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超濾管能重復使用嗎

發布時間:2024-11-27 14:13:27

A. 同一個超濾濃縮管可以用來純化不同的蛋白嗎

不可以的
不管是哪個公司生產超濾濃縮管使用後都會有蛋白殘留在濾膜上,而不管是使回用氯化鈉或答者氫氧化鈉清洗都不能確保可以完全清理掉殘留在膜上的蛋白。
如果不同的蛋白間混合使用,可能前一個蛋白會污染到後一個蛋白,甚至有些某些高活性的酶殘留在上面會造成後一個蛋白被酶切降解,造成不必要的損失。

B. 超濾離心管怎麼使用

蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管(MWCO10kD)。也有其它型號的、不同體積大小和超濾管可選,視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時,【取50ul國產Bradford溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mg/ml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測】,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱,導致堵管。若發生沉澱,要確定沉澱的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,後者的方法是換不同的Buffer,直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經0.22um超濾膜超濾),再濃縮至1ml左右,連續三次,最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定,一般不多於500ul,也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作,用黃槍頭(200ul)取,輕輕順著邊緣插入槍頭,輕輕吹打、混勻蛋白液,注意不要碰到超濾膜,然後吸取濃縮液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取,否則難度太大,有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中,沒過超濾膜,防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管,重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉澱,可以先加入水,然後用槍頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉澱懸起,然後倒掉,不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml
離心管,排出部分水,然後蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項,每根管用三四年不會壞。

C. 超濾管怎麼重復使用

1、攜拿森首先用吸頭吸取一定量的0.1mol的NaOH清洗濾敏頃膜1-2次。
2、其次用雙蒸水沖洗濾膜2-3次。
3、最後將超辯畝濾管浸泡在20%乙醇里直至下次使用即可。

D. 超濾膜凈水器取下水管幾個月後還能正常凈化水嗎

不可以使用了,因為超濾膜已經拆封了,雖然你沒有使用,但是裡面的結構已經受到了污染,不能繼續再用了,一旦拆封就馬上使用,放著也是放幾個月也相當於用了幾個月也是過期了不行了。

E. 管式超濾膜和常規卷式超濾膜有什麼區別

管式和卷式的超濾膜區別上面這個說的很清楚了:


如果說在選膜時,主要還是要根據進水及產水標准、價格來進行篩選。超濾膜當前來說陶氏和科氏以及東麗的都做的還不錯,但是如果您要選型的話,需要提前准備水質參數報告及產水要求。




F. 上清液用30kd超濾管超濾出現絮狀物是怎麼回事

以下是一些原因:
1、超濾管的選擇不當:經常使用的30KD超濾管過濾效果較好,如果採用了新的或不同品牌的超濾管,則可能會使得過濾效果受到影響,從而在上清液中出現絮狀物。
2、超濾管損壞或不適當的使用:如果超濾管已經損壞或瞎州塌沒有正確地安裝在設備中,就有可能產生細小的顆粒或細絲等雜質物,進而形成絮狀物。
3、上清液樣品本身存在問題:如果上跡衫清液中存在高濃度的蛋白質、沉澱或其他大分子物質,這些物質磨圓即使通過超濾管過濾,也很難被完全去除,從而導致上清液出現絮狀物。
4、超濾條件不合適:超濾過程中溫度、pH值、離子強度等條件不符合要求,也可能會導致上清液中出現絮狀物。

G. 大家用過的超濾管怎麼保存

超濾膜組件的維護(四川禹華環保)要點:
一、短期停機的情況下:停機2-3天以內,請內在膜組件內部充水容的狀態下停機;如果達一周左右時,請注入濃度為50mg/L的次氯酸鈉溶液;
二、 長期停機的情況下:膜組件要先經過次氯酸鈉葯洗後,再注入濃度為1.5%的亞硫酸氫鈉溶液。
三、置於陰涼處,不能脫水存放;低於零度時要加甘油防凍;

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