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醫院供應室純化水無菌采樣

發布時間:2020-12-16 15:01:58

① 請問醫院消毒供應室的工藝監測是什麼

醫院消毒是預防醫院內感染的重要措施之一,消毒效果的監測是評價其消毒方法是否合理、消毒效果是否可靠的手段,因而在醫院消毒工作中至關重要。
醫院消毒效果監測時需遵循以下原則:監測人員需經過專業培訓,掌握一定的消毒知識,具備熟練的檢驗技能;選擇合理的采樣時間(消毒後、使用前);遵循嚴格的無菌操作。
20.2 熱力滅菌效果的監測方法
20.2.1 壓力蒸汽滅菌效果監測方法
20.2.1 化學監測法
(1)化學指示卡(管)監測方法:將既能指示溫度,又能指示溫度持續時間的化學指示管(卡)放人每一待滅菌的物品包中央,經一個滅菌周期後,取出指示管(卡),根據其顏色及性狀的改變判斷是否達到滅菌條件。
(2)化學指示膠帶監測法:將化學指示膠帶粘貼於每一待滅菌物品包外,經一個滅菌周期後,觀察其顏色的改變,以指示是否經過滅菌處理。
(3)結果判定:檢測時,所放置的指示管(卡)的性狀或顏色均變至規定的條件,可認為該包滅菌合格。
(4)注意事項:監測所用化學指示劑須經衛生部批准,並在有效期內使用。
20.2.1.2 生物監測法
(1)指示菌株:指示菌株為嗜熱脂肪桿菌芽胞(ATCC7953或SSIK31株),菌片含菌量為5.0X105-5.0x106cfu/片,在121℃±0.5℃條件下,D值為13-1.9min,殺滅時間(KT值)≤19min,存活時間(ST值)為≥3.9min。
(2)培養基:試驗用培養基為溴甲酚紫蛋白腖水培養基。
(3)檢測方法:將兩個嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片分別裝人滅菌小紙袋內,置於標准試驗包中心部位。
滅菌櫃室內,排氣口上方放置一個標准試驗包(由3件平紋長袖手術衣,4塊小手術巾,2塊中手術巾,1塊大手術中,3O塊10cm x 10cm8層紗布敷料包裹成25cm X 30cm x 30cm大小)。手提壓力蒸汽滅菌器用通氣貯物盒(22cm x 13cm x 6cm)代替標准試驗包,盒內盛滿中試管,指示菌片放於中心部位的兩只滅菌試管內(試管口用滅菌牛皮紙包封),將貯物盒平放於手提壓力蒸汽滅菌器底部。
經一個滅菌周期後,在無菌條件下,取出標准試驗包或通氣貯物盒中的指示菌片,投人溴甲酚紫蛋白腖水培養基中,經56℃培養7天(自含式生物指示物按說明書執行),觀察培養基顏色變化。檢測時設陰性對照和陽性對照。
(4)結果判定:每個指示菌片接種的溴甲酚紫蛋白腖水培養基都不變色,判定為滅菌合格;指示菌片之一接種的溴甲酚紫蛋白腖水培養基,由紫色變為黃色時,則滅菌不合格。
(5)注意事項:監測所用菌片須經衛生部認可,並在有效期內使用。
20 .2.2 乾熱滅菌效果監測方法
20.2.2.1 化學檢測法
(1)檢測方法:將既能指示溫度又能指示該溫度持續時間的化學指示劑分別放人待滅菌的物品中。經一個滅菌周期後,取出化學指示劑,據其顏色及性狀的改變判斷是否達到滅菌條件。
(2)結果判定:檢測時,所放置的指示管的顏色及性狀均變至現定的條件,則可認為該包達到滅菌條件。
(3)注意事項:檢測所用的化學指示劑需經衛生部認可,並在有效期內使用。
20.2.2.2 物理檢測法:(熱電偶檢測法)
(l)檢測方法:檢測時,將多點溫度檢測儀的多個探頭分別放於滅菌器各層內、中、外各點。關好櫃門;將導線引出,由記錄儀中觀察溫度上升與持續時間。
(2)結果判定:若所示溫度(曲線)達到預定溫度,則滅菌溫度合格。
20.2.2.3 生物檢測法:
(1)指示菌株:枯草桿菌黑色變種芽胞(ATCC9372),菌片含菌量為5.0XI05一5.0XI06cfu/片。其抗力應符合以下條件:在溫度160±2℃時,其D值為1.3-1.9min,存活時間≥3.9min,死亡時間 ≤1.9min。
(2)檢測方法:將枯草桿菌芽胞菌片分別裝人滅菌中試管內(1片/管)。滅菌器與每層門把手對角線內,外角處放置2個含菌片的試管,試管帽置於試管旁,關好櫃門,經一個滅菌周期後,待溫度降至80℃時,加蓋試管帽後取出試管。在無菌條件下,加人普通營養肉湯培養基(5ml/管),以37℃培養48h,觀察初步結果,無菌生長管繼續培養至第七日。
(3)結果判定:若每個指示菌片接種的肉湯管均澄清,判為滅菌合格,若指示菌片之一接種的肉湯管混濁,判為不合格,對難以判定的肉湯管,取0.1ml接種於營養瓊脂平板,用滅菌L棒塗勻,放37℃培養48h,觀察菌落形態,並做塗片染色鏡檢,判斷是否有指示菌生長;若有指示菌生長,判為滅菌不合格;若無指示菌生長,判為滅菌合格。
(4)注意事項:檢測所用的指示菌片需經衛生部認可,並在有效期內使用。
20.3 紫外線消毒效果的監測
20.3.1 紫外線燈管輻照度值的測定
1)檢測方法:開啟紫外線燈5min後,將測定波長為254nm的紫外線輻照計探頭置於被檢紫外線燈下垂直距離1m的中央處,待儀表穩定後,所示數據即為該紫外線燈管的輻照度值。
(2)結果判定:普通30w。直管型紫外線燈,新燈輻照強度≥90Uw/cm2為合格;使用中紫外線燈輻照強度≥70Uw/cm2對為合格;30W高強度紫外線新燈的輻照強度≥180 Uw/cm2行為合格。
(3)注意事項:測定時電壓220v土5v,溫度20一25℃,相對濕度<60%,紫外線輻照計必須在計量部門檢定的有效期內使用。
20.3.2 生物監測法
(1)空氣消毒效果監測:監測按20.7執行。
①表面消毒效果監測:監測按20.6執行。
20.4 醫療器械滅菌效果的監測
20.4.1 采樣時間:在滅菌處理後,存放有效期內采樣。
20.4.2 常規監測
(1)檢測方法:用無菌的方法將擬檢縫合針、針頭、手術刀片等小件醫療器械各5支,分別投人5ml的無茵洗脫液中;注射器則取5副在5ml無菌肉湯中分別抽吸5次;手術鉗、鑷子等大的醫療器械在無菌操作下取2份以上用沾有無菌洗脫液的棉拭子反復塗擦采樣,並將棉拭子投入5ml無菌洗脫液中。將采樣管用力振打80次,用無菌吸管吸取lml待檢樣品放於滅菌平皿內,加人已熔化的45℃-48℃的營養瓊脂15-18ml,邊傾注邊搖勻,待瓊脂凝固,置37℃溫箱培養48h,計數菌落數。
(2)結果判定:平板上無菌生長為滅菌合格。
(3)注意事項:若消毒因子為化學消毒劑時,采樣液中應加人相應中和劑。
20.4.3 無菌檢驗
20.4.3.1 無菌檢驗前准備

20.4.3.2 無菌操作:取縫合針、針頭、刀片等小件醫療器械5件直接浸人6管需一厭氧培養管(其中一管作陽性對照)與4管黴菌培養管C培養基用量為15ml/管。
取5副注射器,在5ml洗脫液中反復抽吸5次,洗下管內細菌,混和後接種需一厭養菌培養管(共6管,其中1管作陽性對照)與黴菌培養管(共4管)。接種量:lml注射器為0.5ml,2ml注射器為Iml,5-10ml注射器為2ml,20-50ml注射器為5ml,培養基用量:接種量為2ml以下為15ml/管,接種量5ml為40ml/管。
手術鉗、鑷子等大件醫療器械取2件用沾有無菌洗脫液的棉拭子反復塗抹采樣,將棉拭子投人sml無菌洗脫液中,將采樣液混勻,接種於需一厭氧培養管(共6管,其中1管作陽性對照)與黴菌培養基(共4管)。接種量為lml/管,培養基用量為15ml/管。
20.4.3.3 培養:在待檢樣品的需一厭氧培養管中,接種預先准備的金黃色葡萄球菌陽性對照管液1:1000稀釋1ml,將需一厭氧培養管以及陽性與陰性對照管均於30-35℃培養5天,黴菌培養管與陰性對照管於20-25℃培養7天,培養期間逐日檢查是否有菌生長,如加人供試品後培養基出現混濁或沉澱,經培養後不能從外觀上判斷時,可取培養液轉種人另一支相同的培養基中或斜面培養基上,培養48-72h後,觀察是否再現混濁或在外面上有無菌落生長,並在轉種的同時,取培養液少量,塗片染色,用顯微鏡觀察是否有菌生長。
20.4.3.4 結果判定:陽性對照在24h內應有菌生長,陰性對照在培養期間應無菌生長,如需一厭氧菌及黴菌培養管內均為澄清或更顯混濁但經證明並非有菌生長,判為滅菌合格;如需一厭氧菌及黴菌培養管中任何1管顯混濁並證實有菌生長,應重新取樣,分別同法復試2次,除陽性對照外,其他各管均不得有菌生長,否則判為滅菌不合格。
20.4.4 注意事項
(1)送檢時間不得超過6h,若樣品保存於0-4℃,則不超過24h。
(2)被采樣本表面積<100cm2取全部表面;被采樣本表面積 ≥ 100Cm2,取 100cm2。
(3)若消毒因子為兒學消毒劑,采樣液中應加人相應中和劑。
20.4.5 熱原檢查法:
20.4.5.鱟試驗

20.4.5.2 動物試驗法
(1)原理:將一定劑量的供試品,在規定的時間內,觀察家兔體溫升高情況,以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規定。
(2)供試家兔:試驗用的家兎應健康無傷;體重1.7-3.0kg,雌兔應無孕。預測體溫前7日起,即應用同一飼料飼養。在此期間內,體重應不減輕,精神、食慾、排泄等不得有異常現象。未經使用於熱原檢查的家兔,或供試品判定為符合規定,但組內升溫達06T的家兔;或供試品判定為不符合規定,但其組內家兔平均升溫未達0.8℃,且已休息兩周以上的家兔;或三周內未曾使用的家兔,均應在檢查供試品前3-7日內預測體溫,進行挑選。挑選試驗的條件與檢查供試品時相同;僅不注射葯液,每隔lh測量體溫1次,共測4次,4次體溫均在38.0-39.6℃的范圍內,且最高最低體溫的差數不超過0.4℃的家兔,方可供熱原檢查用。用於熱原檢查後的家兔,如供試品判定為符合規定,至少休息2日方可供第2次檢查用。用於熱原檢查後的家兔,如供試品判定為不符合規定,且其組內家兔平均升溫達0.8℃或更高時,則組內全部家兔不再使用,每一家兔的使用次數,用於一般葯品的檢查,不應超過10次。
(3)試驗前的准備:在作熱原檢查前l-2日,供試用家兔應盡可能處於同一溫度的環境中,實驗室和飼養室的溫度相差不得大於5℃,實驗室的溫度應在17-28℃,在試驗全部過程 中,應注意室溫變化不得大於3℃,應避兔噪音干擾。家兔在試驗前至少lh開始停止給食並置於適宜的裝置中,直至試驗完畢c家兔體溫應使用精密度為±0.1℃的肛溫計,或其他同樣精確的測溫裝置。肛溫計插人肛門的深度和時間各兔應相同,深度一般約為6cm,時間不得少於Imin,每隔30-60min測量體溫1次,一般測量2次,兩次體溫之差不得超過0.2℃,以此兩次體溫的平均值作為該兔的正常體溫。當日使用的家兔,正常體溫應在38.0-39.6℃的范圍內,且各兔間正常體溫之差不得超過l℃。
(4)試驗用的注射器、針頭及一切和供試品溶液接觸的器皿,應置烘箱中用250℃加熱30min或用180℃加熱2h,也可用其他適宜的方法除去熱原。
(5)檢查法:取適用的家兔3隻,測定其正常體溫後15min內,自耳靜脈緩緩注人規定劑量並溫熱至約38℃的供試品溶液,然後每隔lh 按前法測量其體溫1次,共測3次,以3次體溫中最高一次減去正常體溫,即為該兔體溫的升高度數。如 3隻家兔中有 1隻體溫升高 0.6℃或0.6℃以上,或 3隻家兔體溫升高均低於 0.6℃,但升高的總數達 l.4℃或 l.4℃以上,應另取 5隻家兔復試,檢查方法同上。
(6)結果判定:在初試3隻家兔隊體溫升高均低於0.6℃,並且3隻家兔體溫升高總數低於1.4℃,或在復試的5隻家兔中,體溫升高0.6℃或0.6℃以上的兔數僅有1隻,並且初試,復試合並8隻家兔的體溫升高總數為3.5℃或3.5℃以下,均認為供試品符合熱原檢查條例規定。
在初試3隻家兔中,體溫升高0.6℃或0.6℃以上的家兔超過1隻,或在復試的5隻家兔中;體溫升高0.6℃或0.6℃以上的兔數超過1隻,或在初試、復合並8隻家兔的體溫升高總數超過3.5℃,均認為供試品的熱原檢查不符合規定。
20.5 手和皮膚粘膜消毒效果監測
20.5.1 采樣時間;在消毒後立即采樣。
20.5.2 采樣方法
(1)手的采樣:被檢人五指並攏,用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭子在雙手指屈面從指根到指端往返塗擦2次(一隻手塗擦面積約30cm2),並隨之轉動采樣棉拭子,剪去操作者手接觸部位,將棉拭子投人10ml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內,立即送檢。
(2)皮膚粘膜采樣:用 5cm × 5crn滅菌現格板,放在被檢皮膚處;用沒有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭子1支,在規格板內橫豎往返均勻塗擦各5次,並隨之轉動棉拭子,剪去手接觸部位後,將棉拭子投人10ml含相應中和劑的無菌洗脫液的試管內,立即送檢。不規則的粘膜皮膚處可用棉拭子直接塗擦采樣。
20.5. 3 檢測方法
(1)細菌總數檢測:將采樣管用力振打80次,用無菌吸管吸取1.0ml待檢樣品接種於滅菌平皿內加人已熔化的45-48℃的營養瓊脂15-18ml,邊傾注邊搖勻,待瓊脂凝固,置37℃溫箱培養48h,計數菌落數。
采樣結果計算方法:
細菌總數(cfu/cm2)=平板上菌落數×稀釋倍數/采樣面積(cm2)
(2)致病菌檢測:致病菌檢測按2015原則執行。
20.5.4 結果判定
(1)消毒洗手
l、ll類區域工作人員:細菌總數≤5Cfu/Cm2,並未檢出致病菌為消毒合格。
lll類區域工作人員:細菌總數≤10 Cfu/Cm2,並未檢出致病菌為消毒合格。
lV類區域工作人員:細菌總數 ≤15 Cfu/Cm2,並未檢出致病菌為消毒合格。
母嬰同室\嬰兒室、新生兒室及兒科病房的工作人員手上,不得檢出沙門氏菌及其它致病菌。
(2)皮膚粘膜:參照手的衛生學標准執行。
20.5.5 注意事項
皮膚粘膜采樣處,若表面不足 5cm × 5cm可用相應面積的規格板采樣。
20.6 物品和環境表面消毒效果的監測
20.6.1 采樣時間:在消毒處理後進行采樣。
20.6.2 采樣方法:用5cm×5cm滅菌規格板,放在被檢物體表面,采樣面積≥100cm2,連續采樣4個,用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭於1支;在規格板內橫豎往返均勻塗擦各5次,並隨之轉動棉拭子,剪去手接觸部位後,將棉拭子投人10ml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內,立即送檢。
門把手等不規則物體表面用棉拭子直接塗擦采樣。
20.6.3 檢測方法
(1)細菌總數檢測:檢測方法按20.5.3(1)執行。小型物體表面的結果計算,用cfu/件表示。
(2)致病菌檢測:檢測方法按 20 .14執行。
20.6.4 結果判定
l、ll類區域:細菌總數≤5cfu/Cm2,並未檢出致病菌為消毒合格。
Ill類區域:細菌總數≤10 cfu/Cm2,並未檢出致病菌為消毒合格。
lV類區域:細菌總數≤15 cfu/Cm2,並未檢出致病菌為消毒合格。
母嬰同室、早產兒室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的物體表面不得檢出沙門氏菌。
20.6.5 注意事項
(1)送檢時間:按20.4.4(1)執行。
(2)采樣面積;按20.4.4(2)執行。
20.7 空氣消毒效果的監測
20.7.1 采樣時間:在消毒處理後、操作前進行采樣。
20.7.2 采樣方法
(1)布點方法;室內面積≤30Cm2,設內、中、外對角線3點,內、外點布點部位距牆壁IM處;室內面積>30M2,設4角及中央5點,4角的布點部位距牆壁lm處。
(2)平板暴露法:將普通營養瓊脂平板(直徑為9CM)放在室內各采樣點處,采樣高度為距地面1.5m,采樣時將平板蓋打開,扣放於平板旁,暴露5min,蓋好立即送檢。
20.7.3 檢測方法:將送檢的平板置37℃溫箱培養48h,計數菌落數,並分離致病菌。

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