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自製半透膜是什麼

發布時間:2025-02-10 04:30:02

1. 半透膜的制備方法

1.在100mL燒杯中里加入10mL濃硝酸(14.1g/mL),配成混合溶液,冷卻到約20℃。把一小塊內脫脂棉浸入混合溶液中8~容10min取出後充分洗凈,涼干,得到纖維素硝酸酯。
2.在試劑瓶中取乙醚、乙醇各10mL,再加入1g上述乾燥的纖維素硝酸酯,不斷振盪,放置1~2天,就生成透明的膠棉液。
3.取3mL上述自製或市售5%的膠棉液,加入乾燥的150mL錐形瓶中,將錐形瓶橫斜不斷轉動使瓶的內壁和瓶口都均勻沾上膠棉液。倒出多餘的膠棉液,然後倒置約1min使乙醚、乙醇不斷蒸發,直到乾燥。逐步剝離瓶口的薄膜,沿瓶壁薄膜夾縫注入蒸餾水,使得薄膜逐步跟瓶壁分離,輕輕取出,浸入蒸餾水中備用。 把定量濾紙放入盛有2:1的水-硫酸的燒杯中,用玻棒輕輕撳壓,使它浸沒均勻(玻棒和濾紙都不能帶水)。浸泡60~90s後取出,立即用蒸餾水洗凈,再放入1:1一水合氨的水溶液(即氨水)中,中和殘留的酸,取出在空氣中晾乾。
[備注]
1.製作膠棉半透膜的錐形瓶一定要乾燥,否則難以成膜。
2.膠棉半透膜容易破裂,實驗前請保存在蒸餾水裡。
3.自製羊皮紙時,一定要控制硫酸的濃度和浸泡時間,還要注意在浸泡中濾紙不能重疊。

2. 從牛奶中分離出蛋白質的方法

從牛奶中分離酪蛋白和乳糖
一、引言
牛奶中主要的蛋白質是酪蛋白,含量約為35g/l。酪蛋白在乳中是以酪蛋白酸鈣-磷酸鈣復合體膠粒存在,
膠粒直徑約為20~800納米,平均為100納米。在酸或凝乳酶的作用下酪蛋白會沉澱,加工後可製得乾酪或乾酪素。本實驗利用加酸,當達到酪蛋白等電點PH=4.7時,酪蛋白沉澱。脫脂乳中除去酪蛋白後剩下的液體為乳清,在乳清中含有乳白蛋白和乳球蛋白,還有溶解狀態的乳糖,乳中糖類的99.8%以上是乳糖,可通過濃縮、結晶製取乳糖。
二、實驗材料和試劑
脫脂乳或脫脂奶粉。
醋酸-醋酸鈉緩沖溶液(PH=4.7),95%乙醇,乙醚,碳酸鈣粉末,苯肼試劑。
三、實驗步驟
1. 從牛奶中分離酪蛋白
在燒杯中加入2g脫脂奶粉,再加入40ml40℃,PH=4.7的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液40ml,
用PH精密試紙檢驗液體的PH值。靜置冷卻至室溫,傾去上層清液(留作分離乳糖用),剩下的懸浮液分別裝入兩支離心試管中,用轉速為2000轉/分離心分離3~5分鍾,傾出上層清液,(合並於上一清液中),得酪蛋白粗品。於離心管中加入5ml蒸餾水,用玻棒充分攪拌,洗滌除去其中的水溶性雜質(如乳清蛋白,乳糖以及殘留的緩沖溶液),離心後棄去上層液,再用蒸餾水洗一次。於試管中加入5ml95%乙醇,充分攪拌,離心後棄去乙醇溶液,用乙醇洗滌主要是除去磷脂類物質。最後再用5ml乙醚以同樣方法洗滌,以除去脂肪類物質。將酪蛋白沉澱物涼干,稱重、並計算得率。
2. 從牛奶中分離乳糖
在除去酪蛋白的乳清中,加入1.5g CaCO3粉末,攪拌均勻後加熱至沸。加CaCO3的目的一方面是中和溶液的酸性,防止加熱時乳糖水解,另方面又能使乳白蛋白沉澱。過濾除去沉澱,在濾液中加入1~2粒沸石,加熱濃縮至3~5ml,加入10ml 95%乙醇(注意離開火焰)和少量活性炭,攪拌均勻後在水浴上加熱至沸騰,趁熱過濾,濾液必須澄清。加塞放置過夜,乳糖結晶析出,抽濾,用95%乙醇洗滌產品。
3. 乳糖成脎試驗
取自製乳糖溶於少量水中,濃度約為5%,在試管中加入1ml乳糖溶液,1ml苯肼試劑①,搖勻,試管口用棉花塞住,在沸水浴中加熱,並不時振搖,加熱10~15分鍾後,取出放置冷卻,乳糖脎成結晶析出。取少量乳糖脎在顯微鏡下觀察其結晶形態,可證實為乳糖。
①苯阱試劑有毒,小心使用,勿觸及皮膚,如觸及皮膚先用稀醋酸洗,再用水洗。

另外附上:
蛋白質分離純化的一般程序可分為以下幾個步驟:

(一)材料的預處理及細胞破碎

分離提純某一種蛋白質時,首先要把蛋白質從組織或細胞中釋放出來並保持原來的天然狀態,不喪失活性。所以要採用適當的方法將組織和細胞破碎。常用的破碎組織細胞的方法有:

1. 機械破碎法

這種方法是利用機械力的剪切作用,使細胞破碎。常用設備有,高速組織搗碎機、勻漿器、研缽等。

2. 滲透破碎法

這種方法是在低滲條件使細胞溶脹而破碎。

3. 反復凍融法

生物組織經凍結後,細胞內液結冰膨脹而使細胞脹破。這種方法簡單方便,但要注意那些對溫度變化敏感的蛋白質不宜採用此法。

4. 超聲波法

使用超聲波震盪器使細胞膜上所受張力不均而使細胞破碎。

5. 酶法

如用溶菌酶破壞微生物細胞等。

(二) 蛋白質的抽提

通常選擇適當的緩沖液溶劑把蛋白質提取出來。抽提所用緩沖液的pH、離子強度、組成成分等條件的選擇應根據欲制備的蛋白質的性質而定。如膜蛋白的抽提,抽提緩沖液中一般要加入表面活性劑(十二烷基磺酸鈉、tritonX-100等),使膜結構破壞,利於蛋白質與膜分離。在抽提過程中,應注意溫度,避免劇烈攪拌等,以防止蛋白質的變性。

(三)蛋白質粗製品的獲得

選用適當的方法將所要的蛋白質與其它雜蛋白分離開來。比較方便的有效方法是根據蛋白質溶解度的差異進行的分離。常用的有下列幾種方法:

1. 等電點沉澱法

不同蛋白質的等電點不同,可用等電點沉澱法使它們相互分離。

2. 鹽析法

不同蛋白質鹽析所需要的鹽飽和度不同,所以可通過調節鹽濃度將目的蛋白沉澱析出。被鹽析沉澱下來的蛋白質仍保持其天然性質,並能再度溶解而不變性。

3. 有機溶劑沉澱法

中性有機溶劑如乙醇、丙酮,它們的介電常數比水低。能使大多數球狀蛋白質在水溶液中的溶解度降低,進而從溶液中沉澱出來,因此可用來沉澱蛋白質。此外,有機溶劑會破壞蛋白質表面的水化層,促使蛋白質分子變得不穩定而析出。由於有機溶劑會使蛋白質變性,使用該法時,要注意在低溫下操作,選擇合適的有機溶劑濃度。

(四)樣品的進一步分離純化

用等電點沉澱法、鹽析法所得到的蛋白質一般含有其他蛋白質雜質,須進一步分離提純才能得到有一定純度的樣品。常用的純化方法有:凝膠過濾層析、離子交換纖維素層析、親和層析等等。有時還需要這幾種方法聯合使用才能得到較高純度的蛋白質樣品。

3. 關於半透膜

半透膜可以自製的。網路里就有說明。

不過一般的半透膜只能區分離子和生物大分子,而銅離子和硫酸根離子的半徑差的沒有那麼大吧,半透膜的精度哪有這么高。

4. 關於半透膜

煮熟的雞蛋在蛋清與蛋殼間有層膜,那就是半透膜,這個不用買

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