㈠ 請教T淋巴細胞活化所用的刺激因子
用50-100ng/ml PMA和1µg/ml 離子黴素刺激,可以使T淋巴細胞活化,回你 最好找一下資料,看t淋巴細胞活化後,CD25+在 細胞表面表答達的 時間是長還 是 短,如CD4+,6-8小時就 可以了,還 有我 的 記憶中 正常人血中CD25+T應該沒有佔到T細胞的54%-86%,你 最好找一下資料
㈡ 請教調節性T細胞系列6-FOXP3的胞內染色步驟
T細胞胞內染色前為什麼需要離子黴素和佛波酯是G蛋白偶聯受體的信號轉導通路版中的一種途徑,在[1]信號通權路中胞外信號分子與細胞表面G蛋白耦聯型受體結合,激活質膜上的磷脂酶C(PLC-β),使質膜上4,5-二磷酸磷脂醯肌醇(PIP2)水解成1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)和二醯基甘油(DG)兩個第二信使,胞外信號轉換為胞內信號,這一信號系統又稱為「雙信使系統」(DoubleMessengerSystem).IP3與內質網上的IP3配體門鈣通道結合,開啟鈣通道,使胞內Ca2+濃度升高.激活各類依賴鈣離子的蛋白.用Ca2+載體離子黴素(ionomycin)處理細胞會產生類似的結果.DG結合於質膜上,可活化與質膜結合的蛋白激酶C(ProteinKinaseC,PKC).PKC以非活性形式分布於細胞溶質中,當細胞接受刺激,產生IP3,使Ca2+濃度升高,PKC便轉位到質膜內表面,被DG活化,PKC可以使蛋白質的絲氨酸/蘇氨酸殘基磷酸化視不同的細胞產生不同的反應,如細胞分泌、肌肉收縮、細胞增殖和分化等.DG的作用可用佛波醇酯(phorbolester)模擬.
㈢ T細胞胞內染色前為什麼需要離子黴素和佛波酯
T細胞胞內染色前為什麼需要離子黴素和佛波酯
是G蛋白偶聯受體的信號轉導通路中專的一種途徑,在屬[1]信號通路中胞外信號分子與細胞表面G蛋白耦聯型受體結合,激活質膜上的磷脂酶C(PLC-β),使質膜上4,5-二磷酸磷脂醯肌醇(PIP2)水解成1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)和二醯基甘油(DG)兩個第二信使,胞外信號轉換為胞內信號,這一信號系統又稱為「雙信使系統」(Double Messenger System).
IP3與內質網上的IP3配體門鈣通道結合,開啟鈣通道,使胞內Ca2+濃度升高.激活各類依賴鈣離子的蛋
白.用Ca2+載體離子黴素(ionomycin)處理細胞會產生類似的結果.
DG結合於質膜上,可活化與質膜結合的蛋白激酶C(Protein Kinase C,PKC).PKC以非活性形式分布於細胞溶質中,當細胞接受刺激,產生IP3,使Ca2+濃度升高,PKC便轉位到質膜內表面,被DG活化,PKC可以使蛋白質的絲氨酸/蘇氨酸殘基磷酸化視不同的細胞產生不同的反應,如細胞分泌、肌肉收縮、細胞增殖和分化等.DG的作用可用佛波醇酯(phorbol ester)模擬.