需要在加入抗體孵育前，對細胞進行通透處理，以保證抗體能夠到達抗原部位。選擇通透劑應充分考慮抗原蛋白的性質。通透的時間一般在5-15min。通透後用PBS洗滌3×5 min。
（4） 封閉。使用封閉液對細胞進行封閉，時間一般為30min。
（5） 一抗結合。室溫孵育1h或者4℃過夜。PBST漂洗3次，每次沖洗5min。
（6） 二抗結合。間接免疫熒光需要使用二抗。室溫避光孵育1h。PBST漂洗3次，每次沖洗5min後，再用蒸餾水漂洗一次。
（7） 封片及檢測。滴加封片劑一滴，封片，熒光顯微鏡檢查。

（一）細胞准備
用於免疫熒光實驗的細胞可以是直接生長在蓋玻片上的貼壁細胞，也可以是經過離心後塗片的懸浮細胞或者是將取自體內的組織細胞懸液離心後塗片。貼壁良好的細胞一般在培養時直接放入coverslips讓細胞生長在其上即可，盡量避免使用貼壁性能不好的細胞進行免疫熒光實驗，以免後續的漂洗操作引起細胞脫落。少數實驗需要使用這類細胞或者懸浮細胞進行免疫熒光觀察，建議使用細胞離心甩片機制備細胞片或直接制備細胞塗片。

（二）固定和通透
除研究細胞表面抗原或不穩定抗原可不固定外，一般均應固定。固定的目的有三：
①防止細胞從玻片上脫落；
②除去防礙抗原-抗體結合的類脂；
③使標本易於保存。

標本的固定原則是：
①不能損傷細胞內的抗原；
②不能凝集蛋白質；
③應保持細胞和亞細胞結構；
④固定後應保持通透性，以保證抗體自由進入所有細胞與亞細胞組分與抗原結合。
常用的固定劑有多種，應根據所研究抗原的性質和所使用的抗體特性選擇適當的固定劑。通常固定方法可以分為兩類：有機溶劑和交聯劑。有機溶劑如甲醇和丙酮等可去除類脂並使細胞脫水，同時將細胞結構蛋白沉澱。交聯劑如多聚甲醛通常通過自由氨基酸基團形成分子間橋連，從而產生一種抗原相互連接的網路結構。交聯劑比有機溶劑更易於保持細胞的結構，但因為交聯阻礙抗體結合，可能會降低一些細胞組分的抗原性，因此需要增加一個通透步驟以使抗體能夠進入標本。兩種固定方法都可能使蛋白抗原變性，因此使用變性蛋白作為抗原生產的抗體在免疫熒光中可能更為有效。
最常用的固定劑有多聚甲醛和甲醇，少數情況也使用乙醇，丙酮及戊二醛等進行固定。通常，細胞結構抗原、病毒及一些酶類抗原使用丙酮、乙醇及高濃度的甲醛固定可獲得較好的結果，而細胞膜相關組分抗原一般以多聚甲醛固定。細胞器和細胞顆粒內的抗原一般也用多聚甲醛固定，並需要進行通透以使抗體能達到抗原表位。
通透步驟只在檢測細胞內抗原表位的時候才需要，因為抗體需要進入細胞內部去檢測蛋白。但是，如果待檢測的是跨膜蛋白，且其抗原表位處於胞質內區域，則同樣需要對細胞進行通透。相反，如果所檢測的抗原表位位於膜蛋白的胞外段，則不需要進行通透。丙酮本身具有通透作用，因此用丙酮作為固定劑時是不需要通透的。甲醇同樣具有通透作用，但有些場合並不適合用甲醇，因為一些表位對甲醇非常敏感。常用的通透劑是去垢劑，如Triton ，NP-40，以及Tween 20, Saponin, Digitonin 和 Leucoperm等。Triton和NP-40屬於烈性去垢劑，可部分溶解細胞核膜，因此非常適合核抗原檢測。但應該注意的是，如果在高濃度下使用或者作用時間過長，它們將破壞蛋白，從而影響實驗結果。Triton X-100是最常用的通透劑，但是它將破壞細胞膜，因此不適用於細胞膜相關抗原。後面一組去垢劑要溫和得多，它們可以在細胞質膜上形成足夠大的孔隙以允許抗體通過，但是不會溶解細胞質膜。適於胞質抗原或者質膜上靠近胞質一面的抗原，也適於可溶性的核抗原。
一般的操作程序是先固定後通透，但針對有些水不溶性的目的抗原的檢測宜先通透再固定，這樣做的原因主要是可以通過通透去除許多水溶性的蛋白，從而大大減少了免疫熒光的背景和非特異性信號。固定後以冷PBS液漂洗，最後以蒸餾水沖洗，防止自發性熒光。

（三）封閉
封閉的目的是為了減少抗體的非特異性結合，最常用的封閉劑為1% BSA, PBS pH 7.5，其他可選擇的封閉劑還有 1% gelatin, 1%bovine 或與二抗種屬相同的血清（3-10%）等。

（四）抗體孵育
直接免疫熒光法中的一抗和間接免疫熒光法中的二抗都是熒光抗體，因此在這些抗體孵育的時候必須注意避光。此外，為保證結合質量和防止乾燥，抗體孵育應盡量在濕盒中進行。

（五）封片及熒光觀察
標記好熒光的細胞片原則上可以直接進行觀察，特別是有時候封片不當反而使得前功盡棄。但在絕大多數情況下，為了保存結果，以便進一步觀察、照像、統計分析等，需作封片處理。常規的方法是採用甘油或中性樹脂封片，為了增強封片的效果，往往需要在封片時添加特殊的抗熒光淬滅劑。

（六）標本保存
由於熒光色素和蛋白質分子的穩定性都是相對的，因此隨著保存時間的延長，在各種條件影響下，標記蛋白可能變性解離，失去其應有的亮度和特異性。因此給標本的保存帶來一定的困難，所以在標本進行熒光染色之後應立即觀察。由於性能良好的抗熒光淬滅劑的出現，熒游標記的標本可以在低溫（4℃或-20℃）下保存相當長的時間。在某些情形下，考慮到實驗的成本及實驗條件，也可以採取權宜的辦法，比如固定標本片後低溫保存，在需要時再進行熒游標記，即隨用隨染。

❷ 密胺樹脂的XRD是什麼樣的，誰做過

高聚物樹脂在做抄XRD時，怎麼制備成為襲表面平滑的樣品？有的書中介紹使用冷壓機冷壓制樣，可是實驗室沒有冷壓機；有的是說先將聚合物溶解，然後制備成為膜，但是我想通過XRD來分析結晶度，溶解過程會不會改變其結晶性呢？各位高手支招幫助一下吧，不勝感激
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XRD要求樣品表面比較平整，因而壓制、成膜等方法當然都可以。關鍵看你想得到的是什麼成型條件下的樣品的結晶情況，因為不同加工歷史和熱歷史、以及溶劑等處理條件，樣品的結晶情況，包括晶型和結晶度等，都會發生很大變化。想做那種成型條件的結晶情況，就用那種熱歷史和處理條件制樣。
如果你只是手裡有一些原料，想測得樣品的本徵信息，可以問一下測試老師能否做粉末樣，因為大部分XRD除了可以做平整表面，還可以做粉末樣，

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如果你能把樣品磨成粉末，那就可以直接做粉末XRD了。

FL平凡
磨成粉末，然後弄到XRD的載玻片吧...

❸ 位錯研究方法有哪些

有多種方法可以觀察和研究位錯的分布、位錯的密度、位錯的方向以及確定位錯的性質，主要包括：
（1）表面法（即浸蝕法）：通過化學浸蝕、電浸蝕或熱浸蝕，將暴露於晶體顆粒表面的位錯顯示出來。不同類型的位錯，其表現有所差異。
（2）綴飾法：在透明晶體內以沉澱顆粒綴飾位錯，以顯示位錯的位置。
（3）透射電子顯微鏡分析：用它可以以極高放大倍率研究從0.1～0.4μm厚度樣品中的位錯，這是應用最廣泛的一種技術。
（4）X射線衍射法：利用X射線散射的局部差異來顯示位錯。
（5）場離子顯微術：它可以顯示單個原子的位置。
在上述分析方法中，應用透射電子顯微鏡開展的位錯研究最為有效和常用，廣泛用於觀察位錯及層錯、雙晶、晶界及空洞等其他晶體缺陷。
透射電子顯微鏡技術主要是利用襯度技術獲得位錯等顯微構造的圖像，它可以將各種位錯的形態類型清楚地顯示出來。同時，還可以用衍射花樣確定入射電子束及被觀察樣品部分的結晶學方位。
透射電子顯微鏡觀察所需要的薄片需要特殊的制備工藝，一般需要用很薄的超薄片，其厚度取決於礦物的吸收系數和入射電子能。在100kV要求的厚度為1～0.3μm。電壓為1MeV時，厚度為1μm。樣品制備過程是先將塊狀樣品切割成薄片，將其一面磨平並拋光，用光學樹脂膠（熱熔性膠）將樣品光面粘在載玻片上，研磨至小於0.03mm左右的薄片，拋光樣品表面。然後在光學顯微鏡和立體顯微鏡下，選擇合適的目標礦物顆粒。用環氧樹脂膠在目標樣品上粘一個透射電鏡專用銅環。固化後，在酒精燈火焰上烤熔樣品和載玻片之間的光學樹脂膠，取下目標樣品。要獲得超薄片最有效的辦法是離子減薄法，將樣品放入離子減薄儀在高真空的條件下用氬離子轟擊，進行離子減薄，直至在樣品中心穿孔，並出現薄區。然後鍍上碳膜即可在TEM下對超薄片或擊穿孔薄片的邊緣部分進行觀察。觀察時要求迅速快捷，以防電子輻射損傷嚴重影響圖像。

❹ 怎樣用中性樹脂封片

晾乾後滴在上面兩滴中性樹脂然後放蓋玻片，輕壓蓋玻片讓液滴充滿整個玻片，然後晾乾，最好晾一個星期再看，不然容易脫落。當然不用油鏡的話應該就不用晾那麼久了。

❺ 載玻片是什麼 如題

您好： 作用：載玻片是用顯微鏡觀察東西詩用來放東西的玻璃片,然後將蓋玻片放置其上,用作觀察生物.
用法：
1、塗片法是將材料均勻地塗布在載玻片上的一種製片方法.
塗片材料有單細胞生物、小型藻類、血液、細菌培養液、動植物的疏鬆組織、精巢、花葯等.
塗片時應注意：（1）載玻片必須清潔.（2）載玻片要持平.（3）塗層須均勻.塗抹液滴在載玻片中間偏右,用解剖刀刃或牙簽等塗勻.（4）塗層要薄.用另一載玻片作推片,沿滴有塗抹液的載玻片面（二載玻片夾角應為30°-45°）由右向左輕輕推動,塗成均勻一薄層.（5）固定.如需固定可用化學固定劑或乾燥法（細菌）固定.（6）染色.細菌用亞甲基藍,血液用瑞氏染液.染色液要蓋住全部塗面.（7）沖洗.用吸水紙吸干或烤乾.（8）封片.長期保存用加拿大的樹膠封片.
2、壓片法是將生物材料置於載玻片和蓋片之間,施加一定壓力,將組織細胞壓散的一種製片方法.
3、裝片法是將生物材料採取整體封固製成玻片標本的方法,用此法可製成臨時或永久裝片.
裝片材料有：微小生物如衣藻、水綿、變形蟲、水螅,植物的葉表皮；昆蟲的翅、足、口器,人的口腔上皮細胞等.
裝片法製作時應注意：（1）手持載玻片時,應注意持平,或放在平台上.滴水時水量要適當,以恰好被蓋玻片蓋滿為度.（2）應將材料用解剖針或鑷子展開不使重疊,展平在同一平面上.（3）放蓋玻片時,從一側慢慢蓋在水滴上,防止出現氣泡.（4）染色時,將一滴染色液滴在蓋玻片的一側,用吸水紙從另一側吸引,使蓋玻片下的標本均勻著色.著色後,用同樣的方法,滴一滴清水,把染色液吸出後,在顯微鏡下觀察.
4、切片 是用從生物體上切取的薄片製成的玻片標本.
因要求不同,可用刀片進行徒手切片,也可將組織塊包埋於石蠟或火棉膠中或以低溫冰凍,用切片機切片.切成5～10微米薄片,供光學顯微鏡觀察.用環氧樹脂或甲基丙烯酸包埋組織塊切制的超薄切片,其厚度在20～50納米,專供在電子顯微鏡下觀察.一般教學用的如根尖、莖的切片通稱石蠟切片.
清理方法：用清水洗或用酒精洗,然後再用棉花或紗布擦乾凈（最好用擦鏡紙,手指避免接觸載玻片,以免在其上留下指紋,影響下次觀察使用）

❻ 番茄果肉液汁製成的玻片標本是裝片還是塗片

1、塗片法是將材料均勻地塗布在載玻片上的一種製片方法。
塗片材料有單細胞生物、小型藻類、血液、細菌培養液、動植物的疏鬆組織、精巢、花葯等。
塗片時應注意：（1）載玻片必須清潔。（2）載玻片要持平。（3）塗層須均勻。塗抹液滴在載玻片中間偏右，用解剖刀刃或牙簽等塗勻。（4）塗層要薄。用另一載玻片作推片，沿滴有塗抹液的載玻片面（二載玻片夾角應為30°-45°）由右向左輕輕推動，塗成均勻一薄層。（5）固定。如需固定可用化學固定劑或乾燥法（細菌）固定。（6）染色。細菌用亞甲基藍，血液用瑞氏染液。染色液要蓋住全部塗面。（7）沖洗。用吸水紙吸干或烤乾。（8）封片。長期保存用加拿大的樹膠封片。

2、壓片法是將生物材料置於載玻片和蓋片之間，施加一定壓力，將組織細胞壓散的一種製片方法。

3、裝片法是將生物材料採取整體封固製成玻片標本的方法，用此法可製成臨時或永久裝片。
裝片材料有：微小生物如衣藻、水綿、變形蟲、水螅，植物的葉表皮；昆蟲的翅、足、口器，人的口腔上皮細胞等。
裝片法製作時應注意：（1）手持載玻片時，應注意持平，或放在平台上。滴水時水量要適當，以恰好被蓋玻片蓋滿為度。（2）應將材料用解剖針或鑷子展開不使重疊，展平在同一平面上。（3）放蓋玻片時，從一側慢慢蓋在水滴上，防止出現氣泡。（4）染色時，將一滴染色液滴在蓋玻片的一側，用吸水紙從另一側吸引，使蓋玻片下的標本均勻著色。著色後，用同樣的方法，滴一滴清水，把染色液吸出後，在顯微鏡下觀察。

4、切片 是用從生物體上切取的薄片製成的玻片標本。
因要求不同，可用刀片進行徒手切片，也可將組織塊包埋於石蠟或火棉膠中或以低溫冰凍，用切片機切片。切成5～10微米薄片，供光學顯微鏡觀察。用環氧樹脂或甲基丙烯酸包埋組織塊切制的超薄切片，其厚度在20～50納米，專供在電子顯微鏡下觀察。一般教學用的如根尖、莖的切片通稱石蠟切片。

❼ 怎樣製作 玻片標本(答案)

取載玻片，點液，加蓋玻片，壓實，OK

❽ 中學常用的四種制載玻片的方法

1、塗片法是將材料均勻地塗布在載玻片上的一種製片方法。
塗片材料有單細胞生物、小型藻類、血液、細菌培養液、動植物的疏鬆組織、精巢、花葯等。
塗片時應注意：（1）載玻片必須清潔。（2）載玻片要持平。（3）塗層須均勻。塗抹液滴在載玻片中間偏右，用解剖刀刃或牙簽等塗勻。（4）塗層要薄。用另一載玻片作推片，沿滴有塗抹液的載玻片面（二載玻片夾角應為30°-45°）由右向左輕輕推動，塗成均勻一薄層。（5）固定。如需固定可用化學固定劑或乾燥法（細菌）固定。（6）染色。細菌用亞甲基藍，血液用瑞氏染液。染色液要蓋住全部塗面。（7）沖洗。用吸水紙吸干或烤乾。（8）封片。長期保存用加拿大的樹膠封片。

2、壓片法是將生物材料置於載玻片和蓋片之間，施加一定壓力，將組織細胞壓散的一種製片方法。

3、裝片法是將生物材料採取整體封固製成玻片標本的方法，用此法可製成臨時或永久裝片。
裝片材料有：微小生物如衣藻、水綿、變形蟲、水螅，植物的葉表皮；昆蟲的翅、足、口器，人的口腔上皮細胞等。
裝片法製作時應注意：（1）手持載玻片時，應注意持平，或放在平台上。滴水時水量要適當，以恰好被蓋玻片蓋滿為度。（2）應將材料用解剖針或鑷子展開不使重疊，展平在同一平面上。（3）放蓋玻片時，從一側慢慢蓋在水滴上，防止出現氣泡。（4）染色時，將一滴染色液滴在蓋玻片的一側，用吸水紙從另一側吸引，使蓋玻片下的標本均勻著色。著色後，用同樣的方法，滴一滴清水，把染色液吸出後，在顯微鏡下觀察。

4、切片 是用從生物體上切取的薄片製成的玻片標本。
因要求不同，可用刀片進行徒手切片，也可將組織塊包埋於石蠟或火棉膠中或以低溫冰凍，用切片機切片。切成5～10微米薄片，供光學顯微鏡觀察。用環氧樹脂或甲基丙烯酸包埋組織塊切制的超薄切片，其厚度在20～50納米，專供在電子顯微鏡下觀察。一般教學用的如根尖、莖的切片通稱石蠟切片。

❾ 昆蟲樹脂標本如何製作

工具/原料：ab樹脂膠、硅膠磨具、一次性塑料水杯、電子天平等，製作流回程如下：答

1、准備好一個一次性杯子和一個大小合適的模具。

❿ 把載玻片和壓玻片粘在一起的膠水可以是普通膠水嗎怎麼粘

那不是膠水。。。。
用的是樹脂或者蠟。