1. 用什麼方法可以證明醋酸纖維薄膜有無滲透作用
如果你這么問就應該表明你理解了電滲的含義。我就不具體解釋了其電滲概念了，證明有無電滲作用可以這樣做。在充分浸泡巴比妥溶液的醋酸纖維薄膜上點樣有顏色且不帶電荷的染色劑；再通電進行電泳，若染色劑也隨之運動，說明存在電滲作用。若染色劑不隨之運動，則不存在電滲作用。希望這個答案對你有用！
2. 如何做好血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳實驗
做好血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳實驗的方法：
電泳時，電壓應控制在 110 ～ 140V ，不能過高，若電壓太高，產熱量大，則蛋白質標本會破壞，並且電壓高則帶電顆粒移動速度快，分離效果不理想。
醋酸纖維素薄膜在電泳前，一定要在緩沖液中浸透，否則有礙電泳分離，最好是浸泡過夜，效果最佳。
點樣時樣品一定要點在無 光澤面，否則很難吸入，點樣量 不宜過多（血清樣品最適宜 3μl ）。其原因是醋酸纖維素薄膜承受蛋白質有限。量過多則分子量相近的物質相互爭奪遷移而重疊，影響結果觀察。
電泳開始後，不能再取放薄膜，以防觸電。如必需進行，要先關閉電源。
影響電泳的主要因素：
電泳介質 pH 值的影響 : 對於蛋白質和氨基酸等兩性分子，電泳介質的 pH 值影響蛋白質的電離情況，即可決定蛋白質的帶電量 (Q) 。 pH 值小於等電點，分子帶正電荷，向負極泳動，如果 pH 大於等電點，分子帶負電荷，向正極泳動。 pH 值偏離等電點越遠，分子所帶凈電荷越多，其泳動速度越快。當緩沖液 pH 等於其等電點時，分子處於等電狀態，不移動。由於血清蛋白質的等電點多在 pH4 ～ 6 之間，因此，分離血清蛋白常用 pH 8.6 的巴比妥緩沖液或三羥甲基氨基甲烷 (Tris) 緩沖液。
緩沖液的離子強度 : 離子強度低，電泳速度快，分離區帶不易清晰；離子強度高，電泳速度慢，但區帶分離清晰。如離子強度過低，緩沖液的緩沖量小，不易維持 pH 的恆定；離子強度過高，則降低蛋白質的帶電量 ( 壓縮雙電層 ) 使電泳速度減慢。所以常用離子強度為 0.02 ～ 0.2 之間。
電場強度的影響 : 電場強度和電泳速度成正比關系。電場強度以每厘米的電勢差計算，也稱電勢梯度。如紙電泳的濾紙長 15cm ，兩端電壓 ( 電勢差 ) 為 150V ，則電場強度為 150 ／ 15=10 V ／ cm ，電場強度愈高，則帶電粒子的移動愈快。 隨著電場強度的增高，電流強度增加，產熱也增多。產熱的不良後果是： ① 引起水的蒸發，改變溶液 pH 及離子強度； ② 引起介質溫度高，可使蛋白質變性。因此電泳必須控制電壓在一定范圍之內，當進行高壓電泳時，必須裝備有效的冷卻裝置。
電滲 : 在電場中，由於多孔支持物吸附水中的離子使支持物表面相對帶電，在電場作用下，溶液就向一定方向移動，此種現象稱為電滲。如紙上電泳所用的濾紙纖維素帶有負電荷；瓊脂糖電泳中，所用的瓊脂糖由於大量硫酸根的存在也帶有負電荷，它們使水感應產生水合氫離子 (H+3O) 。在外電場的作用下，水向負極移動。如果被測定樣品也帶正電荷，則移動更快；如果被測定樣品帶負電荷，則移動減慢。所以電泳時，顆粒泳動所表現的速度決定於顆粒本身的泳動速度和溶液的電滲作用。因此在選用支持物時，應盡量避免高電滲作用的物質。
3. 用醋酸纖維薄膜電泳法分離蛋白質的質素特點和意義是什麼
一、原理醋酸纖維薄膜電泳是用醋酸纖維素薄膜作為支持物的電泳方法帶電顆粒在電場力作用下，向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳。由於各種蛋白質都有特定的等電點，如將蛋白質置於pH值低於其等電點的溶液中，則蛋白質將帶正電荷而向負極移動kos反之628則向正極移動。因為蛋白質分子在電場中移動的速度與其帶電量、分子的形狀及大小有關，所以，可用電泳法將不同的蛋白質分離開來。血清中含有多種蛋白質，它們的等電點都在pH7．5以下。將血清放於pH8．6的緩沖液電泳時，所有的血清蛋白都帶有負電荷，在電場中將向正極移動。由於各種血清蛋白在相同pH時所帶電荷數量不等，分子顆粒大小不一，因而泳動速度不同，經電泳被分離開來840血清蛋白質的等電點和分子量。從前端至點樣處的方向分別為清蛋白、α1－球蛋白、α2－球蛋白、β－球蛋白及γ－球蛋白。本實驗以醋酸纖維素薄膜（簡稱CAM）為支持物分離血清中的不同蛋白質。它是一種良好的呈均一泡沫狀疏鬆薄膜km厚約120μm具有一定的吸水性。
4. 醋酸纖維素薄膜電泳實驗中為什麼點樣前應將膜上多餘的緩沖液吸掉
點樣時，應將薄膜表面多餘的緩沖液用濾紙吸去，以免引起樣品擴散。這是我們老師給的答案
5. 醋酸纖維膜為什麼要浸潤一定時間
市售醋酸纖維素薄膜均為干膜片,薄膜的浸潤與選膜是電泳成敗的重要關鍵之一.將干膜片漂浮於電極緩沖液表面,其目的是選擇膜片厚薄及均勻度,如漂浮15s—30s時,膜片吸水不均勻,則有白斑點或條紋,這提示膜片厚薄不勻,應捨去不用,以免造成電泳後區帶扭曲,界線不清,背景脫色困難,結果難以重復.由於醋酸纖維薄膜親水性比紙小,浸泡30min以上是保證膜片上有一定量的緩沖液,並使其恢復到原來多孔的網狀結構.
6. 簡述醋酸纖維薄膜電泳分離蛋白質的基本原理和操作過程
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電泳圖譜不齊或分離不良y}-!:3,
百拇醫葯
這是電泳分析中最常見的問題，多數是由於血清滴加不均勻或滴加過多，也有因薄膜質量不合要求所致。點樣這一步非常關鍵，一定要按操作步驟進行。首先選擇質勻、孔細、染料吸附少的薄膜充分浸透緩沖液至濕度均勻無干白點。然後將濾紙吸去薄膜表面的多餘水份，使薄膜含水量飽和均勻，這樣才能防止薄膜表面液體含量不均，水份移動而引起標本移位。點樣前注意關閉門窗和風扇，因空氣流通快可使標本和水份蒸發而影響電泳圖形。點樣要力求做到均勻迅速，有報道[2]，在實踐中把加樣器干沾血清，改為沾取標本前先浸入蒸餾水中沾濕用吸水紙吸干後再沾血清，這樣加樣器內均勻沾取血清的效果較干沾為佳。y}-!:3,
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電泳圖譜出現條痕y}-!:3,
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問題是由於點樣後薄膜過干，或因電泳槽密閉性不良，或電流過大，溫度升高，薄膜水份蒸發乾燥而造成的。因此薄膜一定要充分浸透後才能點樣，並注意檢查電泳槽是否蓋緊，電泳槽要放在遠離光源熱源的陰涼之處。在電泳過程中隨時觀察電壓電流的變化，因通電後產生一定的熱量，電流會有所增加。控制電壓100～110v，電流0.5～0.6ma/cm，電泳時間一般冬長夏
7. 為什麼用ph為八點六的電容緩沖溶液來浸泡醋酸纖維薄膜
在這次實驗中，電極緩沖液pH為8.6。而幾種血清蛋白的等電點（pI）均小於它。也就是說，電泳時，他們均帶正電荷，在電場中向正極移動，剛好點樣端放在負極，這樣，它們就會向另一個方向移動
8. 醋酸纖維素薄膜作用電泳的支持物有何優缺點
醋酸纖維素薄膜電泳的特點：
醋酸纖維素薄膜是由醋酸纖維素加工製成的。醋酸纖維素薄膜作為是電泳支持體。
它有以下優點：
①電泳後區帶界限清晰；
②通電時間較短（二十分鍾至一小時）；
③它對各種蛋白質（包括血清白蛋白，溶菌酶及核糖核酸酶）都幾乎完全不吸附，因此無拖尾現象；
④對染料也沒有吸附，因此不結合的染料能完全洗掉，無樣品處幾乎完全無色。它的電滲作用雖高但很均一，不影響樣品的分離效果，由於醋酸纖維素薄膜吸水量較低，因此必需在密閉的容器中進行電泳，並使用較低有電流避免蒸發。
醋酸纖維素薄膜電泳已經廣泛用於血清蛋白，血紅蛋白，球蛋白，脂蛋白，糖蛋 白，甲胎蛋白，類固醇及同工酶等的分離分析中，盡管它的分辨力比聚丙醯胺凝膠電泳低，但它具有簡單，快速等優點。根據樣品理化性質，從提高電泳速度和分辨力出發選擇緩沖液的種類，pH和離子強度。選擇好的緩沖液最好是揮發性強，對顯色或紫外光等觀察區帶沒有影響，若樣品含鹽量較高時，宜採用含鹽緩沖液。例如血清蛋白電泳可選用pH8.6的巴比妥緩沖液或硼酸緩沖液；氨基酸的分離則可選用pH7.2的磷酸鹽緩沖液等。電泳時先將濾膜剪成一定長度和寬度的紙條。在欲點樣的位置用鉛筆做上記號，點上樣品，在一定的電壓，電流下電泳一定時間，取下濾膜，進行染色。不同物質需採用不同的顯色方法，如核苷酸等物質可在紫外分析燈下觀察定位，但許多物質必須經染色劑顯色。
醋酸纖維素薄膜電泳染色後區帶可剪下，溶於一定的溶劑中進行光密度測定。也可以浸於折射率為1.474的油中或其他透明液中使之透明，然後直接用光密度計測定。
它的缺點是厚度小，樣品用量很小，不適於制備。
原理：
醋酸纖維素薄膜電泳（cellulose acetate membrance electrophoresis）以醋酸纖維薄膜為支持物。它是纖維素的醋酸酯，由纖維素的羥基經乙醯化而製成。它溶於丙酮等有機溶液中，即可塗布成均一細密的微孔薄膜，厚度以0.1mm—0.15mm為宜。太厚吸水性差，分離效果不好；太薄則膜片缺少應有的機械強度則易碎。
醋酸纖維素薄膜與濾紙相比較，有以下優點
（1）醋酸纖維素薄膜對蛋白質樣品吸附極少，無「拖尾」現象，染色後背景能完全脫色，各種蛋白質染色帶分離清晰，因而提高了測定的精確性。
（2）快速省時。由於醋酸纖維素薄膜親水性較濾紙小，薄膜中所容納的緩沖液也較少，電滲作用小，電泳時大部分電流是由樣品傳導的，所以分離速度快，電泳時間短，一般電泳45—60min即可，加上染色，脫色，整個電泳完成僅需90min左右。
（3）靈敏度高，樣品用量少。 血清蛋白僅需2μl血清，甚至加樣體積少至0.1μl，僅含5μg蛋白樣品也可得到清晰的分離帶。臨床醫學檢驗利用這一點，檢測在病理情況下微量異常蛋白的改變。
（4）應用面廣。某些蛋白在紙上電泳不易分離，如胎兒甲種球蛋白，溶菌酶，胰島素，組蛋白等用醋酸纖維薄膜電泳能較好地分離。
（5）醋酸纖維素薄膜電泳染色後，經冰乙酸，乙醇混合液或其它溶液浸泡後可製成透明的干板，有利於掃描定量及長期保存。
2、醋酸纖維素薄膜電泳與聚丙烯醯胺凝膠電泳相比，操作簡單，但分離效果不太好。如血清蛋白在醋酸纖維素薄膜電泳中，只能分離出5—6條區帶，而聚丙烯醯胺凝膠電泳可分離出數10條區帶。
[應用意義]
由於醋酸纖維素薄膜電泳操作簡單、快速、廉價。目前已廣泛用於檢測血漿蛋白、脂蛋白、糖蛋白、胎兒甲種球蛋白、體液、脊髓液、脫氫酶、多肽、核酸及其他生物大分子，為心血管疾病，肝硬化及某些癌症鑒別診斷提供了可靠的依據，因而成為醫學和臨床檢驗的常規技術。
[注意事項]
1、醋酸纖維素薄膜的預處理
市售醋酸纖維素薄膜均為干膜片，薄膜的浸潤與選膜是電泳成敗的重要關鍵之一。將干膜片漂浮於電極緩沖液表面，其目的是選擇膜片厚薄及均勻度，如漂浮15s—30s時，膜片吸水不均勻，則有白斑點或條紋，這提示膜片厚薄不勻，應捨去不用，以免造成電泳後區帶扭曲，界線不清，背景脫色困難，結果難以重復。由於醋酸纖維薄膜親水性比紙小，浸泡30min以上是保證膜片上有一定量的緩沖液，並使其恢復到原來多孔的網狀結構。最好是讓漂浮於緩沖液的薄膜吸滿緩沖液後自然下沉，這樣可將膜片上聚集的小氣泡趕著走。點樣時，應將膜片表面多餘的緩沖液用濾紙吸去，以免緩沖液太多引起樣品擴散。但也不能吸得太干，太干則樣品不易進入薄膜的網孔內，而造成電泳起始點參差不齊，影響分離效果。吸水量以不幹不濕為宜。為防止指紋感染，取膜時，應戴指套或用鑷子。
2、緩沖液的選擇
醋酸纖維素薄膜電泳常選用pH8.6巴比妥溶液，其濃度為0.05mol/L—0.09mol/L。選擇何種濃度與樣品及薄膜的薄厚有關。選擇時，先初步定下某一濃度，如電泳槽兩極之間的膜長度為8 cm—10cm，則需電壓25V/cm膜長，電流強度為0.4mA/cm—0.5mA/cm膜寬。當電泳達不到或超過這個值時，則應增加緩沖液濃度或進行稀釋。緩沖液濃度過低，則區帶泳動速度快，並由於擴散變寬；緩沖液濃度過高，則區帶泳動速度慢，區帶分布過於集中不易分辨。
3、加樣量
加樣品的多少與電泳條件、樣品的性質、染色方法與檢測手段靈敏度密切相關。作為一般原則，檢測方法越靈敏，加樣量則越少，對分離更有利。如加樣量過大，則電泳後區帶分離不清楚，甚至互相干擾，染色也較費時。如電泳後用洗脫法定量時，每厘米加樣線上需加樣品0.1μl—0.5μl約相當於5μg—1000μg蛋白。血清蛋白常規電泳分離時，每厘米加樣線加樣量不超過1μl，相當於60μg—80μg的蛋白質。但糖蛋白和脂蛋白電泳時，加樣量則應多些。對每種樣品加樣量均應先作預實驗加以選擇。
點樣好壞是獲得理想圖譜的重要環節之一，以印章法加樣時，動作應輕、穩，用力不能太重，以免將薄膜弄壞或印出凹陷而影響電泳區帶分離效果。
4、電量的選擇
電泳過程應選擇合適的電流強度，一般電流強度為0.4mA/cm—0.5mA/cm寬膜為宜。電流強度高，尤其在溫度較高的環境中，可引起蛋白質變性或由於熱效應引起緩沖液中水分蒸發，使緩沖液濃度增加，造成膜片乾涸。電流過低，則樣品泳動速度慢且易擴散。
5、染色液的選擇
對醋酸纖維素薄膜電泳後染色應根據樣品的特點加以選擇。其原則是染料對被分離樣品有較強的著色力，背景易脫色；應盡量採用水溶性染料，不宜選擇醇溶性染料，以免引起醋酸纖維素膜溶解。
應控制染色時間。時間長，薄膜底色深不易脫去；時間短，著色淺不宜區分，或造成條帶染色不均，必要時可進行復染。
6、透明及保存
透明液應臨用前配製，以免冰乙酸及乙醇揮發影響透明效果。這些試劑最好選用分析純。透明前，薄膜應完全乾燥。透明時間應掌握好，如在透明乙液中浸泡時間太長則薄膜溶解，太短則透明度不佳。
透明後的薄膜完全乾燥後才浸入石蠟中，使薄膜軟化。如有水，則液體石蠟不易浸入，薄膜不易平展。
9. 血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳出現拖尾現象是什麼原因
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這是電泳分析中最常見的問題，多數是由於血清滴加不均勻或滴加過多，也有因薄膜質量不合要求所致。點樣這一步非常關鍵，一定要按操作步驟進行。首先選擇質勻、孔細、染料吸附少的薄膜充分浸透緩沖液至濕度均勻無干白點。然後將濾紙吸去薄膜表面的多餘水份，使薄膜含水量飽和均勻，這樣才能防止薄膜表面液體含量不均，水份移動而引起標本移位。點樣前注意關閉門窗和風扇，因空氣流通快可使標本和水份蒸發而影響電泳圖形。點樣要力求做到均勻迅速，有報道[2]，在實踐中把加樣器干沾血清，改為沾取標本前先浸入蒸餾水中沾濕用吸水紙吸干後再沾血清，這樣加樣器內均勻沾取血清的效果較干沾為佳。y}-!:3,
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電泳圖譜出現條痕y}-!:3,
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問題是由於點樣後薄膜過干，或因電泳槽密閉性不良，或電流過大，溫度升高，薄膜水份蒸發乾燥而造成的。因此薄膜一定要充分浸透後才能點樣，並注意檢查電泳槽是否蓋緊，電泳槽要放在遠離光源熱源的陰涼之處。在電泳過程中隨時觀察電壓電流的變化，因通電後產生一定的熱量，電流會有所增加。控制電壓100～110V，電流0.5～0.6mA/cm，電泳時間一般冬長夏
10. 生物化學醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白的試驗中，若干現象的原因分析（在線等）
可能存在多種因素,比如說
1.電泳時間不足
2.薄膜在染色或漂洗時重疊緊密且時間很長
3.薄膜在緩沖液中浸泡的時間不足
4.點樣時薄膜上是否存在多餘的水分...
是不是還有可能與樣品的配製濃度有關
注:鄙人也是一名學生,也是對這個實驗提出了問題;因見你的問題還有兩天就結束了還沒有人給出答案,便亂說一通,緊供你參考!!!
鄙人做此實驗只做出了4條區帶,也有在此提出疑問,問其是哪條區帶沒有出現,為什麼?歡迎你前來指導,謝謝!!!!