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B. 純化的單克隆抗體,超濾濃縮的時候會把磷酸鹽離心掉導致抗體的緩沖環境變成水嗎
不會的。。。
超濾濃縮對於緩沖液成分不會有任何改變的,因為PBS中的磷酸根離子回也好答,氯離子也好,鈉離子也好都是很小的離子,可以在溶液中自由擴散,不會因為超濾離心就被甩到下層濾液中去。
你可以做個簡單的實驗,取一定體積PBS溶液測一下pH值和電導率值,之後用超濾管去離心。取出上層未被濾完的溶液再測一下pH值和電導率值,會發現pH值和電導率值和之前測的是一樣的。即可證明未被濾完的溶液還是PBS溶液,而不是水。
C. 請問超濾管可以純化胃蛋白酶消化後的IgG嗎。需要F(ab')2片段。
超濾管不建議用復於純化,適制用於去鹽或濃縮,尤其是對於你的這個實驗,問題有3點:
1、胃蛋白酶35KD左右,Fab2有90KD,兩者的分子量相差不到3倍,你很難選到合適孔徑的超濾管能較好分離兩者,用分子篩還是可以的;
2、超濾管總體蛋白回收率比純化技術低;
3、每次超濾,都會有上層濾液殘留,無法高效率去除這部分雜蛋白。
以上意見供您參考,祝愉快!
D. 蛋白純化過程中,超濾能除咪唑嗎
您好!可以的,但是超濾除的不是很乾凈,用分子篩干凈些。
網路教育團隊【海納百川團】為您解答。
感謝您的採納 O(∩_∩)O 。如有疑問,歡迎追問。
E. 同一個超濾濃縮管可以用來純化不同的蛋白嗎
不可以的
不管是哪個公司生產超濾濃縮管使用後都會有蛋白殘留在濾膜上,而不管是使回用氯化鈉或答者氫氧化鈉清洗都不能確保可以完全清理掉殘留在膜上的蛋白。
如果不同的蛋白間混合使用,可能前一個蛋白會污染到後一個蛋白,甚至有些某些高活性的酶殘留在上面會造成後一個蛋白被酶切降解,造成不必要的損失。