藍莓花色素樹脂法分離純化

㈠ 植物多糖一般都是什麼顏色的

一、植物多糖的提取

1 溶劑提取法

1．1 水提法

水對植物組織的穿透力強，提取效率高，在生產上使用安全、經濟。用水作溶劑來提取多糖時，可以用熱水浸煮提取，也可以用冷水浸提。一般植物多糖提取採用熱水浸提法，該法所得多糖提取液可直接或離心除去小溶物；或者利用多糖不溶於高濃度乙醇的性質，沉澱提純多糖；但由於不同性質或不同相對分子質量的多糖沉澱所需乙醇濃度不同，它也可以用於樣品中不同多糖組分的分級分離；還可按多糖不同性質在粗分階段利用混合溶劑提取法對植物中不同的多糖進行分離；其中，以乙醇沉澱最為普遍。但以根莖為主的植物體,細胞壁多糖含量高,熱水直接提取率不高。此時為破壞細胞壁,增加多糖的溶出，有兩種處理方法:一為酶解,二為弱鹼溶解。

1．2酸鹼提法

有些多糖適合用稀酸提取，並且能得到更高的提取率。但酸提法只在一些特定的植物多糖提取中佔有優勢，目前報道的並不多。而且即使有優勢，在操作上還應嚴格控制酸度，因為酸性條件下可能引起多糖中糖苷鍵的斷裂。

有些多糖在鹼液中有更高的提取率，尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。採用的稀鹼多位為0．1mol／L氫氧化鈉、氫氧化鉀，為防止多糖降解，常通以氮氣或加入硼氫化鈉或硼氫化鉀。同樣，鹼提優勢也是因多糖類的不同而異。與酸提類似，鹼提中鹼的濃度也應得到有效控制，因為有些多糖在鹼性較強時會水解。另外，稀酸、稀鹼提取液應迅速中和或迅速透析，濃縮與醇析而獲得多糖沉澱。

1．4 生物酶提取法

酶技術是近年來廣泛應用到有效成份提取中的一項生物技術，在多糖的提取過程中，使用酶可降低提取條件，在比較溫和的條件中分解植物組織，加速多糖的釋放或提取。此外，使用酶還可分解提取液中澱粉、果膠、蛋白質等的產物，常用的酶有蛋白酶，纖維素酶，果膠酶等。

1．5 超聲提取法

超聲波是一種高頻率的機械波，其主要原理是利用超聲波產生的「空化作用」對細胞膜的破壞，有利用植物有效成分的釋放，而且超聲波能形成強大的沖擊波或高速射流，有效地減小、消除與水相之間的阻滯層，加大了傳質效率，有助於溶質的擴散。另外，超聲波的熱效應使水溫基本在57℃，對原料有水浴作用。超聲波提取與傳統的提取消鋒方法相比，有提取效率高、時間短、耗能低等優點。超聲提取的影響因素有：超聲時間、超聲頻率（一般低頻中提取效率高，但也有例外）、料液比和溫度等。

1．6 微波提取

微波是頻率介於300MHz和300GHz之間的非電離電磁波，微波提取的原理是微射線輻射於溶劑並透過細胞壁到達細胞內部，由於溶劑及細胞液吸收微波能 細胞內部溫度升高，壓力增大，當壓力超過細胞壁的承受能力時，細胞壁破裂，位於細胞內部的有效成份從細胞中釋放出來，傳遞轉移到溶劑周圍被溶劑溶解。微波技術應用於植物細胞破壁，有效地提高了收率。具有穿透力強、選擇性高、加熱效率高等特點。影響微波浸提的主要因素為浸提時間、樣品和提取溶劑的含水量，溶劑的介電常數和電導率（介電常數和電導率的溶劑對微波的吸收較好）、微波功率等。但是由於微波泄漏對操作兄橋液者影響很大，因而對設備的要求較高，這對微波的研究及應用帶來了一定的困難。

二、植物多糖的分離純化

在多糖提取物中，常會有無機鹽、蛋白質、色素及小分子物質等雜質，必須分別除去．一般是先脫除非多糖組分，再對多糖組分進行分級．

2．1 除蛋白

除蛋白質時一般選擇能使蛋白質沉澱而不使多糖沉澱的試劑來處理，如酚、三氯乙酸、鞣酸等。但必須處理時間短，溫度低，避免多糖降解。Sevage法（氯仿：戊醇/丁醇=4：1）和三氟三氯乙烷法在避免降解上有較好效果但要達到除盡游離蛋白質的目的仍需反復處理。如能加入蛋白質水解酶，使羨物蛋白質大分子進行一定程度的降解，再用Sevage法處理，一般效果更好。

為了避免使用有機溶劑也可採用反復凍融的方法除蛋白，將多糖液濃縮後，一20℃室溫反復凍融7～8次，離心除去蛋白質。另外，蛋白質在等電點時溶解度最小，用氫氧化鈣飽和液調pH10～pH11可除去偏鹼性的蛋白質，然後再用硫酸調pH5～pH6，可除去偏酸性的蛋白質。凍融和等電點沉澱除蛋白質操作簡單，但多糖液里往往有低濃度的蛋白質殘留，應與其它方法結合使用。

2．2 脫色

植物多糖提取物中含有酚類化合物而使其顏色較深，可用吸附劑(纖維素、硅藻土、活性炭等)、離子交換柱(DEAE一纖維素)、氧化劑(H2O2)等脫除。活性炭比表面積大，吸附能力強，在進行當歸多糖的提取時只向多糖液中加入了0．1％左右的活性炭，煮沸後濾過即完成了脫色操作。此法成本低廉，適合工業化生產。

2．3 除小分子雜質

小分子雜質如低聚寡糖的殘留往往影響多糖的生物活性，需要進一步脫除，提高純度。傳統的方法是透析法，該法操作簡單、技術成熟，但周期長，往往需要2一3天，常溫下操作有可能造成多糖的霉變，必要時需加入少量防腐劑或需在低溫條件下進行。隨著膜分離技術的發展，纖維濾器透析法已經發展起來了，它利用不同孔徑的膜使大小不同的分子分級，這種方式可縮短生產周期，而且條件溫和，無疑是多糖脫除雜質的一條新途徑。

2．4 多糖的分級純化

採用一般方法提取的多糖通常是多糖的混合物，分級的方法可達到純化的目的．可按溶解性不同進行分級、按分子大小和形狀分級(如分級沉澱、超濾、分子篩、層析等)，也可按分子所帶基團的性質分級．

2．4．1按溶解性不同分離

2.4.1.1分步沉澱法

分步沉澱法是根據不同多糖在不同濃度低級醇、酮中具有不同溶解度的性質，從小到大按比例加入甲醇或乙醇或丙酮進行分步沉澱．

2.4.1.2 鹽析法

鹽析法是根據不同多糖在不同鹽濃度中溶解度不同而將其分離的一種方法。常用的鹽析劑有氯化鈉、氯化鉀、硫酸銨等，其中以硫酸銨最佳。

2.4.2 按電離性質不同分離

2.4.2.1季胺鹽沉澱法

季胺氫氧化物是一類乳化劑，能與酸性多糖形成不溶性化合物季銨絡合物，此絡合物在低離子強度的水溶液中不溶解而產生沉澱。若提高多糖液pH值或加入硼砂緩沖液，也可使中性多糖沉澱分離。常用季銨鹽有十六烷基三甲基季銨鹽的溴化物及其氫氧化物和十六烷基吡啶。

2．4．3 柱層析法

2.4.3.1凝膠柱層析法

凝膠柱層析法常用的凝膠有葡聚糖凝膠(Sephadex)和瓊脂糖凝膠(Sepharose)，以不同濃度的鹽溶液和緩沖溶液作為洗脫劑，從而使不同大小的多糖分子得到分離純化，但不適宜粘多糖的分離。

2.4.3.2纖維素陰離子交換劑柱層析法

纖維素陰離子交換劑柱層析法常用的交換劑為DEAE一纖維素和ECTEOLA一纖維素，分類硼砂型和鹼型兩種，洗脫劑可用不同濃度鹼溶液、硼砂溶液、鹽溶液，其優點可吸附雜質、純化多糖，並適用於分離各種酸性、中性多糖和粘多糖。如百合多糖、北沙參多糖、太子參多糖等。

2.4.3.3 活性炭柱層析法

活性炭吸附量大、效率高，是分離水溶性物質的常用吸附劑。柱層析時活性炭中常拌入等量的硅藻土作稀釋劑，以增加溶液的流速。糖溶液上柱後先用水洗脫無機鹽、單糖等再依次增加乙醇濃度進行洗脫。

2.4.3.4 離子交換柱層析和普通凝膠柱層析聯用法

有些植物的多糖成分復雜， 除中性多糖外，還含有糖醛酸等，因此往往兩種不同性質的色譜柱聯用才能得到單一多糖組分。

2.4.3.5 三種層析柱聯用

採用離子交換葡聚糖凝膠柱、丙烯葡聚糖凝膠柱和葡聚糖凝膠柱三者聯用，即先進行DEAE—SephadexA柱層析，用蒸餾水洗脫。水洗組分進一步用SephacrylS柱層析，得到主要組分再用SephadexG一100柱層析，有時會有較高的得率。

三、多糖的純度鑒定

經過分級純化的多糖在測定結構前須進行純度鑒定．而且多糖的純度不能用通常化合物的純度標准來衡量，因為即便是多糖純品，其微觀也並不均一，僅代表相似鏈長的多糖分子的平均分布，通常所謂的多糖純品也只是一定相對分子質量范圍的多糖的均一組分．目前常用於多糖純度的鑒定方法有：高效液相、 凝膠層析法、電泳法、色譜法、旋光度法等．

四、常見問題

多糖制備過程中蛋白質的脫除是目前分離純化多糖的難點。Sevag法需要消耗大量的有機溶劑，且操作煩瑣；三氟三氯乙烷的沸點較低(bp56℃)易揮發，不宜大量應用；三氯乙酸可引起多糖的降解，從而影響其生理活性；酶價格昂貴，不適合工業化生產。可以借鑒其它蛋白質脫除的方法，例如用天然澄清劑能簡化提取工藝，提高多糖純度。 脫色也是多糖提取純化過程中面臨的一個難題。活性炭會吸附多糖而造成多糖的損失；H2O2氧化脫色容易引起有些多糖的降解。

㈡ 如何提取花青素

花青素，是一種熱敏性活性物質。屬於水溶性多酚黃酮類化合物，其特殊的結構和化學成分賦予了花青素多種生物活性，這些活性物質對溫度較為敏感，當所在環境溫度超過一定界限後，就會失活，也就是我們俗話說的死掉。（比如我們都知道，乳酸菌、益生菌等都屬於熱敏性活性物質，不能加熱，否則失去活性就會失去其主要作用。）花青素失活就會失去其特有的功效作用。
有機溶劑萃取法
這是目前國內外最廣泛使用的提取方法。多數選擇甲醇、乙酮、丙酮等混合溶劑對材料進行溶解過濾，通過調節溶液酸鹼度萃取濾液中的花青素。國內吳信子等用鹽酸一甲醇溶液提取，然後用紙層析法(中號)和柱層析法(聚乙醯胺)進行花色苷的分離 。目前，有機溶劑萃取法已成功地應用於諸如葡萄籽、石榴皮、藍莓等絕大多數含花青素物質的提取分離。有機溶劑萃取法的關鍵是選擇有效溶劑，要求既要對被提取的有效成分有較大溶解度，又要避免大量雜質的溶解。該方法原理簡單，對設備要求較低，不足之處是大多數有機溶劑毒副作用大且產物提取率低。
2水溶液提取法
有機溶劑萃取的花青素多有毒性殘留且生產過程環境污染大，有鑒於此，水溶液提取應運而生。該方法一般將植物材料在常壓或高壓下用熱水浸泡，然後用非極性大孔樹脂吸附；或直接使用脫氧熱水提取，再採用超濾或反滲透，濃縮得到粗提物。它是Duncan和Gilmour(1998)發明的提取花青素的方法 ，此方法設備要求簡單，但產品純度低。
3超臨界流體萃取法
超臨界流體萃取是利用壓力和溫度對超臨界流體溶解能力的影響進行提取。這種方法產品提取率高，但設備成本過高。孫傳經 採用超臨界CO：萃取法從銀杏葉、黑加侖籽及葡萄籽中提取花青素工藝進行了研究。該工藝中CO 和改性劑可循環使用，對環境無污染。

㈢ 黃酮類化合物的提取方法有哪些

1、醇提取法

黃酮類化合物提取最常用一種方法，常用的有機溶劑主要有乙醇、乙醚、甲醇和乙酸乙酯等，其中乙醇是最常用的。

2、微波提取法

微波提取技術又稱微波萃取技術，其最大的優點是耗能耗材少、無污染，尤其對特定的葯材提取具有高選擇性。

3、超臨界萃取技術

超臨界萃取是一種較廣泛使用的葯物提取、分離手段，其最大的優點是無有機溶劑殘留，保證了提取成分的100%純天然。

4、酶解法

酶解法是一種較好的輔助提取方法。酶具有高度的選擇性，因此對不同提取材料，選擇合適的酶對提取率影響較大。

5、膜分離提取法

膜分離技術也是一種常用的輔助提取技術，其中超濾法作為唯一能用於分子級別的分離方法廣泛的應用於黃酮類化合物的提取分離。利用超濾技術分離純化黃酮化合物最大的優點是操作簡便、無需加熱、不破壞活性成分的結構，純化和濃縮一步完成，超濾裝置還可反復使用。

(3)藍莓花色素樹脂法分離純化擴展閱讀

黃酮類化合物的顏色與分子中存在的交叉共軛體系及助色團（-OH）等的類型、數目及取代位置有關。一般來說，黃酮、黃酮醇及其苷類多呈灰黃至黃色，查爾酮為黃色至橙黃色，而二氫黃酮、二氫黃酮醇、異黃酮類等因不存在共軛體系或共軛很少，故不顯色。

花色素及其苷元的顏色，因pH的不同而變，一般呈紅（pH<7）、紫（7<8.5）、藍（PH>8.5）等顏色。

黃酮苷元一般難溶或不溶於水，易溶於甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有機溶劑，易溶於稀鹼液。黃酮類化合物的羥基糖苷化後，水溶性相應加大，而在有機溶劑中的溶解度相應減少。黃酮苷一般易溶於水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶等溶劑，難溶於乙醚、三氯甲烷、苯等有機溶劑。

黃酮類化合物因分子中多有酚羥基而呈酸性，故可溶於鹼性水溶液、吡啶、甲醯胺及二甲基甲醯胺中。有些黃酮類化合物在紫外光（254nm或365nm）下呈不同顏色的熒光，氨蒸汽或碳酸鈉溶液處理後熒光更為明顯。多數黃酮類化合物可與鋁鹽、鎂鹽、鉛鹽或鋯鹽生成有色的絡合物

㈣ 含花青素多的蔬菜和水果是哪些

一、含花青素多的蔬菜

1、茄子

茄子皮的紫色來源於花青素及其糖苷，帶皮吃茄子就會令花青素得以保存。茄子還富含維生素P，這種物質能增強人體細胞間的黏著力，增強毛細血管的彈性，減低毛細血管的脆性及滲透性，防止微血管破裂出血，使心血管保持正常的功能。

2、紫甘藍

紫甘藍是天然減肥餐的代名詞，富含花青素和各類維生素和礦物質，纖維素更是沒的說。花青素具有很好的抗氧化作用，是純天然的抗衰老營養補充劑，對高血壓患者也很有益。想要瘦身快又不缺營養，多吃紫甘藍絕不會錯。

3、紫色洋蔥

紫色洋蔥花青素含量雖說不是最豐富，卻有很好的增強細胞活力的作用。洋蔥是含有前列腺素A的食物，能擴張血管、改善血液粘度，降血壓、能減少外周血管和改善冠狀動脈的血流量，有預防血栓形成作用。硒元素配上花青素，能促進鈉鹽排泄，齡血液恢復年輕態。

二、含花青素多的水果

1、黑桑葚

微甜多汁的桑葚，從唐朝就已經是宮廷御用補品了，就是因為其中含有豐富的花青素帶來抗氧化功效。黑桑葚除了含有豐富的花青素以外，還含有豐富的活性維生素、氨基酸、白藜蘆醇等成分。

2、藍莓

藍莓是花青素王國當之無愧的皇後，是已經證實的含有花青素最多的水果。藍莓中富含大量超抗氧化物——OPC花青素，常吃可以讓你眼睛明亮、皮膚緊致。藍莓中的深藍色色素含有能夠促進血液流入大腦的化學元素，有補充頭腦活力的作用。

3、楊梅

楊梅味道很酸，含有很多的植物酸，PH也比較低，花青素在這種環境中呈現出紫黑色，楊梅在成熟之後花青素的含量也很高。

(4)藍莓花色素樹脂法分離純化擴展閱讀：

花青素的作用：

1、抗癌症花青素能夠有效清除人體自由基，長期口服適量的花青素，能夠起到預防癌症的作用。

2、抗氧化花青素對人體而言，是一種很強的抗氧化劑，對人體的衰老有逐步預防和緩解的作用，藍莓許多抗氧化生化活性都可與左旋維他命C相提並論，天然藍莓萃取精華花青素的抗氧化性甚至能比維生素E高出50倍，比維生素C高出20倍。

3、改善睡眠花青素具有深入細胞保護細胞膜不被自由基氧化的作用，具有強力抗氧化和抗過敏功能，能穿越血腦屏障，可保護腦神經不被氧化，能穩定腦組織功能，保護大腦不受有害化學物質和毒素的傷害。

4、修復肌膚花青素通過對彈性蛋白酶和膠原蛋白酶的抑制使皮膚變得光滑而富有彈性，從內部和外部同時防止由於過度日曬所導致的皮膚損傷等等。

㈤ 哪些食物含青花素

OPC是一種效力最強的純天然黃酮類物質，學名為原青花素低聚物。大多從葡萄籽中提取出來，是目前所知的最高效抗氧化的自由基清除劑。

原花青素的幾種提取方法

原花青素是植物中廣泛存在的一大類多酚類化合物的總稱，具有多種生物活性，以其高效、低毒、高生物利用度而著稱，是保健食品中使用較多的原料之一。國內使用的原花青素主要來源於葡萄籽，國外還有從葡萄籽、松樹皮中提取的。

原花青素的提取方法主要有以下幾種：

1、溶劑提取：研究者將葡萄籽脫脂後，採用乙醇、丙酮或水作為溶劑，再用乙酸乙酯或正丁醇萃取分離粗提物，也可用大孔樹脂對粗提物進行分級分離，得到成品。

2、超臨界CO2萃取法：利用臨界溫度狀態下，CO2能溶解多種物質的特點，以高壓下的高密度超臨界流涕為溶劑萃取所需組分，然後採用升溫、降壓及吸附等手段將溶劑與所萃取的組分分離。

3、微波法：可使分子做高速變換運動，從而產生鍵的震動，同時產生大量熱能，促使細胞破裂，使有效成分擴散至溶劑中。

以上幾種方法，目前大孔樹脂分離純化法使用最為普遍。
松樹、柏樹、銀杏、紅杉、雲杉，可以提取出青花素，野生全松茶是從松樹、柏樹、銀杏、紅杉、雲杉五種壽命超過千年的樹種的樹皮和樹葉中提取的一種活性物質，含有青花素！
其實自己也不是很懂，檢索了一點，說的不好請見諒！

㈥ 如何提取花青素

花青素，又稱花色素，是自然界一類廣泛存在於植物中的水溶性天然色素，是花色苷水解而得的有顏色的苷元，水果、蔬菜、花卉中的主要呈色物質大部分與之有關，在植物細胞液泡不同的ph值條件下，花青素使花瓣呈現五彩繽紛的顏色，已知花青素有20多種，食物中重要的有6種，即天竺葵色素、矢車菊色素、飛燕草色素、芍葯色素、牽牛花色素和錦葵色素，自然狀態的花青素都以糖苷形式存在，稱為花色苷，很少有游離的花青素存在，隨著科技的發展,人們對口服飲料的安全性越來越重視，天然材料的開發利用已成為口服飲料發展使用的總趨勢，而花青素作為營養強化劑，在口服飲料中的應用也越來越廣泛。

花青素屬於生物類黃酮物質，而黃酮物質最主要的生理活性功能是自由基清除能力和抗氧化能力，在口服飲料中花青素作為營養強化劑，受到廣泛使用，現有的提取花青素的原料中，花青素的含量有限，花費大量的原料只能提取少量的花青素，這不但增加了花青素的提取成本還嚴重影響了花青素的產量，現有的花青素產量已經不能滿足口服飲料對花青素的需求。

提取方法：

步驟一：花瓣打碎，先使用流動水對重瓣紅玫瑰花進行清洗，然後將清洗後的重瓣紅玫瑰花放入打碎機中進行打碎；

步驟二：萃取，向打碎機中添加蔗糖，然後使用打碎機繼續對重瓣紅玫瑰花進行打碎，當蔗糖完全溶解後得到混合溶液；

步驟三：過濾，對混合溶液進行過濾，過濾可以得到固體和溶液，得到的溶液即為花青素半成品；

步驟四：防腐處理，先在花青素半成品中添加檸檬酸，然後再對花青素半成品進行巴氏殺菌，得到花青素成品；

步驟五：包裝，將花青素成品裝入包裝桶中，並將其放入倉庫。

以上所述重瓣紅玫瑰花為剛採摘下來的新鮮重瓣紅玫瑰花花瓣。