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测蛋白蒸馏

发布时间:2020-12-15 19:15:30

Ⅰ 凯氏定氮法测定蛋白质,蒸馏液加入过量的氢氧化钠后呈色

绿色
因为所用混合指示剂在碱性溶液中呈绿色,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈红色。如果没有溴甲酚绿,可单独使用0.1%甲基红乙醇溶液。

Ⅱ 蛋白质测定时,样品经消化蒸馏之前为什么要加入氢氧化钠加入量对测定结果有何影响

1加入氢氧化钠是因为氢氧化钠和硫酸铵在加热条件下生成氨气溢出。
2加入量需要过量回,估计样品氮含量,计答算所需量,加入量最少超过所需量,还要中和消解过程中未分解的硫酸一般是1.5倍+消解时加入的硫酸量
3溶液颜色变化,如果本来是澄清溶液,此后会变黑、褐灰等颜色
4颜色变化是铜离子的存在的原因,变黑是铜离子和氢氧根离子变成氢氧化铜。不稳定生成氧化铜(黑色)所致
5如果没有变化,是加人氢氧化钠量不够所致
以上内容又本人经验所得,没有参考任何文献,希望对楼主有所帮助!

Ⅲ 蛋白质测定实验蛋白质蒸馏过程中为什么要进行冷凝

使水液化,便于收集

Ⅳ 测饲料蛋白蒸馏时2%硼酸加甲基红溴甲酚绿混合指示剂后变什么颜色

是不是指示剂的问题,或者是因为滴定三角瓶未洗干净

Ⅳ 用凯氏定氮仪蒸馏测蛋白时,加入碱之后为什么不变黑而是变成深蓝色求解!急需!

那是你加入的加速剂的和碱反应生成的沉淀的,是正常的

Ⅵ 采用蒸馏法测定蛋白质中n量,产生的氨气用什么吸收

采用蒸馏法测定蛋白质中n量,产生的氨气吸收方法主要有两种,如下:
第一种回是将氨气通答到饱和食盐水即饱和NaCl溶液中,这比直接通入水里吸收效果要好,因为氨气在饱和食盐水里的溶解度比在水要高,这是利用氨气易溶于水,即氨气物理方面的性质;
第二种方法是将氨气通入到装有氯化钙的“U”型管或干燥管里,这是利用到氨气可以和氯化钙反应生成八氨氯化钙的性质,即氨气化学方面的性质,因此在干燥氨气时不能用氯化钙做干燥剂,原因就在此.

Ⅶ 凯氏定氮法测定蛋白质含量蒸馏时为什么要加入氢氧化钠溶液

加入氢氧化钠中和硫酸,使溶液呈碱性,才能放出氨.混合指示剂在碱性溶液中呈绿色,可能有氢氧化铜沉淀.还应该有气泡.不变化就要补加氢氧化钠

Ⅷ 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量实验中,使用的水一定是蒸馏水吗为什么

考马斯亮蓝法测定蛋白质含量实验中,使用的水最低要求是蒸馏水,更高精度要求可能会使用双蒸水。

因为Bradford检测中要用的试剂配制,标准曲线的制作都要用到水。如果不是使用蒸馏水,可能水里面会有一些游离的离子或者电解质,会影响试剂配制的准确性,干扰实验结果。而水中残留的有机物等可能会和考马斯亮蓝发生变色反应,这样制作的标准曲线会比实际值偏高,导致最终浓度检测的结果比实际结果偏低。

Ⅸ 国际的测量法,测蛋白质

蛋白质测定的国标规定方法——凯氏定氮法介绍
食品中蛋白质的测定方法

本标准适用于各类食品中蛋白质的测定。
1原理
蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量。
2试剂
所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。
2.1硫酸铜。
2.2硫酸钾。
2.3硫酸。
2.42%硼酸溶液。
2.5混合指示液:1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。
2.640%氢氧化钠溶液。
2.70.05N硫酸标准溶液或0.05N盐酸标准溶液。
3仪器
定氮蒸馏装置:如图所示。
(图略)
4操作方法
4.1样品处理:精密称取0.2~2.0g固体样品或2~5g半固体样品或吸取10~20ml液体样品(约相当氮30~40mg),移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中,加入0.2g硫酸铜,3g硫酸钾及20ml硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热0.5h。取下放冷,小心加20ml水。放冷后,移入100ml容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。
4.2按图装好定氮装置,于水蒸气发生瓶内装水至约2/3处,加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入数粒玻璃珠以防暴沸,用调压器控制,加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。
4.3向接收瓶内加入10ml2%硼酸溶液及混合指示液1滴,并使冷凝管的下端插入液面下,吸取10.0ml样品消化稀释液由小玻杯流入反应室,并以10ml水洗涤小烧杯使流入反应室内,塞紧小玻杯的棒状玻塞。将10ml40%氢氧化钠溶液倒入小玻杯,提起玻塞使其缓缓流入反应室,立即将玻塞盖紧,并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹,开始蒸馏。蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内,蒸馏5min。移动接受瓶,使冷凝管下端离开液面,再蒸馏1min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶,以0.05N硫酸或0.05N盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。
同时吸取10.0ml试剂空白消化液按4.3操作。
4.4计算

式中:X——样品中蛋白质的含量,%;
V1——样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积,ml;
V2——试剂空白消耗硫酸或盐酸标准液的体积,ml;
N——硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度;
0.014——1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数;
m——样品的质量(体积),g(ml);
F——氮换算为蛋白质的系数。蛋白质中的氮含量一般为15~17.6%,按16%计算乘以6.25即为蛋白质,乳制品为6.38,面粉为5.70,玉米、高粱为6.24,花生为5.46,米为5.95,大豆及其制品为5.71,肉与肉制品为6.25,大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83,芝麻、向日葵为5.30。

记得采纳我的答案哦,祝你学习进步

Ⅹ 凯氏定氮法测定蛋白质时,若在蒸馏过程中,吸收液始终未变为蓝绿色,为什么

蒸馏液中忘加氢氧化钠了吧

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