❶ 透析的原理是什麼
通過小分來子經過半透自膜擴散到水(或緩沖液)的原理,將小分子與生物大分子分開的一種分離純化技術。
分類:用於醫學上的透析大致分為三大類:血液透析、腹膜透析、結腸透析。
適用范圍:使體液內的成分(溶質或水分)通過半透膜排出體外的治療方法。常用於急性或慢性腎功能衰竭、葯物或其他毒物在體內蓄積的情況。常用的透析法有血液透析及腹膜透析。
需要接受透析治療的情況:
透析療法是利用半滲透膜來去除血液中的代謝廢物和多餘水分並維持酸鹼平衡的一種治療方法。
一般來說,患者血肌酐濃度超過700,或者腎小球濾過率在15ml/min/1.73m2以下時,如果出現了水負荷過重(比如有水腫或腹脹的症狀)、嚴重的營養不良、葯物難以糾正的高鉀血症、高磷血症等,就需要做好隨時做透析的准備。
血透和腹透的區別:
血透更容易達到充分性,但對心血管要求條件高,透析時間相對固定,必須按時到醫院進行透析。
腹透禁忌證較少,不受時間限制,可以在家進行操作治療,但容易因衛生條件不佳或者操作不當誘發腹膜炎。
❷ 生物分析 | 葯物-血漿蛋白結合率研究的方法和要求
在葯物研發的旅程中,葯物與血漿蛋白的相互作用起著關鍵作用,血漿蛋白結合率(PPB)揭示了葯物的有效活性成分。這一比率越高,葯物在游離狀態下的濃度越大,葯效往往更為顯著。了解PPB是評估葯物代謝和分布的重要步驟,測定方法包括平衡透析(ED)、超濾(UF)和超速離心(UC)。
表1/2中,詳細列出了依據化合物性質,體外或體內研究中各種技術的使用頻率,為實驗設計提供了指導原則。[3]
❸ wb的操作過程是什麼
Western Blot(WB)實驗是一種用於檢測特定蛋白質在樣本中的表達水平的技術。以下是WB實驗的標准流程和一些關鍵注意事項:
1. 樣品制備
- 收集目標蛋白質的來源樣本,如細胞裂解液或組織提取液。
- 確保樣品在冰上處理,以保持蛋白質的穩定性和活性。
- 將樣品與SDS-PAGE樣品緩沖液混合,加熱至煮沸,然後離心以去除細胞碎片和不溶物質。
2. SDS-PAGE電泳
- 准備適當濃度的SDS-PAGE凝膠,通常為10%-15%的梯度凝膠。
- 小心地將樣品載入到凝膠孔中,注意避免氣泡的產生。
- 進行電泳分離,期間注意電流強度的控制,以確保蛋白質分離的均勻性。
3. 蛋白轉移
- 使用半透膜(如PVDF或NC膜)進行蛋白轉移,確保膜與凝膠和電源正確接觸。
- 轉移過程中,遵循設備說明書推薦的電壓和時間,以優化蛋白轉移效率。
- 轉移後,檢查膜的質量,必要時進行再次轉移。
4. 抗體雜交
- 將特異性一抗添加到膜上,並在適宜的溫度和條件下進行雜交。
- 注意一抗的稀釋比例和雜交時間,以確保信號的靈敏度和特異性。
- 雜交後,使用洗滌液去除未結合的抗體。
5. 顯色和定量
- 添加顯色底物,如ECL,根據說明書進行操作,並使用成像系統捕獲信號。
- 在顯色前,通過亞硫酸鹽洗滌等步驟減少背景雜訊,提高信號-背景比。
- 通過比較目標蛋白與內參蛋白的信號強度,對蛋白質的表達水平進行定量分析。
在整個WB實驗過程中,應嚴格控制實驗條件,確保試劑質量,並注意實驗安全,以獲得准確和可重復的結果。