㈠ 利用陽離子交換層析分離下列每一對氨基酸，哪一種氨基酸首先被PH7緩沖液從離子交換柱上洗脫出來。
氨基酸與粒子抄交換樹脂的吸附力襲大小取決於它們之間的電荷引力和疏水作用。第一組中甘氨酸和亮氨酸均為非極性氨基酸，但是相比之下甘氨酸的極性要更強，也就是疏水性更弱，它會先被洗脫。第二組中，絲氨酸是中性條件下不帶電荷的極性氨基酸，丙氨酸是非極性氨基酸，所以絲氨酸疏水性差，先被洗脫。
㈡ 用陽離子交換柱子分離蛋白，怎麼調緩沖液ph
不知你將什麼"緩沖液"調節到一定PH濃度？把問題講明了一點…
㈢ Lys Arg Asp Glu Tyr Ala的混合物在高pH條件下加到陰離子交換樹脂上，用連續遞減pH值緩沖溶液洗脫
洗脫先後順來序：Arg Lys Tyr Ala Glu Asp
先分源組：1 Arg Lys是鹼性氨基酸 PH=7 正電荷
2 Tyr ALa是中性氨基酸 PH=7 中性為主
3 Glu Asp是酸性氨基酸 PH=7 酸性
由於是交換樹脂層析，氨基酸的與樹脂的親和力主要取決於他們之間的親和力，其次是氨基酸與樹脂之間的疏水相互作用。由於緩沖液先是鹼性，所以氨基酸與樹脂的親和力為：酸性氨基酸》中性氨基酸>鹼性氨基酸（陰離子樹脂的疏水基團帶正電，負電被交換了），洗脫的順序就是：鹼性 中性 酸性
考慮氨基酸與樹脂的疏水作用：Arg的R基團是三個亞甲基+一個亞氨基，Lys是四個亞甲基，很明顯，Arg的疏水作用要弱，與樹脂吸引力不夠強，最先被洗下來。其他的兩組樓主自己分析R基團的疏水性
㈣ 過離子交換柱時，pH梯度洗脫緩沖液一般用什麼緩沖液
如果不限定純化方法，可以考慮親和層析或離子交換，但根據你問題的意思，是選定離子交內換。
此時就容要考慮你蛋白的等電點了，如果等電點在你穩定pH之上，就用陽離子交換柱：
設計陽離子交換層析：將你的樣品置換到你所指的穩定pH的running buffer。同時裝柱，平衡，然後上樣，平衡，洗脫（因為你的pH不穩定，建議鹽洗脫），收峰。得你的蛋白；
如果你的等電點在穩定pH之下，就用陰離子交換柱，其步驟如上，只是改變柱子類型。
㈤ tris可用作陽離子交換buffer嗎
Tris-HCl緩沖液的配製方法：
Tris：三羥甲基氨基甲烷
三羥甲基氨基甲烷（Tris(hydroxymethyl)aminomethane，一般簡稱為Tris）是一種有機化合物，其分子式為(HOCH2)3CNH2。Tris被廣泛應用於生物化學和分子生物學實驗中的緩沖液的制備。例如，在生物化學實驗中常用的TAE和TBE緩沖液（用於核酸的溶解）都需要用到Tris。由於它含有氨基因此可以與醛發生縮合反應
Tris為弱鹼，在室溫（25℃下，它的pKa為8.1；根據緩沖理論，Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。
Tris鹼的水溶液pH在10.5左右，一般加入鹽酸以調節pH值至所需值，即可獲得該pH值的緩沖液。但同時應注意溫度對於Tris的pKa的影響。
由於Tris緩沖液為弱鹼性溶液，DNA在這樣的溶液中會被去質子化，從而提高其溶解性。人們常常在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA製成「TE緩沖液」，TE緩沖液被用於DNA的穩定和儲存。如果將調節pH值的酸溶液換成乙酸，則獲得「TAE緩沖液」（Tris/Acetate/EDTA），而換成硼酸則獲得「TBE緩沖液」（Tris/Borate/EDTA）。這兩種緩沖液通常用於核酸電泳實驗中。 用途：有機合成中間體。在電泳緩沖液中同甘氨酸構成緩沖體系，穩定電泳過程中的PH值。在凝膠中也起到穩定PH的作用，只不過是Tris-HCl緩沖體系。
Tris緩沖液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質的溶劑，還有許多重要用途。Tris被用於不同pH條件下的蛋白質晶體生長。Tris緩沖液的低離子強度特點可用於線蟲（C. elegans核纖層蛋白lamin）的中間纖維的形成。Tris也是蛋白質電泳緩沖液的主要成分之一。此外，Tris還是制備表面活性劑、硫化促進劑和一些葯物的中間物。Tris也被用作滴定標准物。
1 M Tris-HCl (pH7.4，7.6，8.0)
組份濃度 1 M Tris-HCl 配製量 1L 配製方法：
1.稱量121.1 g Tris置於l L燒杯中。
2.加入約800 ml的去離子水，充分攪拌溶解。 3.按下表加入濃HCl量調節所需要的pH值。
pH值 濃HCl 7.4 約70 ml 7.6 約60 ml 8.0 約42ml
4.將溶液定容至1 L。
5.高溫高壓滅菌後，室溫保存。 注意：應使溶液冷卻至室溫後再調定pH值，因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個單位。
1.5 M Tris-HCl (pH8.8)
組份濃度 1.5 MTris-HCl 配製量 1 L 配製方法
1.稱量181.7 g Tris置於1 L燒杯中。
2.加入約800 ml的去離子水，充分攪拌溶解。 3.用濃HCl調節pH值至8.8。 4.將溶液定容至1 L。
5.高溫高壓滅菌後，室溫保存。 注意：應使溶液冷卻至室溫後再調定pH值，因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個單位。
TE即Tris-EDTA buffer（10mM Tris，1mM EDTA，pH7.4 pH7.6 pH8.0）。
常用分子生物學試劑，用於DNA的溶解等。 配製1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6，8.0)
組份濃度： 100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA 配製量： 1 L 配製方法：
1. 量取下列溶液，置於l L燒杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4，7.6，8.0) 100 ml 500 mM EDTA(pH8.0) 20 ml
2.向燒杯中加入約800 ml的去離子水，均勻混合。 3.將溶液定容至1 L後，高溫高壓滅菌。 4.室溫保存。
㈥ 蛋白純化陰離子交換，緩沖液帶什麼電荷
既然是陰離子交換，就要讓目標蛋白帶負電，那麼緩沖液PH就要大於內等電點。緩沖體系的容選擇也很重要，一般用TRIS-HCl，特別是弱陰離子柱不可選用帶負電強的磷酸鹽緩沖液，否則上樣液中被交換的將是磷酸根而不是目標蛋白。一般用NaCl平衡後上樣進行離子交換，然後再用較強的陰離子洗脫。
㈦ 在對凝血因子fviii作離子交換層析時，所用緩沖液為什麼要添加枸櫞酸鈉
檸檬酸鈉在食品、飲料工業中用作風味劑、穩定劑；在醫葯工業中用作抗血凝劑、專化痰葯和利尿葯；在洗滌劑工屬業中，可替代三聚磷酸鈉作為無毒洗滌劑的助劑；在化學上是優良的螯合劑/絡合劑,在工業上對檸檬酸鈉的應用都是利用此一特性。還用於釀造、注射液、攝影葯品和電鍍等。
檸檬酸鈉是目前最重要的檸檬酸鹽，主要由澱粉類物質經發酵生成檸檬酸，再跟鹼類物質中和而產生，具有以下優良性能：(1)安全無毒性能。由於制備檸檬酸鈉的原料基本來源於糧食，因而絕對安全可靠，對人類健康不會產生危害。聯合國糧農與世界衛生組織對其每日攝入量不作任何限制，可認為該品屬於無毒品。（2）具有生物降解性。檸檬酸鈉經自然界大量的水稀釋後，部分變成檸檬酸，兩者共存於同一體系中。
㈧ 用離子交換法純化蛋白如何選定緩沖液
也可以用AEC，主要以流穿模式做。sspxiaoji(站內聯系TA)用陽離子交換柱，可以考慮pH6.0-7.0的緩沖液，因內為容大部分蛋白質的等電點在這附近，帶電荷少，這樣容易穿透除去其他雜蛋白。而你的目的蛋白PI在11，掛柱應該比較牢固。但是有個問題需要注意，PH離你的目標蛋白PI太遠，有可能導致掛柱後難以洗脫。
㈨ 過離子交換柱時，pH梯度洗脫緩沖液一般用什麼緩沖液
如果不限定純抄化方法，可以考慮親和層析或離子交換，但根據你問題的意思，是選定離子交換。
此時就要考慮你蛋白的等電點了，如果等電點在你穩定pH之上，就用陽離子交換柱：
設計陽離子交換層析：將你的樣品置換到你所指的穩定pH的running
buffer。同時裝柱，平衡，然後上樣，平衡，洗脫（因為你的pH不穩定，建議鹽洗脫），收峰。得你的蛋白；
如果你的等電點在穩定pH之下，就用陰離子交換柱，其步驟如上，只是改變柱子類型。