⑴ 超濾離心管如何選擇以及使用方法
超濾離心管在蛋白質、DNA和生物分子的濃縮、純化和脫鹽過程中被廣泛應用。選擇和使用超濾離心管時，需要理解其與微濾的區別。
微濾（Microfiltration）利用微孔膜介質去除溶液中尺寸為0.1 μm至10.0 μm的顆粒或生物體，廣泛應用於生物制葯預過濾和除菌過濾。微濾在細胞實驗中常用於樣品和培養基滅菌，以及從細胞裂解物中去除完整細胞和碎片，確保下游應用結果准確性。
超濾（Ultrafiltration）通過壓力或濃度梯度使料液通過半透膜進行分離，能截留尺寸范圍為1-1000kDa的分子，並允許鹽和水等小分子通過。它廣泛應用於蛋白質溶液的分離和純化，以及核酸樣品制備，如分子克隆和質粒純化。與沉澱法相比，超濾更為溫和，避免生物大分子失活。
超濾離心管是一種利用離心力驅動溶液通過超濾膜進行快速濃縮、滲濾和緩沖液置換的裝置，由蓋子、過濾裝置和離心管組成。通過選擇適合的膜孔徑，可進行除熱源、澄清和分離大分子污染物，或濃縮和脫鹽目標分子。
選擇超濾離心管時，需考慮樣品起始量及超濾膜的截留分子量（MWCO）。樣品體積決定離心管尺寸，而截留分子量則需根據目標大分子的分子量選擇，通常選擇比目標分子小2-3倍的膜。
使用超濾離心管涉及准備、加樣、離心和回收步驟。准備階段需沖洗設備以消除甘油殘留，然後在離心前加入適量純水或緩沖溶液。離心前確保離心機轉子平衡，以保持穩定。回收時，從過濾裝置或離心管中輕輕提取樣品，注意不要接觸或損壞超濾膜。
遵循上述步驟，正確選擇和使用超濾離心管，將有效實現蛋白質、DNA和生物分子的高效濃縮、純化和脫鹽，為科學研究和工業應用提供可靠支持。
⑵ 求助：第一次使用超濾離心管應該怎麼處理
可能不同廠家的產品保存運輸條件不一樣。
如果有甘油等保護劑，那就一定要洗干凈再加樣品。版權
乾的超濾管也要先潤濕再用，否則可能不能完全利用膜面積。
最好，用樣品buffer潤洗下再加樣，最大程度保證蛋白活性。尤其是用過後保存在NaOH或乙醇中後。
一般還是離心機甩一下好，使膜充分浸潤。
降低吸附的辦法有：
1，蛋白濃度不要過低
2，盡量選用纖維素的低吸附超濾管
3，用前可以用Tween 80等去垢劑潤洗（不影響蛋白活性的前提下）
4，加入保護蛋白，如BSA(不影響蛋白後續使用的前提下)
用完保存在20% EtOH中，4C保存，防止長菌，依不同樣品可以重復使用不同的次數。
⑶ 超濾管規格太小怎麼放進離心機
1、首先將超濾內管插入所提供的一個微量離心管中。
2、其次向超濾管內管中加入不超過500微升的樣本，並蓋上蓋子。
3、最後讓蓋子的連接帶朝著轉子的中央，用一個超濾管平衡即可。
⑷ 超濾離心管怎麼使用
蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管（MWCO10kD）。也有其它型號的、不同體積大小和MWCO超濾管可選，視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管，主要考慮MWCO和濃縮體積，通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全過膜，冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂的白線為准。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心機預冷至4度）。膜與轉軸的方向根據說明書調整（角轉離心機的情況是膜與軸垂直）。在實際使用中，一般轉速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時，【取50ul國產Bradford溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mg/ml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測】，繼續加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱，導致堵管。若發生沉澱，要確定沉澱的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時超濾，降低濃度的辦法解決，後者的方法是換不同的Buffer，直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer（經0.22um超濾膜超濾），再濃縮至1ml左右，連續三次，最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定，一般不多於500ul，也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達到1000倍以上，基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作，用黃槍頭（200ul）取，輕輕順著邊緣插入槍頭，輕輕吹打、混勻蛋白液，注意不要碰到超濾膜，然後吸取濃縮液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取，否則難度太大，有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中，沒過超濾膜，防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管，重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水，用milliQ水輕輕潤洗幾次，【若管底有可見的蛋白沉澱，可以先加入水，然後用槍頭吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉澱懸起，然後倒掉，不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液，室溫放置20min，期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液，將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時，不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗，內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯，加至接近滿的MilliQ水，50ml管也加滿MilliQ水，將管芯慢慢放入50ml
離心管，排出部分水，然後蓋上蓋子，放4度保存，直到下次使用。一般來說，按照上述步驟和注意事項，每根管用三四年不會壞。
⑸ 怎樣提取那麼小的病毒
提取小病毒的方法可以用超濾法：
1、超濾法的關鍵是超濾膜，可以簡單理解為孔徑極小的篩子。
2、當含有病毒的溶液通過超濾膜時，病毒就被留在了篩子上，而溶質和小分子物質如各種無機鹽等就被濾過了，之後再拿一定體積的液體把病毒從篩子上溶解下來，就實現了濃縮。
要求獲取的濃縮病毒大分子雜質含量很低時，就可以選擇超離法超速離心了：
超速離心簡單說，就是利用變態的重力把含病毒溶液里的病毒甩下來。
在病毒純化時,常用的方法是密度梯度離心法：
1、首先，在離心管中按濃度低至高配置離心介質
2、然後放到變態離心機里高速甩倆小時候，要分離的樣品里的物質就按密度排列在離心管里了。這時再按密度取出需要的條帶並重新溶解就好了。