『壹』 分離22KD的蛋白質選擇什麼型號的超濾膜
如果是分離22kDa及分子量遠小於它的小蛋白,推薦用millipore的超濾管,截留分子量10kDa,體積1-15ml都有。主要還是看你的目的蛋白是集中於濃縮液部分,還是濾液部分,從而選擇合適的截留分子量
『貳』 有1000分子量的超濾離心管嗎
超濾離心管可以用來分離蛋白和聚乙二醇的
聚乙二醇(PEG)是一種分子量很小的試劑,回而超濾管的截留分子量答一般是在3000道爾頓~10000道爾頓之間。絕大多數蛋白可以被截留在超濾管上層,而聚乙二醇可以穿透濾膜到達超濾管下層
所以超濾離心管可以用來分離蛋白和聚乙二醇的離心管就是一個簡單的可以承受高轉速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉澱。 離心超濾管會有一個類似於內管和外管的兩個部分,內管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了
『叄』 millipore 超濾管區別
1、裝量:0.5ML 4ML 15ML
2、截留分子量3K 10K 30K 50K 100K
『肆』 超濾離心管如何選擇以及使用方法
超濾離心管在蛋白質、DNA和生物分子的濃縮、純化和脫鹽過程中被廣泛應用。選擇和使用超濾離心管時,需要理解其與微濾的區別。
微濾(Microfiltration)利用微孔膜介質去除溶液中尺寸為0.1 μm至10.0 μm的顆粒或生物體,廣泛應用於生物制葯預過濾和除菌過濾。微濾在細胞實驗中常用於樣品和培養基滅菌,以及從細胞裂解物中去除完整細胞和碎片,確保下游應用結果准確性。
超濾(Ultrafiltration)通過壓力或濃度梯度使料液通過半透膜進行分離,能截留尺寸范圍為1-1000kDa的分子,並允許鹽和水等小分子通過。它廣泛應用於蛋白質溶液的分離和純化,以及核酸樣品制備,如分子克隆和質粒純化。與沉澱法相比,超濾更為溫和,避免生物大分子失活。
超濾離心管是一種利用離心力驅動溶液通過超濾膜進行快速濃縮、滲濾和緩沖液置換的裝置,由蓋子、過濾裝置和離心管組成。通過選擇適合的膜孔徑,可進行除熱源、澄清和分離大分子污染物,或濃縮和脫鹽目標分子。
選擇超濾離心管時,需考慮樣品起始量及超濾膜的截留分子量(MWCO)。樣品體積決定離心管尺寸,而截留分子量則需根據目標大分子的分子量選擇,通常選擇比目標分子小2-3倍的膜。
使用超濾離心管涉及准備、加樣、離心和回收步驟。准備階段需沖洗設備以消除甘油殘留,然後在離心前加入適量純水或緩沖溶液。離心前確保離心機轉子平衡,以保持穩定。回收時,從過濾裝置或離心管中輕輕提取樣品,注意不要接觸或損壞超濾膜。
遵循上述步驟,正確選擇和使用超濾離心管,將有效實現蛋白質、DNA和生物分子的高效濃縮、純化和脫鹽,為科學研究和工業應用提供可靠支持。
『伍』 蛋白分子量為45KD應選用截留分子量30kd的超濾管合適嗎
3KD指的是截留分子量截留分子量(MWCO:molecularweightcutoff)是使用分子量大小表示的超濾膜的截留性能,專又稱作切割分子量。由屬於直接測定超濾膜的孔徑相當困難,所以使用已知分子量的球狀物質進行測定。如膜對被截留物質的截留率大於90%時,就用被截留物質的分子量表示膜的截留性能,稱為膜的截留分子量。實際上,所使用的物質並非絕對的球形,由於試驗條件的限制,所測定的截留率也有一定的誤差,所以截留分子量不能絕對表示膜的分離性能。也就是說3KD分子量的產品有可能透過膜也有可能被膜攔截,一般來說希望3KD的產品全部透過,需要選擇截留分子量更大的膜,比如5KD
『陸』 如何選擇超濾管
你看你要截留那部分物質,就選擇比最小分子量小的,如果你要截留26KD的,你要的超濾管內就要比26小。但兩者也要有一定容的差距,比如,選擇20-25KD之間的就不合適,因為26的也可能會出去(這是由製造工藝決定的)。所以選擇20KD以下的超濾管比較合適。
『柒』 如何根據分子量選擇合適的超濾膜
做濃縮的話,分子量除以2或3,就是你要選擇的超濾膜截留分子量,做脫鹽的話,超濾膜截留分子量越接近目標物的分子量越好
『捌』 超濾管分子量怎麼算
1/3。超濾管為了得到高收率,所選濾膜的截留分子量MWCO選擇所需截留分子大小的1/3,不超過目標分子量的一半。因此超濾管分子量所需截留分子大小的1/3這樣來計算。超濾離心管常用於悶鄭做細胞培養上清的蛋白濃縮的實驗,它會有內管和外管的兩個部拍罩或分,內管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量襲伍比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內管中),這就是超濾的原理。
『玖』 如何用蛋白濃縮管
選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。
通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同。
新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
(9)截留分子量選擇超濾管擴展閱讀:
超濾濃縮離心管,最新推出專利產品Hydrosart膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。
備有四種材質的超濾膜:聚醚碸、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取並回收,又可將離心管放入離心機反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使濃縮液達到近乎完全回收;
『拾』 蛋白分子量為45KD應選用截留分子量30kd的超濾管合適嗎
超濾膜上標的10KD、30KD都是指截留率.單位越大,超濾得到的物質分子也越大.