❶ 高效液相用的新過濾頭可以直接用嗎
你指復的是過濾流動相的過濾頭?制
還是過濾樣品的過濾頭?
安捷倫還有一種過濾白頭。
過濾流動相的那種可以插上直接用,前提是拿來的時候是密封包裝的,別落了灰塵什麼的。然後用前需要排氣。
過濾樣品的不可以,要求規定濾掉3滴以上樣品,然後才能用。
安捷倫的過濾白頭安上就能用。
❷ 高效液相用的新過濾頭可以直接用嗎
你指的是過濾流動相的過濾頭?
還是過濾樣品的過濾頭?
安捷倫還有一種過濾白頭專。
過濾流動相屬的那種可以插上直接用,前提是拿來的時候是密封包裝的,別落了灰塵什麼的。然後用前需要排氣。
過濾樣品的不可以,要求規定濾掉3滴以上樣品,然後才能用。
安捷倫的過濾白頭安上就能用。
❸ 液相色譜使用前為什麼要過濾和脫氣
一般抄流動相在上儀器前必須經過兩個襲步驟:減壓抽濾和超聲
減壓抽濾有兩個目的,
一個是過濾掉氣體,尤其是有機相和水相混合的時候,會產生大量的氣泡。這些氣泡進入儀器就會堵住儀器和色譜柱,所以要除掉。
一個是過濾掉不溶性微粒。你看一般的過濾膜是4.5um孔徑的,這個是針對你的色譜柱而定的。色譜柱一般是5um的粒徑,保證過濾的流動相裡面小的毛絮啊,顆粒啊都不會進入色譜柱。
超聲的主要目的也是為了脫氣,另外還有助溶和令溶液混合均勻等作用。不過超聲主要是為了去掉溶劑瓶瓶壁和瓶底的氣泡,所以沒必要超聲太久的時間,3-5min足夠了。
總而言之,都是為了保護儀器和色譜柱,防止氣泡和雜質進入。
❹ 為什麼高效液相色譜儀的流動相在使用前必須過濾,脫氣
用於高效液相色譜的流動相必須事先除氣,否則容易在系統中逸出氣泡,影響泵的工作。氣泡還會影響色譜柱的分離效率、檢測器的靈敏度、基線的穩定性,甚至使其無法檢測。
噪音增加,基線不穩定,突然跳躍。此外,溶解在流動相中的氧可以與樣品、流動相甚至固定相(如烷基胺)發生反應。溶解氣體也會引起溶劑ph值的變化,從而導致分離或分析結果的誤差。
常用的除氣方法有加熱沸騰、抽真空、超聲波、吹氦等。
高效液相色譜(hplc)是色譜的一個重要分支。以液體為流動相,高壓輸液系統,將不同極性的單溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入固定相色譜柱。分離柱中的組分後,用檢測器檢測。實現了樣品的分析。
(4)高效液相樣品過濾擴展閱讀:
液相色譜-質譜聯用(LC-MS)可增加額外的分析能力,准確識別和量化細胞和組織裂解物、血液、血漿、尿液和口服液等復雜樣品基質中的微量化合物。
流動相和固定相都是液體。流動相與固定相應不相容(極性不同,避免固定液流失),界面清晰。當樣品進入色譜柱時,溶質分布在兩相之間。達到平衡後,遵循高效液相色譜的計算公式。
公式中cs溶質在固定相的濃度、cm溶質在流動相的濃度、vs固定相的體積和vm流動相的體積。llpc與gpc有相似之處,即分離順序取決於k值較大的組分的保留值,但也存在差異。在gpc中,流量對k的影響較小,而llpc流量對k的影響較大。
❺ 高效液相色譜儀的原理0.22和0.45微孔濾膜都能過濾掉什麼
高效液相色譜儀系採用液體為流動相流經裝有填充劑的色譜柱進行分離測定的色回譜方法。物質或其衍答生物混合物(樣品組分)被流動相帶入色譜柱,在與填充劑之間吸附、解吸等相互作用進而使不同物質分離,使原先混合在一起的各組分先後進入檢測器,不同時間經過檢測器的信號輸出後,用計算機數據處理系統記錄色譜信號。經過人工或計算機程序對收集到的信號數據按一定方法進行計算分析,從而得出各組份的含量。
HPLC系統一般由輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、數據記錄及處理裝置等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關鍵部位。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機、自動進樣器、與柱或保護住、柱溫控制器等,微機控制系統和數據處理軟體,進行自動化儀器控制和數據處理。
0.22和0.45微孔濾膜主要用於濾掉樣品中一些可能導致液相色譜儀液路和色譜柱堵塞的微小固體顆粒的,這是因為高效液相色譜儀液路極為細小,管路和色譜柱內是密封的高壓液路系統,任何微小的固體顆粒都可以導致色譜柱及單向閥等關鍵組件磨損或者堵塞,因此對一般的樣品需要做預處理,防止損傷。
❻ 高效液相色譜法在樣品干過濾時,為什麼棄去前濾液
初濾液不穩定,不能體現樣品的真實性。
❼ 高效液相色譜使用步驟
高效液相色譜儀操作步驟如下:
1). 過濾流動相,根據需要選擇不同的濾膜.
2). 對抽濾後的流動相進行超聲脫氣10-20分鍾。
3). 打開hplc工作站(包括計算機軟體和色譜儀),連接好流動相管道,連接檢測系統。
4). 進入hplc控制界面主菜單,點擊manual,進入手動菜單。
5). 有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進樣閥。
6). 調節流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000。
7). 設計走樣方法。
8). 進樣和進樣後操作。
9). 關機時,先關計算機,再關液相色譜。
10). 填寫登記本,由負責人簽字。
11). 流動相均需色譜純度,水用20m的去離子水。
12). 柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要讓液體過柱子。
13). 所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。
14). 壓力不能太大,最好不要超過2000 psi。
❽ 在高效液相色譜實驗前,為什麼溶劑和樣品都要過濾
你說的溶劑是溶解樣品用的溶劑?還是說流動相?
因為色譜柱裡面是多孔結構,所以所有上液相的東西都要過濾。避免把色譜柱堵住。
流動相主要是為了過濾掉氣泡。尤其是反相色譜,水相和有機相混合很容易產生氣泡。
樣品,包括樣品,空白溶劑等等,過濾主要是為了濾掉不溶性微粒。比如樣品不完全溶解,有懸濁的情況。
其實空白溶劑如果是純凈水,或者是純甲醇、乙腈之類的溶劑是可以不過濾的。但是一般來說過濾空白溶劑是為了平行試驗。排除過濾膜對樣品的影響。
❾ 高效液相色譜法流動相在使用前需要過濾與脫氣,常用脫氣方法有 真空脫氣及在線脫氣。
液相色譜流動相脫氣使用較多的方法大概有四種:氦氣脫氣、真空脫氣、超聲波脫氣、加熱脫氣。
1.氦氣脫氣:氦氣脫氣是很有效的脫氣方法。氦氣緩緩的通過流動相趕去溶入的空氣,如果使用得當,在10min內可除去80%~90%的溶入氣體。由於氦氣在流動相中的溶解度極低,所以用氦氣脫氣保護的流動相可以認為是一個無氣體溶解體系。其缺點是氦氣價格比較昂貴,會增加檢驗成本。
2.真空脫氣:也是比較常用的脫氣方法。現在多數企業都最常用這種辦法,貯液器被抽成部分真空,溶入的氣體蒸發形成氣泡溢出,其效果僅次於氦氣脫氣。象Agileng1200液相色譜使用的是在線脫氣機。在線脫氣只適合脫完氣之後的流動相,在使用過程中的微量脫氣。
3.超聲波脫氣: 將配製好的流動相連容器放入超聲水槽中脫氣10-20min。這種方法比較簡便,又基本上能滿足日常分析操作的要求,所以,目前仍廣泛採用。這種方法只能除去30%的溶解氣體,有時還會引起氣體溶解度的增加。對氧敏感的檢測器不宜用此法。
4.加熱迴流脫氣:該方法雖然效果很好,但是適用范圍較窄。對於有機溶劑或混合流動相不適合用此法,因為揮發性組分會損失掉,改變流動相的組成。
綜合來說,用真空抽濾後,再用超聲脫氣還是最常用的辦法,用氦氣的方法是效果最好的辦法,而用在線脫氣呢,本身也是真空脫氣,但它可以放到儀器上使用,是一種保證性的辦法。
❿ 高效液相色譜法測定時,流動相合樣品均應先過濾和超聲波,為什麼
流動相需要過濾、超聲,過濾是除去固體雜質或異物,同時驅除溶解的氣體,超聲進一步驅內除溶解的氣容體。樣品需要過濾,防止不溶性物質堵塞系統的管路,樣品不需要超聲,超聲過程往往伴隨溫度升高,樣品一旦溫度升高液體的體積會改變,濃度發生變化,影響到結果的准確性。