強陰離子交換硅膠色譜柱

⑴ 色譜硅膠的孔徑及用途

Kromasil柱

Kromasil是瑞典AKZO NOBEL公司生產的高性能硅膠基質液相色譜柱填料品牌。
Kromasil是一種高純度球形硅膠填料，金屬雜質含量極低，減少了有些金屬螯合物在硅膠基質上的絡合作用。
Kromasil硅膠的表面由獨特的硅羥基基團組成，硅烷的覆蓋率高，在較高的或較低的PH條件下不易水解和分解，可在PH=1.5～9.5條件下穩定使用。
Kromasil 的含碳量高，表面極性小，分離效能高。通常在分析鹼性樣品時，與酸性硅羥基反應會產生不利的拖尾現象，而Kromasil化學純度極高，它的表面由分布獨特、相對中生的硅羥基基團組成，並使不需要的酸性硅羥基基團減少到最低，從而使之具有良好的峰對稱性種較高的柱效。

Hypersil BDS

Hypersil BDS 類色譜填料是極好的反相柱填料，有很好的耐久性及重現性，應用范

圍極其廣泛。Hypersil BDS 硅膠擔體鍵合前經過專門的鹼鈍化處理，將殘余硅羥基降至極

限，這種改善的表面，使得鍵合後的硅膠具有很高的配位度，大大降低了硅羥基與分析物之

間的相互作用，改善了色譜峰形，降低了色譜峰的拖尾程度，提高了峰的對稱性。

Hypersil BDS填料的特徵：

l 對鹼性化合物有更好的峰型。

l 更長的壽命。

l 更好的穩定性。

l 同鹼性化合物一樣，酸性和中性化合物也有非常優異的峰值--真正的通用柱填料。

緊管常規填料色譜柱具有優異的選擇性和較長的色譜柱壽命。且對於簡單的兩元流動相(如

甲醇/水)，當樣品為酸性、中性和弱鹼性化合物時均可獲得較佳的峰不對稱度。但當分析葯

物等樣品中的強極性含氮的化合物時，樣品峰型就極查，拖尾嚴重，並導致定量分析精度下

降，時常會出現一些小峰埋沒於前一拖尾峰的尾巴中，造成該現象的原因是固定相上尚有殘

余的硅羥基。盡管很多廠家對硅膠表面作了第二次反應，即所謂的「封尾」，以減小殘余硅

羥基的作用，但往往都不能完全消除殘余的硅羥基的影響。Hypersil公司開發的將殘余的硅

羥基降至極限的Hypersil BDS(Base Deactived Silica,鹼純化硅膠)系列產品，並用現代衍生反應技術生產出特別適用於鹼性化合物的真正均一反相填料。

Hypersil 300A 填料是基於5um和10um,
孔徑為300A 的硅膠為基質的HPLC填料適合越來越多的生物大分子分離與分析的需要,現可提供C18 C8 C4 的填料

*Hypersil 300A C18 適合親水性強的分子量大於5000的小肽酶的水解片斷及各種天然和合成小肽的分析
*Hypersil 300A C4 適合疏水性的小肽及大分子的多肽分析
*Hypersil 300A C8 選擇性介於C18和C4之間適用於親水性及弱疏水性的小肽和蛋白質酶的水解片斷及各種天然和合成小肽的分析。

Hypersil ODS填料

Hypersil 填料是基於粒度為3um 、5um和10um, 孔徑為120A的硅膠為基質的HPLC填料其生產過程的質量控制標准非常嚴格全世界數千個實驗室使用Hypersil色譜柱已長達20多年很多應用實例可以從多種文獻及著名雜志上查到。大量的試驗測試已經證實Hypersil ODS2填料是替代Waters Spherisorb ODS2的最佳填料無論是在酸性還是鹼性樣品的分析上選擇性與峰型幾乎與其保持一致。

LiChrosorb填料常規色譜分析柱

產品介紹： LiChrosorb是德國MERCH公司出品的一種多孔無定型硅膠基質填料品牌，在過去的25年中非常成功地應用於液相色譜分離。
產品特點：LiChrosorb RP-8和RP-18適合於鹼性樣品的色譜分析。

技術參數：

LiChrosorb填料參數

Spherisorb 填料
Waters公司出品的Spherisorb填料有3um、5um和10um, 孔徑為80A 硅膠為基質的HPLC填料其高的分離性能已得到廣大色譜用戶的認可

Spherisorb填料有C18 C8 CN C6H5和NH2等固定相C18有經封尾處理的ODS-2和未經封尾處理的ODS-1 兩種ODS-2 的碳含量為11.5%ODS-1的碳含量為5.75%

Spherisorb SAX強陰離子交換柱和SpherisorbSCX強陽離子交換柱分別適合於對小分子的酸性和鹼性化合物的分析比
通常的正相和反相色譜柱有更佳的分離性能

BETASIL 填料
ThermoHypersil-Keystone公司非常有特點的新型通用填料裝填的色譜柱-BETASIL 為了達到原裝柱的水平公司採用全新結構柱管裝填以滿足您更高分析要求的需要

*高純硅膠徹底減去活處理提供完美的峰型
*高比表面積高覆蓋鍵合相
*真正的高效柱理論塔板數較高
*較強的保留,反相色譜應用中適宜強極性化合物的分離

⑵ 色譜柱的填料

常見的分配柱填料：碳十八柱 （ODS/C18)、碳八柱（MOS/C8）、碳六柱（Hexyl/C6）、
碳四柱（Butyl/C4）、碳一柱（Methyl/C1）、陰離子交換柱（SAX)、
陽離子交換柱（SCX）、苯基柱（Phenyl）、氨基柱（Amino/NH2）、
氰基柱（Cyano/CN/Nitrile）
常見的吸附柱填料：硅膠柱

⑶ 怎樣查找usp葯典上使用的色譜柱

根據下面色譜柱系列的編號，就可以在USP葯典上查到需要的色譜柱：
L1：十八烷基鍵合多孔硅膠或無機氧化物微粒固定相，簡稱ODS柱 L2：30～50mm表面多孔薄殼型鍵合十八烷基固定相，簡稱C18柱 L3：多孔硅膠微粒，即一般的硅膠柱 L4：30～50mm表面多孔薄殼型硅膠柱 L5：30～50mm表面多孔薄殼型氧化鋁柱 L6：30～50mm實心微球表麵包覆磺化碳氟聚合物，強陽離子交換柱 L7：全多孔硅膠微粒鍵合C8官能團固定相，簡稱C8柱 L8：全多孔硅膠微粒鍵合非交聯NH2固定相，簡稱NH2柱 L9：強酸性陽離子交換基團鍵合全多孔不規則形硅膠固定相，即SCX柱 L10：多孔硅膠微球鍵合氰基固定相（CN），簡稱CN柱 L11：鍵合苯基多孔硅膠微球固定相，簡稱苯基柱 L12：無孔微球鍵合季胺功能團的強陰離子交換柱 L13：三乙基硅烷化學鍵合全多孔硅膠微球固定相（C1），簡稱C1柱 L14：10mm硅膠化學鍵合強鹼性季銨鹽陰離子交換固定相，簡稱SAX柱 L15：已基硅烷化學鍵合全多孔硅膠微球固定相，簡稱C6柱 L16：二甲基硅烷化學鍵合全多孔硅膠微粒固定相 C2柱 L17：氫型磺化交聯苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,強陽離子交換柱 L18：3～10mm全多孔硅膠化學鍵合胺基（NH2）和氰基（CN）柱 L19：鈣型磺化交聯苯乙烯－二乙烯基苯共聚物，強陽離子交換柱 L20：二羥基丙烷基化學鍵合多孔硅膠微球固定相（Diol），簡稱二醇基柱 L21：剛性苯乙烯－二乙烯基苯共聚物微球填料柱L22：帶有磺酸基團的多孔苯乙烯陽離子交換柱 L23：帶有季胺基團的聚甲基丙烯酸甲酯或聚丙烯酸酯多孔離子交換柱 L24：表面含有大量羥基的半剛性聚乙烯醇親水凝膠柱 L25：聚甲基丙烯酸酯樹脂交聯羥基醚（表面含有殘余羧基功能團）樹脂。能分離分子量100～5000MW范圍的水溶性中性、陽離子型及陰離子型聚合物（用聚氧乙烯測定）的固定相 L26：丁基硅烷化學鍵合全多孔硅膠微球固定相，即C4柱 L27：30～50mm的全多孔硅膠微粒 L28：多功能載體，100Å的高純硅膠加以氨基鍵合以及C8反相鍵合的官能團 L29:氧化鋁,反相鍵合,含碳量低,氧化鋁基聚丁二稀小球,5mm，孔徑80Å L30:全多孔硅膠鍵合乙基硅烷固定相

太多了，沒有一一列舉了～～

⑷ 磺酸基陽離子交換鍵合硅膠色譜柱，怎樣維護保養及活化

在使用系統之前，首要任務是檢查色譜柱是否受到微生物污染，否則可能會導致柱子堵塞，使得柱壓升高到無法接受的水平。首先，不連接檢測器，正向安裝色譜柱，使用純甲醇以0.6ml/min流速沖洗大約10倍柱體積。接著，連接檢測器，繼續使用純甲醇以相同流速沖洗約20倍柱體積。隨後，改用去離子水以相同流速沖洗約20倍柱體積。

為確保色譜柱的最佳性能，建議連接保護柱（通常由製造商提供），然後用選定的洗脫液以0.6ml/min流速平衡柱子至少1小時。在用分析洗脫液進行平衡前，如果洗脫液中含有緩沖鹽，應先使用不含緩沖鹽的同比例洗脫液過渡，沖洗約10倍柱體積，以避免緩沖鹽在分析柱內析出。

在進行洗脫液選擇時，需注意陽離子交換柱多使用檸檬酸或酒石酸緩沖液（或其混合溶液）、鄰苯二甲酸緩沖液，pH范圍從2.5到6.5；陰離子交換柱則多使用磷酸緩沖液、硝酸銨溶液（1mMol/L），鄰苯二甲酸緩沖液，pH范圍同樣從2.5到6.5。絕對禁止使用水楊酸緩沖液，因為水楊酸的分解產物會改變固定相的性質。洗脫液在使用前必須通過0.45um濾膜過濾並徹底脫氣，以避免檢測和泵送問題。

為了提高分析的穩定性，建議在室溫條件下使用色譜柱，如果需要，可以將柱溫設置為高於室溫5～10℃。避免在40℃以上使用，以防損壞色譜柱。

在使用過程中，切勿超過色譜柱的耐受最高壓力。調整流速時，應採取小的間隔變化以避免柱床擾動。更換柱子時，務必先將流量降至0，等待洗脫液完全流出柱子，壓力變化到0（約2min）後再進行更換。

防止將來自流動相或樣品中的疏水性或與流動相極性差別很大的化合物進入色譜柱，尤其要避免導入顆粒雜質，以防止操作壓力增高，污染物難以或不能去除。

分析完畢後，採用與C18柱類似的凈化程序，首先用去離子水以0.6ml/min流速沖洗約20倍柱體積，然後用甲醇以相同流速沖洗約10倍柱體積，確保純甲醇飽和後密封保存。

對於長時間保存後的重新使用，重復上述步驟即可。

⑸ 一篇看懂液相色譜柱的分類、選擇及維護！

液相色譜柱的分類及選擇與維護是進行高效液相色譜分析的關鍵。

一、液相色譜柱的分類

按照色譜固定相基質，液相色譜柱可以分為以下幾類：

1. 硅膠基質

1.1 反相色譜柱：使用以硅膠為基礎，表面鍵合有弱極性官能團的鍵合相。流動相通常為水、緩沖液與甲醇、已腈等混合物。樣品流出順序為極性強的先被沖出，極性弱的後被沖出。

1.2 正相色譜：使用硅膠作為固定相，其他具有極性官能團的鍵合相填料。流動相極性相對較低。分離順序依據樣品中各組分極性大小。

1.3 離子交換色譜柱：使用磺化交聯強陰/陽離子鍵合硅膠色譜柱，如強陰離子色譜柱(SAX)和強陽離子交換色譜柱(SCX)。

2. 聚合物基質

聚合物調料如聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，優點是在PH值為1～14均可使用，對大分子物質分離有效。

3. 其他無機填料

如石墨化碳、氧化鋁等，具有特殊性質，適用於特定用途。

二、色譜柱的選擇

液相色譜柱的選擇主要依據分析物的性質，如硅膠基質填料用於小分子量物質，聚合物填料用於大分子物質。

三、色譜柱的維護

1. 色譜柱的平衡：使用甲醇或乙腈沖洗色譜柱，確保分析樣品流動相與沖洗溶劑互溶。

2. 色譜柱的再生：長期使用後柱效下降，可進行再生處理。

3. 色譜柱的維護：使用預柱保護分析柱，避免流動相組成及極性的劇烈變化，使用前經脫氣和過濾處理。

⑹ 陰離子交換柱流出水的電導率為什麼遠小於陽離子交換柱流出水

陰離子交換柱和陽悉局皮離子交換柱都是常見的離子交換色譜柱，但是它們的工作原理和流出水的離子種類不同，因此流出水的電導率也不同。
在陰離子交換柱中，固定相通常是帶有正電荷的樹脂，它可以吸附帶有負電荷的陰離子。當樣品溶液通過柱子時，陰離子會被樹脂吸附，而流出水中的離子主要是未被吸附的陽離子。因此，陰離子交換柱流出水的電導率遠小於陽離子交換柱流出水。此外，陰離子交換柱的流出水通常需要用鹼性溶液進行洗脫，這些鹼性離子也會降低流出水的電導率。
相比之下睜差，陽離子交換柱中的固定相是帶有負電荷的樹脂，它可以吸附臘鄭帶有正電荷的陽離子。當樣品溶液通過柱子時，陽離子會被樹脂吸附，而流出水中的離子主要是未被吸附的陰離子。因此，陽離子交換柱流出水的電導率通常比陰離子交換柱高。
總之，陰離子交換柱和陽離子交換柱的工作原理不同，導致它們流出水的離子種類和電導率也不同。