全蒸馏凯氏定氮

A. 有谁知道凯氏定氮的具体步骤，注意事项，！！

1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右，放入干燥的250 ml消化管中，加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化，待泡沫停止后提高温度到450'C，加热至液体沸腾，待瓶内液体呈蓝绿色透明后，再继续加热0.5h。

冷却后加入20ml水，移入100ml容量瓶中，用少量水洗涤消化管2~3次，洗液合并于容量瓶中定容。

2、蒸馏:连接凯氏定氮装置，于水蒸气发生瓶内装水至2/3处，加甲基红指示剂数滴及数ml硫酸，保持水呈酸性。加入数粒玻璃珠以防暴沸，调节火力加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。

3、向吸收瓶内加入20g/L硼酸溶液20ml及混合指示剂2滴，并使冷凝管下端插入液面以下，吸取10ml样品消化稀释液由进样口进入反应室，并以10ml水洗涤进样口使其流入反应室内，将400g/L NaOH溶液10ml倒入进样口，立即夹紧螺旋夹，并加入少量蒸馏水，密封进样口。

当蒸汽通入反应室时，准确计时，反应产生的氨气通过冷凝管进入吸收瓶，蒸馏5min，移动吸收瓶，使冷凝管下端离开液面，再蒸馏Imin，然后用少量水冲洗冷凝管下端外部，取下吸收瓶。

停止加热，使反应室内的液体进入汽水分离器，打开进样口的螺旋夹，将汽水分离器的液体放出。再向反应室内加入蒸馏水，夹紧螺旋夹，再次进行加热至水蒸汽放出，停止加热，使反应室内的水进入汽水分离器，进行洗涤。

4、滴定:用0.025mol/L硫酸标准溶液滴定吸收液至灰色。

5、计算:X= 2cVX 14X5.71/m

X为样品中蛋白质的含量，%；c为硫酸标准溶液的浓度，molL；V为样品消化液消耗硫酸标准溶液的体积，ml；m为样品的质量，g。

注意事项

(1) 样品应是均匀的。固体样品应预先研细混匀，液体样品应振摇或搅拌均匀。

(2) 样品放入定氮瓶内时，不要沾附颈上。万-沾附可用少量水冲下，以免被检样消化不完全，结果偏低。

(3) 消化时如不容易呈透明溶液，可将定氮瓶放冷后，慢慢加入30%过氧化氢(H2O2)2-3ml，促使氧化。

(4) 在整个消化过程中，不要用强火。保持和缓的沸腾，使火力集中在凯氏瓶底部，以免附在壁上的蛋白质在无硫酸存在的情况下，使氮有损失。

(5)如硫酸缺少， 过多的硫酸钾会引起氨的损失，这样会形成硫酸氢钾，而不与氨作用。因此，当硫酸过多的被消耗或样品中脂肪含量过高时，要增加硫酸的量。

(6)加入硫酸钾的作用为增加溶液的沸点，硫酸铜为催化剂，硫酸铜在蒸馏时作碱性反应的指示剂。

(7)混合指示剂在碱性溶液中呈绿色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈红色。如果没有溴甲酚绿，可单独使用0.1%甲基红乙醇溶液。

(8) 氨是否完全蒸馏出来，可用PH试纸试馏出液是否为碱性。

(1)全蒸馏凯氏定氮扩展阅读：

凯氏定氮法原理

凯氏定氮法首先将含氮有机物与浓硫酸共热，经一系列的分解、碳化和氧化还原反应等复杂过程，最后有机氮转变为无机氮硫酸铵，这一过程 称为有机物的消化。

为了加速和完全有机物质的分解，缩短消化时间，在消化时通常加入硫酸钾、硫酸铜、氧化汞、过氧化氢等试剂，加入硫酸钾可以提高消化液的沸点而加快有机物分解，除硫酸钾外，也可以加入硫酸钠、氯化钾等盐类类提高沸点，但效果不如硫酸钾。

硫酸铜起催化剂的作用。凯氏定氮法中可用的催化剂种类很多，除硫酸铜外，还有氧化汞、汞、硒粉、钼酸钠等，但考虑到效果、价格及环境污染等多种因素，应用最广泛的是硫酸铜。

B. 全自动凯氏定氮仪技术参数

全自动凯氏定氮仪SPD80A技术参数详解

SPD80A型全自动凯氏定氮仪凭借其先进的设计，具备一系列高效功能。其全自动操作流程包括加酸、加碱、蒸馏、滴定、结果计算和打印，配备中文超大液晶屏幕，显示清晰直观。滴定精度可达1ul/步，且能自动调整蒸汽量以适应冷却水状况，滴定杯还具备自动排液和清洗功能。

内置10个国际标准程序和30个用户自定义程序，确保了灵活性。多重安全保护措施，如冷却水停水、蒸馏器缺水、安全门和试管位置检查等，为操作者提供可靠保障。其技术参数如下：

• 检测范围：0.1~200mgN


• 滴定精度：1 ul/步


• 回收率：≥99.5%


• 重复率：≤0.5%


• 终点判断：标准颜色判定法


• 蒸馏速度：3-7min/样品


• 存储容量：1000组数据


• 样品量：5g, 15ml


• 水压：0.15Mpa


• 冷却水用量：0.5-1L/min


• 功率：1600W


• 外形尺寸：450×400×650mm


• 重量：26Kg

配套使用的SPT20快速红外高温消解炉具有高效加热和精确温度控制，能同时处理20个样品，最高可达650℃。温度传感器灵敏度高，确保恒温效果，温度波动小于1℃。消解炉还配备废气排放装置，确保操作安全和环境友好。

• 消解炉温度范围：室温~650℃


• 升温速率：25~40℃/min


• 稳定性：±1℃


• 供电：220V, 50HZ


• 样品量：5g, 15ml


• 功率：2500W


• 重量：20Kg

C. 全自动凯氏定氮仪做一个样要多久

只的是时间还是其他？凯氏定氮的过程分为三步，消化、蒸馏和滴定。你问的问题有些笼统，所以比较难以回答确切。
1、消化时间按照相应国标操作即可，不同的样品时间也不尽相同。
2、消化以后，进入蒸馏和滴定环节的话，如果是全自动定氮仪，两步都是由机器自动完成的，时间在4——8分钟不等。
3、部分厂家也成为为“全自动”，但是仅仅限于加酸、加碱、加水和蒸馏这些步骤，最后结果不自动计算，这样的话，时间会更长，需要人工滴定或者滴定仪滴定。

D. 凯氏定氮法的蒸馏开始后指示剂颜色如何变化

凯氏定氮法蒸馏开始后，指示剂的颜色会发生变化。在凯氏定氮法中，通常使用甲基红-溴甲酚绿混合指示剂来指示蒸馏过程。
在蒸馏开始后，吸收液的颜色会经历以下变化：
1. 淡红色：在蒸馏开始前，指示剂呈现淡红色。这是因为在蒸馏前，溶液中含有一定量的氨态氮，而指示剂在这个浓度范围内呈现淡红色。
2. 蓝绿色：随着蒸馏过程的进行，吸收液中的氨态氮逐渐被碱液吸收，溶液中的酸碱度发生变化，指示剂的颜色也开始变化。当酸碱度达到一定值时，指示剂会呈现蓝绿色。
3. 紫红色：当蒸馏过程接近结束时，吸收液中的氨态氮已经大部分被吸收，溶液的酸碱度进一步升高，指示剂的颜色会进一步变化为紫红色。
通过观察指示剂颜色的变化，可以判断蒸馏过程是否已经完成，以及是否需要停止蒸馏。

E. 凯氏定氮法的实验原理

一、实验原理
蛋白质是含氮的有机化合物。蛋白质与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液 滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，蛋白质含量。含氮量*6.25=蛋白含量
1.有机物中的胺根在强热和CuSO4，浓H2SO4 作用下，硝化生成（NH4）2SO4

凯氏定氮法
凯氏定氮法反应式为：
2NH2+H2SO4+2H=(NH4)2SO4 （其中CuSO4做催化剂）
2.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3 ，收集于H3BO3 溶液中反应式为:
(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4

2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O

3. 用已知浓度的H2SO4（或HCI）标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量

反应式为：

(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3

(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3


二、操作
1、 样品处理：精密称取0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20ml液体样品（约相当氮30-40mg），移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中，加入0.2g硫酸铜，6g硫酸钾及20毫升硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45度角斜支于有小孔的石棉网上，小火加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5小时。取下放冷，小心加20ml水，放冷后，移入100ml容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸同一方法做试剂空白试验。但是此法比较危险，不易在实验室演示，现在大多数实验室有消煮仪一次可以进行多个（一次可以消煮16个样品）样品处理，并有通风橱进行通风，温度可以自己设定，更加安全和可操作性，因此逐步成为主要的凯氏定氮法的首选处理方法。
一般消解温度都设在240度及240度以上，如果想快速消解可以适当提高温度甚至可以用最大温度进行消解。
2、按图装好定氮装置，于水蒸气发生器内装水约2/3处加甲基红 指示剂数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠以防暴沸，用调压器控制，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。
3、向接收瓶内加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示剂1滴，并使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml样品消化液由小玻璃杯流入反应室，并以10ml水洗涤小烧杯使流入反应室内，塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞。将10ml 40%氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其缓慢流入反应室，不能立即将玻璃盖塞紧，这样易使玻璃塞粘在进样口，应先用蒸馏水冲洗然后再盖，并加水于小玻璃杯以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏，蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内，蒸馏5min。移动接收瓶，使冷凝管下端离开液皿，再蒸馏1min，然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以0.05N硫酸或0.05N盐酸标准溶液定至灰色或蓝紫色为终点。
同时吸取10.0ml试剂空白消化液按3操作。

三、计算
X =(（V1-V2）*N*0.014)/( m*（10/100）) *F*100%
X：样品中蛋白质的百分含量，g；
V1：样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积，ml；
V2：试剂空白消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积，ml；
N：硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度；
0.014：1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数；
m：样品的质量（体积），g（ml）；
F：氮换算为蛋白质的系数 。蛋白质中的氮含量一般为15～17.6%，按16%计算乘以6.25即为蛋白质，乳制品为6.38，面粉为5.70，玉米、高粱为6.24，花生为5.46，米为5.95，大豆及其制品为5.71，肉与肉制品为6.25，大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83，芝麻、向日葵为 5.30。

F. 凯氏定氮法,蒸汽发生器中盛有酸化的蒸馏水,为什么

因为氮仪即凯式定氮仪、又叫蛋白质测定仪、是依据经典(凯氏定氮)方法设计的自动测氮蒸馏系统。目前国际国内的凯式定氮仪的工作原理大同小异都是依据凯式定氮法测氮的、主要区别就是他们的自动化程度和工艺的先进程度了、因此凯式定氮仪动化一般是按照自动化程度分为手动定氮仪、半自动定氮仪和全自动定氮仪(也有的分为半自动定氮仪、自动定氮仪、全自动定氮仪，都是一样的)、手动定氮仪顾名思义就是靠手动操作的、只不过是把以前做实验的瓶瓶罐罐集中到一台仪器上了、使劳动效率和工作的安全系数提高了很多、也节省了大量的劳动时间、半自动定氮仪可以自动加碱自动蒸馏自动回收液体比手动更方便了一点、也更安全了、毕竟避免了碱接触

G. 全自动凯氏定氮仪哪个品牌最好

上海祎鸿NKY6100系列，颜色法判断终点。采用进口光学传感器，自适应白平衡处理，数字信号输出，独立颜色处理芯片，具有较强的抗干扰能力。

H. 凯氏定氮仪使用方法

首先凯氏定氮仪分为两大类：1、半自动凯氏定氮仪 2、全自动凯氏定氮仪
凯氏定氮仪整个试验流程分三步，1、消解 2、蒸馏 3、滴定。

先说消解这个步骤根据不同的样品有不同的消解办法，关键的两点是催化剂的配比，温度段的设置。（消解仪消解样品是凯氏定氮仪的前期处理阶段。是配合全自动和半自动定氮仪的一款消解设备）
接下来祎鸿说半自动凯氏定氮仪，消解完成后，开始蒸馏。根据供应商厂家的不同操作方法略微有些不一样的。但大致方法差不多，1、根据要求配置酸碱、蒸馏水、稀释液 2、看说明书，接通管路 3、开机清洗管路
4、做空白（可以先做硫酸铵） 5、手动滴定
最后祎鸿说全自动凯氏定氮仪，所有操作步骤跟以上雷同（除第5手动滴定外）。全自动是自己出报告，边蒸馏边滴定的。