梯度純水相有機相

❶ 為什麼普通C18色譜柱不能用純水沖洗

容易引起疏水坍塌，把強保留物質沖出來，會毀了柱子的，所以水相不能超過95%，最開始的梯度淋洗也是高有機相到高水相，但是不是純水相。

❷ 反相柱怎麼過

反相柱的具體操作方法如下：

1、基本操作和硅膠柱相同，濕法裝柱好些，勻漿液用甲醇。

2、流動相基本是水、有機相混合物，有機相可選擇甲醇、乙腈、乙醇等。不能使用乙酸乙酯，氯仿，正己烷等正相溶劑。一般C18填料怕鹼，多數C18填料使用pH范圍2-8。慎用三乙胺，氨水之類的改性劑。流動相可加0.1%三氟乙酸或醋酸改善拖尾。

3、梯度洗脫從高水相開始，但有機相比例不低於5%，最好不要用純水，有機相比例越高越容易洗脫。

4、洗脫結束用純有機相，如純甲醇沖洗。

5、使用後的填料不要乾燥，保存在純甲醇里，也方便下次裝柱。

硅膠基質鍵合反相柱的清洗：

再生被污染HPLC柱子的關鍵是知道污染物的性質並且能找到適當的溶劑來去除。如果污染是因為重復進樣時強保留物質的累積引起的，利用簡單的清洗步驟來除去這些污染物往往就能恢復其色譜性能。

經過等度運行後的色譜柱，有時用90～100％含量的溶劑B（雙溶劑反相系統中洗脫能力較強的溶劑，如甲醇、乙晴、四氫 呋喃等）沖洗20個柱體積可以清除污染物（色譜柱的柱體積和空柱管體積概念不同，一根4.6x250mm柱子的柱體積只有2.5ml，2.1x150mm的是0.28ml）。

如果使用的是緩沖鹽系統，不要直接切換到強溶劑，突然轉換到高濃度有機溶劑可能會使HPLC流動體系中的緩沖鹽沉澱，這樣會導致更大的問題，如柱頭篩板堵塞、連接管路堵塞、泵泄漏、活塞損傷或進樣閥轉軸失靈。應該先用無緩沖鹽流動相（即把緩沖液換成水），沖洗5～10個柱體積以後才切換到用強溶劑清洗。

有時候，強溶劑B也沒法把殘留在色譜柱上的污染物洗掉。那麼就需要用更強的溶劑或者是系列溶劑組合。如果污染物不是生物質的，一種強溶劑或幾種溶劑組合清洗基本能解決問題。柱子生產廠家的網頁和產品說明書上很多也有清洗方法推薦。

❸ 高效液相色譜儀操作

不同牌子的機子差別稍微有點大，就算同樣的牌子，比如都是島津的，不同型號的還會稍有差別，如果你確定你要用哪台機子，搜搜那個牌子型號的液相，如何操作，有什麼細節上的注意事項，是否需要更改一些基礎設置，如果一個機子天天用倒沒什麼，就怕有的機子一段時間不用就把設置回歸出廠設置了，比如最高壓力才9Mp，流速一到0.8泵就莫名其妙關了之類，因為常用的設置是25MP，還有什麼高級設置里也會有一些細節問題，稍微不對可能就進不了樣，這類問題很多，網上細說不了，最好有老師現場指導。
現在以我常用的一個島津機子為例，大致說一下，一般先要看流動相，確定你用什麼流動相，甲醇還是乙腈，超純水還是百分之多少的磷酸，或者是緩沖鹽之類的，把流動相配好之後，分別抽濾，注意區別有機相用有機膜，水相用水膜，而且抽濾系統要注意清潔，過完一種洗一下，用純水和超純水盪干凈之後才能繼續使用，然後超聲，一般5-15min左右，然後就可以把流動相放在機子上了，看一下用那種柱子，是C18還是苯基柱還是什麼柱子之類的，把柱子裝好，注意方向，不要裝反了，開機子，電腦，先不要聯工作站，機子自檢完沒有問題後再聯工作站，然後選擇方法，確定流動相比例、柱溫、檢測波長、流速，然後排氣，有的排氣需要打開排氣閥，有的不需要，看機子類型了，排完氣平衡機子，如果機子流速0.5已經平衡了，改為1.0，一般進樣流速都是1.0，平衡之後可以選擇進單針還是設置批處理，樣品走完之後沖機子，如果有緩沖鹽，需要從水到有機相梯度洗脫一個半小時，如果是磷酸，可以直接用有機相洗脫，半小時就可以了，柱子最後需要保存在純甲醇或者乙腈中，有可能有一些我不知道的柱子要保存在其他相中。整個流程就這些了

❹ 那些HPLC色譜柱可以用純水

你問的應該是反相色譜柱，因為凝膠過濾用純水相是司空見慣的。
Agilent的Bonus系列，Aichorm的Aqua系列，都是回可以做純水答相的。
但你如果只是考慮梯度起點的高水相比例，那就不必了，普通的C18、C8都可以用純水相短時間沖洗，不超過10個柱體積，是沒什麼問題的。

❺ 微孔濾膜分有機系,水系是什麼意思

1、微孔濾膜水系：聚丙烯性質穩定，耐各種溶劑。你所謂的水系/有機系，應該是根據濾膜的材質分的，分別適用於過濾水溶液（生命科學適用），和有機溶液（化學適用）。

所謂有機系，用來過濾水溶液應該也沒什麼問題，但是反過來水系的則可能會被有機溶劑溶解，不適用於有機體系的過濾。

2、微孔濾膜有機系：syringe filter結構為兩部分，housing和membrane，可以分別由不同材質構成，通常housing是聚丙烯pp，或者nylon 聚醯胺。

1) 親水性樣品：選用親水膜片，對水有親和力，適合過濾水為基質的溶液。可用的濾膜有：混合纖維素酯、聚醚碸（PES）Nylon等。

2) 強腐蝕性有機溶劑：一般採用PTFE、聚丙烯（PP）等材質的濾膜。

3) 蛋白溶液：選擇低蛋白吸附的濾膜，如PVDF濾膜。

4) 離子色譜：通常認為PES濾膜比較適合低無機離子的溶液的過濾。

(5)梯度純水相有機相擴展閱讀：

平板薄紙型濾膜(Flat Sheet Membrane) 、中空纖維型濾膜(Hollow Fiber Membrane) 和管狀型濾膜(Tubular Membrane)。

其中，平板薄紙型濾膜又依其結構差異，可再細分為「無支撐物之平板薄紙型濾膜」(Unsupported)與「有支撐之平板薄紙型濾膜」(Supported)兩種。根據兩者製造所需科技的要求，「無支撐物之平板薄紙型濾膜」比「有支撐物之平板薄紙型濾膜」的生產工藝更為精密與復雜。

微孔過濾乃篩分過程，屬於精密過濾。微孔精密過濾是指濾除0.1μm至10μm 微粒的過濾技術，一般而言，過濾機理分表面型與深層型兩類。微孔過濾乃篩分過程，屬於精密過濾。經由高級技術製造的MF膜其過濾機理為表面型過濾。

因過濾孔徑固定，故可確保過濾的精度與可靠度。深層過濾又分非固定不規則孔徑與固定不規則孔徑，前者如化纖繞線型濾芯，一般只作為比較粗糙的預過濾。

❻ 高效液相色譜，流動相抽濾時，什麼時候用有機系濾膜，什麼時候用水系濾膜

過市場出售的水系膜是混合纖維素濾膜或者醋酸纖維素濾膜,
有機系濾膜一般是PVDF(聚偏氟乙烯濾膜)和PTFE(聚四氟乙烯濾膜).
用有機系濾膜是可以濾不含有機相的水或鹽溶液的，只是速度較慢，還是建議水膜過濾。當然有機系濾膜也可以過濾水和有機相混合的流動相。
但是纖維素濾膜是會被有機相溶解的，有機相比例高的時候你會發現膜被溶解。有機相比例低的時候你看不到溶解，但是也不證明膜沒有損失，這些損失導致的後果就是流動相被溶解的膜污染以及膜孔的擴大導致的過濾效果變差。
不要為了有機系和水系濾膜的差價而放棄試驗的嚴謹性。
我的結論就是：含有有機相的流動相，即便比例低也不要用水膜過濾。除非你買特殊材質的混合濾膜，說明書上說明都可以過濾的就行。
也別再追求什麼比例了，那些都是自欺欺人，既然叫做水膜，就不能用於有機相。

❼ hplc分析中A液B液分別是做什麼的

請問你指的是流動相吧？一般在文章中或實驗報告中提到A、B，分別是兩種流動相。通常情況下，A和B一個是水相、一個是有機相。水相一般是純水或稀酸（如0.2%醋酸、0.1%磷酸等），有機相一般是甲醇或乙腈。

❽ 液相小白求助：做塑化劑，走梯度，基線抬高怎麼辦

你的梯度方法寫得不清楚。
應該是：
保留時間（min） 乙腈比例（%）
0 75
XXX XXX

第一，其實梯度基線波動很正常很正常的。因為你有機相變了，你可以監控一下壓力，肯定在流動相變化時壓力也變了。所以基線是會有變動的。
第二，你的基線波動沒有影響到你色譜峰的積分。保留時間1.3min的色譜峰和2.6min的色譜峰都是在基線平穩處出峰的不是嗎？那麼就沒有必要糾結基線波動的問題了呀。它又沒礙著你，波動就波動吧。
第三，如果實在不符合要求或者影響美觀，可以考慮換流動相。還是水，還是乙腈，但是需要換廠家。你的水是不是高純水？實在不行最好的水是屈臣氏的純凈水，跑液相平平的。乙腈的影響特別大。如果跑梯度一定不要用國產的乙腈。進口的色譜純乙腈跑出來效果要比國產的好很多。比如Fisher的。條件允許換個好點牌子的有機相。

❾ 液相梯度走的緩一些，怎樣設置

是希望走緩一點兒嗎？
一個是 水，最好是純度很高的純凈水。如果是外面買的，起碼是娃哈哈純凈水，最好用屈臣氏的綠色瓶子的那種。如果是自製的也最好是一級水。
一個是有機相，梯度的時候就不要隨便了，最好用國外進口的有機相。跑出來效果會好一些。比如Fisher的什麼的。
一個是鹽。這個可能沒辦法，實驗室也只有分析純的鹽了。不過要多過濾幾次。

另外有些時候梯度就是波動大，比如有機相變化非常大的時候。這個是不好調解的。
另外都是緩沖液的時候醋酸鹽比磷酸鹽波動也要大很多。這個就看你的實驗需要了。
當然，低波長的時候波動范圍也會大一些。如果方法是固定的，那麼這些都是不能改變的了。

❿ 流動相抽濾膜有機與水系怎麼辨別

沒什麼特別大的區別，外觀一致。
實際抽濾一下吧，用一點純甲醇，水膜瞬間化掉，有機膜完好。
如果兩個同時抽濾純水相，水膜過濾速度會快一些。