A. 高效液相色譜法測定時,流動相合樣品均應先過濾和超聲波,為什麼
流動相需要過濾、超聲,過濾是除去固體雜質或異物,同時驅除溶解的氣體,超聲進一步驅內除溶解的氣容體。樣品需要過濾,防止不溶性物質堵塞系統的管路,樣品不需要超聲,超聲過程往往伴隨溫度升高,樣品一旦溫度升高液體的體積會改變,濃度發生變化,影響到結果的准確性。
B. 為什麼用於液相色譜的流動相和樣品溶液必須用孔徑至少0.45μm的濾膜過濾
防止顆粒進入液相系統。因為顆粒會磨損設備元件和堵塞液相管道。
C. 流動相在使用前為什麼要過濾和脫氣
過濾是為了除去流動相中的雜質,保護系統和柱子。脫氣是為了除去溶解在流動相中得氣泡,降低基線噪音。
D. 為什麼液相色譜實驗中流動相和待測樣品都需要過濾
因為要過濾掉流動相和待測樣品裡面的不溶性物質和氣泡。防止它們堵住儀器。
很多東專西不是你看著澄清就真屬的干凈。液相的管路很細,還有色譜柱的孔徑也很小,萬一堵住了就報廢了。所以一定要過濾。
流動相不單要過濾掉不溶物,還有就是氣泡。這些氣泡可能會堵住泵頭,堵住色譜柱,就算哪兒都不會堵上也會導致流速不準確,柱壓不穩定,基線波動等等。所以一定要過濾。
你的色譜柱是5um粒徑的,用4.5um孔徑濾膜就可以了。如果色譜柱粒徑更小,那麼也應該選擇孔徑更小的濾膜。
另外,如果你的流動相和待測樣品是純的色譜純有機相,其實就沒必要過濾了。
E. 高效液相色譜法流動相為什麼要用過濾膜過濾
樓上正解。但不光是堵塞柱子,如果有不容顆粒在流動相中,也會對泵進行磨損。
F. 相要經過過濾,那標准品和待測樣品需不需要過濾
因為要過濾掉流動相和待測樣品裡面的不溶性物質和氣泡。防止它們堵住儀器。
很多東西不是你看著澄清就真的干凈。液相的管路很細,還有色譜柱的孔徑也很小,萬一堵住了就報廢了。所以一定要過濾。
流動相不單要過濾掉不溶物,還有就是氣泡。這些氣泡可能會堵住泵頭,堵住色譜柱,就算哪兒都不會堵上也會導致流速不準確,柱壓不穩定,基線波動等等。所以一定要過濾。
你的色譜柱是5um粒徑的,用4.5um孔徑濾膜就可以了。如果色譜柱粒徑更小,那麼也應該選擇孔徑更小的濾膜。
另外,如果你的流動相和待測樣品是純的色譜純有機相,其實就沒必要過濾了。
G. 在高效液相色譜實驗前,為什麼溶劑和樣品都要過濾
你說的溶劑是溶解樣品用的溶劑?還是說流動相?
因為色譜柱裡面是多孔結構,所以所有上液相的東西都要過濾。避免把色譜柱堵住。
流動相主要是為了過濾掉氣泡。尤其是反相色譜,水相和有機相混合很容易產生氣泡。
樣品,包括樣品,空白溶劑等等,過濾主要是為了濾掉不溶性微粒。比如樣品不完全溶解,有懸濁的情況。
其實空白溶劑如果是純凈水,或者是純甲醇、乙腈之類的溶劑是可以不過濾的。但是一般來說過濾空白溶劑是為了平行試驗。排除過濾膜對樣品的影響。
H. 為什麼高效液相色譜儀的流動相在使用前必須過濾,脫氣
用於高效液相色譜的流動相必須事先除氣,否則容易在系統中逸出氣泡,影響泵的工作。氣泡還會影響色譜柱的分離效率、檢測器的靈敏度、基線的穩定性,甚至使其無法檢測。
噪音增加,基線不穩定,突然跳躍。此外,溶解在流動相中的氧可以與樣品、流動相甚至固定相(如烷基胺)發生反應。溶解氣體也會引起溶劑ph值的變化,從而導致分離或分析結果的誤差。
常用的除氣方法有加熱沸騰、抽真空、超聲波、吹氦等。
高效液相色譜(hplc)是色譜的一個重要分支。以液體為流動相,高壓輸液系統,將不同極性的單溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入固定相色譜柱。分離柱中的組分後,用檢測器檢測。實現了樣品的分析。
(8)液相流動相過濾目的擴展閱讀:
液相色譜-質譜聯用(LC-MS)可增加額外的分析能力,准確識別和量化細胞和組織裂解物、血液、血漿、尿液和口服液等復雜樣品基質中的微量化合物。
流動相和固定相都是液體。流動相與固定相應不相容(極性不同,避免固定液流失),界面清晰。當樣品進入色譜柱時,溶質分布在兩相之間。達到平衡後,遵循高效液相色譜的計算公式。
公式中cs溶質在固定相的濃度、cm溶質在流動相的濃度、vs固定相的體積和vm流動相的體積。llpc與gpc有相似之處,即分離順序取決於k值較大的組分的保留值,但也存在差異。在gpc中,流量對k的影響較小,而llpc流量對k的影響較大。