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蒜苗用蒸馏水培养生长情况

发布时间:2025-01-01 22:34:42

A. 小实验用蒸馏水种蒜两周能长多长

1天蒜瓣浸润
2天吸水略膨大
3-6天蒜瓣吸水膨大、有根芽小突起
5-7天芽坯顶出蒜瓣、根芽突出
8-10蒜苗顶出芽坯、根须猛长
11-14天蒜苗的两片叶片微微张开迎接阳光,根须增多,整个蒜苗程茁壮成长态势
在适合的温度湿度条件,15天左右就能发芽,长叶。

B. 豆芽造句-用豆芽造句

1、豆子都裂开一个缝了,缝中悄悄伸出一条白色的 豆芽 。外公说这是它的根,我看着这几个穿着绿衣裳的娃娃,我越看越喜爱。

2、瞧!那一朵粉红色的菊花昂首挺胸, 豆芽 似的花瓣紧紧簇拥在一起,远远望去,既像一个小绒球,又像一个大家族围坐在一起商议什么事情。

3、那一朵粉红色的万寿菊昂首挺胸, 豆芽 似的花瓣紧紧簇拥在一起,远远望去,既像一个小绒球,又像一个大家族围坐在一起商议什么事情。

4、咦!我惊奇的发现一颗白白嫩嫩的 豆芽 已经拔地而起,在豆芽的顶端还长有一对均匀对称的豆芽。于是我就端来一点水顺势倒下去,这时,我发现对称的叶子已经不再对称了,它已经开发了。

5、过了几天,小 豆芽 慢慢地长大,有两厘米长了。当我冲洗豆芽时,发现一根豆芽已经钻进了布里。原来,经过奋力向上,它长进了布里,而且完全嵌了进去。豆芽的生命力真强呀。

6、瞧!那一朵粉红色的菊花昂首挺胸, 豆芽 似的花瓣紧紧簇拥在一起,远远望去,既像一个小绒球,又像一个大家族围坐在一起商议什么事情。再瞧那儿,一簇簇菊花堆在一起,在听秋风老师为她们讲故事呢!

7、 豆芽 渐渐地长出了长长的茎。有的豆芽弯得像一个鱼钩,有的直得像一根木棍。豆芽已经发好啦,我真是开心啊。

8、 豆芽 长一房高,也是菜货。民谚

9、芋艿化痰消郁结,蘑菇能抑癌细胞;海带含碘治水肿, 豆芽 不让血脂高;芦根消热助润肺,甘蔗解酒除烦恼;饮食保健常做到,祝你天天乐陶陶!

10、情人变成老婆,钻戒变成顶针,玫瑰变成 豆芽 菜,巧克力变成白面包,烛光晚餐变成外卖,甜言蜜语变成家长里短,岁月变迁对你爱不变。情人节快乐!

11、情人变成老婆,钻戒变成顶针,玫瑰变成 豆芽 菜,巧克力变成面包,烛光晚餐变成外卖,甜言蜜语变成家长里短,岁月变迁,爱老婆不可变。情人节快乐。

12、以Q的姿态站立, 豆芽 菜形态的腿部造型加上菱形方格的细碎纹样,更显明眸皓齿的机灵乖巧。

13、将菜码、炸酱拌面条而成。将黄瓜、香椿、 豆芽 、青豆、黄豆切好或煮好,做好菜码备用。

14、把已放凉鸡丝和 豆芽 混合后雪冻约两小时,食用前洒上芝麻即可。

15、“来源是 豆芽 。”德国疫病防控中心负责人莱因哈特?伯格说。

16、炒大 豆芽 不要太猛火,中火炒能够留住芽菜里的水分。

17、过了两三天,黄豆宝宝长出了小尾巴,像小蝌蚪一样。又过几天,小尾巴越长越长,我看到这些 豆芽 ,高兴地跳起来喊道:“豆芽长出来了!豆芽长出来了!”。

18、我今年7岁了,瘦高个儿,眉清目秀,就是脸有点黄,同学们都说我像个“绿 豆芽 ”。

19、青草从根的地方起都是发黑的浓绿色,草尖在太阳底下闪着光芒。一棵青草不到十厘米,长得很脆弱,就像菜市场里的 豆芽 菜一样,一捏就断。小草长得到处都是,有马尾草、羽茅草、网纹草……

20、早上醒来,我突然想起今天没淋水,连忙奔向厨房。我掀开布, 豆芽 已经长有3寸高了。细细的根上顶有2片叶片,并且根已经穿过了纸巾与器皿。它看着我,仿佛冲着我笑呢!

21、盛开的樱花一般都是五个瓣,中间有长长的花蕊,花蕊一般都有九到十根,象漂亮的黄 豆芽 。未开的樱花小宝宝,就象一个个快要爆炸的气球,看起来可爱极了。

22、今天,我来到它们旁边,发现它长的胖乎乎的,高高的,都变成了一个 豆芽 了,两旁的豆子都掉了,只剩下豆叶和根了。

23、我想,天才大半是天生的;独有这培养天才的泥土,似乎大家都可以做。做土的功效,比要求天才还近切;否则,纵有成百成千的天才,也因为没有泥土,不能发达,就像一碟子绿 豆芽

24、立春到,护肝养阳饮食提醒你:多吃萝卜少吃辣,葱姜胡椒做调味;韭菜春饼效果好, 豆芽 滋润也不错;酸味食物来收敛,以防肝气的疏泄。愿你健康!

25、立冬到,吃饺子,暖暖呼呼一整年!滋补吃肉馅:如牛肉、鸡肉、羊肉、虾等,温热益补,御寒效果好。怕冷吃菜馅:如大白菜、萝卜、韭菜、油菜、 豆芽 等,补充维生素,促进消化不上火。愿你冬日温暖又健康。

26、灵魂是种子,它可以在知识之水的浇淋下长成参天大树,也可以在知识之水的浸泡下发成一颗绿 豆芽

27、春眠不觉晓~~亲们都开始犯“春困”了吗?七招教你赶走“春困”:1、保护肝胆最重要;2、进行“身体大扫除”(吃饭七分饱等);3、多吃 豆芽 ;4、做伸展运动;5、补B族维生素;6、到户外和大地“共振”;7、更加重视给身体排毒。

28、早晨喝一杯三鹿氰胺牛奶、两个染色馒头、加一根瘦肉精火腿肠、切一个苏丹红咸蛋;中午买避孕药喂的鱼、毒 豆芽 、膨大西瓜,回到豆腐渣房中,开一瓶甲醇勾兑酒、吃一串加了泻立停的麻辣烫,饭后抽一支高红烟、看本盗版小说,再用装了盗版软件的电脑上网;晚上钻进了黑心棉被窝,一天就这样过去了。逐没

29、看看所有这些饿的要死的男模吧,他们没有工作,只因为人们爱这个小 豆芽 菜爱到想把他含在嘴里。

30、德国卫生局关闭了下萨克森的一农场,因为怀疑该农场的蔬菜 豆芽 是最近爆发的大肠埃希菌的源头。

31、万物萌生正新春,调养五脏养身心。五行对照春属木,此时养肝最对路。韭菜 豆芽 和红枣,菠菜枸杞益肝好,适度小锻炼健康保。一年养生在于春,愿您养成长寿星。

32、水煮鱼中的配菜单一,除了鱼肉,蔬菜常只有 豆芽 一种。

33、秋天必吃七种菜:莲藕增强免疫力,菠菜预防口角炎,补脾健胃胡萝卜,消除疲劳食 豆芽 ,芹菜促消增食欲,益心强肾小白菜,莴笋平喘润燥多。愿你健康!

34、1,冬瓜:皮肤白净。2,胡萝卜:能润泽肌肤。3,芦笋:能抗衰老和防治各种与脂肪过度氧化有关的疾病。4,甘薯:减少皮下脂肪,有助于护肤美容。5,蘑菇:能防老抗衰。6, 豆芽 :防止黑斑。7,黄瓜:养颜圣品。8,丝瓜:能润滑皮肤,防止皮肤产生皱纹。

35、欧芹汁;甘蓝汁,菠菜汁,小麦草汁,布鲁塞尔 豆芽 汁,芦笋汁,椰菜汁,花椰菜汁,甜菜汁,胡萝卜汁,卷心菜汁,蒜汁。

36、惊蛰来到肝气旺,养生切忌动“肝”戈,心胸开阔畅情致,戒怒制郁消肝火,饮食清淡补蛋白,鸭血 豆芽 多吃点,充足睡眠莫劳累,规律运动促循环。温馨关怀已送到,快乐安康都围绕!

37、绿 豆芽 :含磷、铁、大量水分,可防止脂肪在皮下形成.

38、14种春季可能引起死亡的常见食物,食用时可得小心哟!变质发黄的银耳,变色的紫菜,无根的 豆芽 ,腐烂的生姜,长斑的红薯,腐烂的白菜,发霉的茶叶,未腌透的咸菜,发芽的绿土豆,变质的棕色芯甘蔗,新鲜蚕豆,新鲜黄花菜,青西红柿。

39、单身是香菜,恋爱是芹菜,分手是白菜,结婚是生菜,离婚是酸菜,再婚是剩菜,没有情人是 豆芽 菜,情人多了是花菜……你是什么菜?

40、绿 豆芽 所含的热量很低,但富含纤维,更是暑天餐桌上的常见菜。

41、15-25岁:多吃白菜、 豆芽 、瘦肉、豆类食品等,使皮肤红润有弹性;25-30岁:多吃富含维C维B的食物,如胡萝卜等;30岁-40岁:多吃瓜果,多补充胶原蛋白;40-50岁:多吃补气养血、延缓皮肤衰老的食品,如玉米、红薯、柠檬等。

42、情人变成老婆,钻戒变成顶针,玫瑰变成 豆芽 菜,巧克力变成面包,烛光晚餐变成外卖,甜言蜜语变成家长里短,岁月变迁,爱老婆不可变。预祝情人节快乐!

43、有点辣,但仍然相当美味, 豆芽 水煮鱼味道好极了.

44、汤中的主原料为绿 豆芽 、生姜、番茄和椰子汁。

45、单身是香菜,恋爱是芹菜;分手是白菜,结婚是生菜;离婚是酸菜,再婚是剩菜;没情人是 豆芽 菜,情人多了是花菜。喜欢什么菜自己选,可千万不要去偷菜!

46、采用建立的方法测定了黄豆、 豆芽 、蚕豆、腐竹、豆腐、豆浆、豆奶粉、奶粉等样品中大豆异黄酮含量,测定结果令人满意。

47、立春养生三要点,时刻装在心里面,乍暖还寒要春捂,党参枸杞汤里煲,粥类饮食养脾胃,山药大枣都是宝,戒怒护肝心情爽,芹菜 豆芽 多补给。温馨关怀送给你,快乐安康都聚齐!

48、 豆芽 棚滑坡系太白岩崩滑体部分复活的产物。

49、立春养生,健康咬春,白菜青椒,阳气生发,春饼馅料,鸡蛋 豆芽 ,粳米煮粥,帮助消化,萝卜丝饼,强健脾胃,虾仁韭菜,补肾首选,乌发明目,常食猪肝,关怀送上,安康相伴!

50、这是因为 豆芽 中含有大量的抗酸性物质,可起到很好的防老化功能。

51、第一招:排毒喝花茶,给肠胃减负。第二招:晨练拉拉筋。进行户外锻炼,踏青旅游。第三招:春吃酸甜口。多吃酸甜口味的水果,有助平衡体质。第四招:多吃芽类蔬菜。比如, 豆芽 、豆苗、春笋、蒜苗等。第五招:保持灿烂心情。

52、蔬菜汤香菇泡软切半、黄 豆芽 去尾、葫萝卜切丁备用,起油锅将所有材料加入拌炒,再放入2碗水及素食高汤煮沸即可起锅。

53、有机麦苗,有机胶洋槐,改性纤维素,二氧化硅,葵花子油,纳 豆芽 孢杆菌中提取。

54、春分宜养生,吃对最重要,多吃时令菜, 豆芽 和蒜苗,滋养肝肺果,樱桃草莓杏,周末两顿饭,肠胃减负担,菊花茶常饮,去火功效显,关怀已送到,愿你身体棒!

55、文摘:无土、无营养、无光照情况下,在烧杯内用蒸馏水培育 豆芽 .

56、1、白萝卜:抑制黑色素,防止脂褐质沉积。2、豌豆:润泽皮肤。3、蘑菇:防老抗衰。4、丝瓜:防止皱纹。5、 豆芽 :防止雀斑、黑斑。6、黄瓜:清洁美白肌肤,消除晒伤和雀斑,缓解皮肤过敏。

57、我试了试泡菜这道名菜是用 豆芽 、海藻和芜箐甘蓝等所做成。

58、普通炒饭配料: 豆芽 、叉烧、蟹肉、香肠.

59、春季容易肝火旺,三种蔬菜巧降火;肝气疏通 豆芽 菜,肉片一起煲汤佳;养阳最佳是韭菜,猪血同煮营养妙;菠菜排毒利肠胃,榨汁凉拌两相宜。愿快乐安康!

60、将 豆芽 菜及五香豆腐乾放入沸水中略为川烫,沥乾.

61、你什么时候见到 豆芽 菜能吃成胖大海?乐小米

62、这道由西贡流传而来的牛肉汤中有进口薄牛肉片、牛肉球和 豆芽 。配有泰式宽河粉。

63、微微,萌芽要光合作用,不见光的是 豆芽 。顾漫

64、西班牙的黄瓜、西红柿、德国的 豆芽 和埃及的葫芦巴种子都曾被认为是最初的感染源,但最后均未得到确认。

65、①保护肝胆:少吃油炸食品,常吃坚果;②进行身体大扫除:禁烟,少食用糖和咖啡;③多吃 豆芽 :有助补充维生素、矿物质、氨基酸等营养物质;④做伸展运动:年轻人最好做瑜伽,老人可以练气功;⑤补充B族维生素:镇定神经系统;⑥多进行户外运动:放松精神,减轻压力。

66、春季养生有门道,分享给你请记牢;多吃时令春之芽,香椿 豆芽 和蒜苗;菠菜解毒防春燥,沸水烫软捞出炒;温补脾胃有糯米,做成糕点味美妙。愿快乐安康!

67、无土、无营养、无光照情况下,在烧杯内用蒸馏水培育 豆芽 .

68、凉皮吃时放入面筋、 豆芽 、黄瓜丝等,然后泼上辣子油、酱油、醋、蒜汁等各种调料,拌匀即可食用。

69、另外一种叫做banhxeo,类似法式薄饼,用米粉和椰奶面糊制成的面饼,裹上猪肉馅,虾仁和 豆芽 ,下面铺上一些新鲜的生菜,薄荷叶和罗勒,配以辣椒蘸酱。

70、春分时节来“吃春”。养脾佳品大红枣,补中益气有蜂蜜,时令食物春之芽( 豆芽 、蒜苗等),尝鲜无不道春笋,菠菜解毒防春燥,葱蒜杀菌助春阳。

71、第一招:排毒喝花茶,给肠胃减负;第二招:进行户外锻炼,踏青旅游;第三招:多吃酸甜口味的水果,有助平衡体质;第四招:多吃 豆芽 、豆苗等芽类蔬菜,营养丰富,易于消化;第五招:多和朋友联系,保持灿烂心情。妙招祝我的朋友永健康!

72、谷雨养生道,贴心分享你,芽菜补阳气, 豆芽 常吃妙,辛辣耗阴津,再馋节制好,呵护肾气先,黑米黑豆枣,菊花枸杞茶,清脑明目方。关怀送上,愿你安康!

73、将面盛入盘中,放上沥干的 豆芽 菜、紫圆白菜丝、胡萝卜丝,最后淋上酱汁,拌匀即可。

74、把豆子长时间浸水后,就会长出 豆芽 菜.

75、三伏养生吃三宝,解热防暑体力好。味美黄鳝是首宝,补中益气有奇效;消暑莲藕是二宝,补养脾胃防三高;绿 豆芽 菜是三宝,清热解毒清凉绕。

76、如果你对这些水果吃厌烦了,辣的胡椒,柿子椒和 豆芽 也含有大量的维生素C。

77、尽管三部委日前发布联合公告划定禁用红线明确“无根水”的监管,但这份禁用令未就“无根 豆芽 ”监管的根本问题提出解决方案。

78、上海年夜饭菜肴很富特色,除鱼肉鸡鸭外,还添上炒塌棵菜和糖醋银丝牙两样菜底,另外必备如意菜,就是我们所说的黄 豆芽 和发芽豆,含有“开发”的意思。

79、 豆芽 菜中的植物性硫配醣体,可以防止烟雾和空气中的其他污染物引发肺癌,一周四杯到八杯红葡萄酒,则可以大大降低前列腺癌的几率。

80、样, 豆芽 菜的身材,永远好像擦不干净的鼻涕汤,说话细声细气的一股“娘娘腔”。

81、我听人家说,这个超级小 豆芽 身长九尺,面如冠玉,气度不凡,就连面对圣战无敌的猛烈攻击时都面不改色呢。

82、酱干丁、腐皮拌 豆芽 、肉末五香豆、百叶雪菜、什锦泡菜、苦瓜笋丝,皆取清淡与原味。

83、“不要,夹走!”我就夹回来,结果不小心把她的一根 豆芽 也夹过来了。

84、最有特色的是“剥龙皮”,即烙上薄薄的烙饼,中间抹上甜面酱,卷以葱丝、肉丝、 豆芽 、粉丝、韭芽混合炒制的菜肴。

85、至于吃芝麻酱面的菜码儿,黄瓜丝属于最基本的,还应该有水萝卜丝和切成末儿的青蒜,或是胡萝卜丝和开水焯过的 豆芽 儿菜。

86、“胖墩”往往是被家长“塞”出来的,“ 豆芽 儿”的挑食习惯是父母惯出来的。

87、做土的功效,比要求天才还切近;否则,纵有成千成百的天才,也因为没有泥土,不能发达,像一碟子绿 豆芽

88、当天下午,樊晓霖将一百多斤 豆芽 逐一送出,并谨守诺言,分文未取。

89、举个例子,有一顿是荷叶包蒸肉、清炒虾仁、素拌 豆芽 、红焖鸡块,汤是凤足冬菇。

90、为缩短 豆芽 生长周期,让卖相更好,竟大量使用“无根水”等有毒药剂生产销售毒豆芽4万余斤。

91、该实验室负责人向记者证实,浸泡 豆芽 的水里含有次氯酸钠(即漂白液,晶体俗称漂白粉)等成分。

92、刘哥见一群吃货连盆底几根香菜、几枚 豆芽 都不放过,哪还忍心和我们争抢,只推说下午去市里办事时已吃了一大碗当地赫赫有名的胖嫂麻辣烫解馋。

93、菜市场上很多 豆芽 因为“卖相好”受到一些消费者青睐,岂不知光鲜亮丽的外表之下,却“厚味腊毒”。

94、自制绿 豆芽 ,这是一个等待生命抽长的过程,体验自己动手的乐趣。

95、正月初六后,宁波各家开始做“新年羹饭”,七碗、八碗,或者十二碗,其中必有鱼肉、 豆芽 、豆腐、年糕等。

96、“素什锦要买足十样素菜用来凉拌,莲藕代表年年都有, 豆芽 长得像如意,韭菜就是长长久久……”走在前面的幺爸一边带路一边念叨着给记者“上课”。

97、执法人员在两作坊内发现不锈钢斗状容器、电动筛洗机、锅炉等 豆芽 加工设施,并对处不同生长周期的黄豆芽、绿豆芽进行抽样。

98、杨炳辉记得,父亲把黄豆在木桶里泡发,不出几天嫩 豆芽 就能出街,白天挑出去卖,卖不完的带回家吃,靠这门手艺就养活了一家人。

99、 豆芽 性偏寒凉,吃多了易寒凉败胃,因此,证属脾虚、寒湿的患者不能多吃。

100、半杯毛豆只有95卡路里,但却含有超过八克的蛋白质,黄 豆芽 就是一个很好的零食选择。

101、海带丝、黄 豆芽 、蘑菇、姜葱、盐油、少量醋。

102、海龟、海豹、海狗、红珊瑚都是海洋中的珍稀物种,另外像文昌鱼、矛尾鱼、海 豆芽 等也都是遗存下来的古老物种。

103、绿 豆芽 性偏寒凉,吃多了容易寒凉败胃,因此,证属脾虚、寒湿的患者,如患有慢性肠炎、慢性胃炎、泄泻等病的人不能多吃。

104、(记者马骏)在个别家长和学校当中,体育课很容易被当作“ 豆芽 儿课”遭到忽视。

105、缴获无根水700余瓶济南端掉毒 豆芽 黑窝点。

106、举报线索中,问题肉、桶装水、毒 豆芽 和地沟油问题较为集中。

107、比较好的 豆芽 机品牌有小熊、现代、欧旺、康丽等,价位从100元到500元不等。

108、如果茎和根呈茶色且较萎软,说明发芽的豆质不新鲜,不要购买这种 豆芽

109、前者是在泡豆时使用,它会使 豆芽 不会长毛根,因为无根会比较漂亮,比较好吃,后者可以抑制豆芽长虚根和控制豆芽叶子的成长速度。

110、在班上,身材瘦弱的阿文是典型的“ 豆芽 菜”,性格内向,说话轻声轻气,学习成绩倒是不错。

111、2005年,“ 豆芽 拌豆芽”在某游戏论坛中结识了王刚,其时王刚是一个游戏板块的管理员,也是网络游戏“三国战记”的高手。

112、西红柿滚汤是家常最常见的汤水之一,配些 豆芽 、香芹菜就是色、香、味俱全的素汤。

113、孙某所说的“无根水”,其全称是“无根绿 豆芽 激素”。

114、邓小玲说,市民去买 豆芽 时,应尽量去大型超市里买,如果在其他地方买则要注意:一闻,二看,三掐。

115、一般,家里都会预备一些炸酱,万一哪天来不及炒菜做饭,或者懒了,下锅面条儿,焯些白菜叶、 豆芽 、青豆黄豆当菜码儿,拌上一大碗热面条“呼噜呼噜”。

116、冬瓜、绿 豆芽 、小白菜、苦瓜等能清热;薏苡仁、芡实、赤小豆等能利水渗湿。

117、吃的时候,我好心夹了一片冬瓜给她,她说不要,夹走!我就夹回来,结果不小心筷子带到她的一根 豆芽 ,也一起夹过来了。

118、除了大家熟悉的芹菜、韭菜外,绿 豆芽 、魔芋、乌塌菜这。

119、据刘某称,“问题 豆芽 ”主要通过何庄子批发市场销往本市各个区县,每天的销量在40-60桶,约为2000斤,每斤售价为8毛左右。

120、 豆芽 夸夸其谈的一讲就是半个时辰,内容十分精彩。

C. 大蒜脱毒繁殖的主要技术包括哪些

(1)脱毒蒜种微繁的环境要求

在离体培养条件下,大蒜任何组织培养成脱毒试管苗、试管鳞茎,都需要适宜的基质、营养、温度、湿度、光照等条件;同时,需要外源补给适宜、适度的激素,以诱导和促进愈伤、生根、发芽、生长发育、成苗和鳞茎膨大等。具体要求如下:

①营养要求:

无机营养:氮、磷、钾、硫、钙、镁等大量元素和铁、锰、铜、锌、硼、钴、钼等微量元素是大蒜生长发良必需的营养元素。在培养基中的活性成分为离子形式,一种类型的离子可由一种以上的盐提供。

有机营养:包括氮源和碳源。为了能使组织生长良好,在培养基中常需补加一种或数种维生素和氨基酸,其中,维生素B1是必不可少的,维生素B3、维生素B6和肌醇都能改善大蒜培养组织的生长状况。

②基质:脱毒蒜组培多用琼脂培养基作为基质,一般使用浓度为0.5%~1.0%。

③激素:除了营养物质外,为了促进组织器官的生长,通常必须由外源补给一种或数种植物生长调节物质,对这些物质的要求因外植体组织、培养阶段和增减目的的不同而有很大的变化。

生长素:有组培中,生长素被用于诱导细胞的分裂和根的分化。常用的生长素有:NAA(萘乙酸)、IAA(吲哚乙酸)、IBA(吲哚丁酸)、NOA(萘氧乙酸)、2,4-D(二氯苯氧乙酸)等。其中,NAA和IBA广泛用于生根,并能与细胞分裂素配合促进茎的增殖。2,4-D是诱导外植体愈伤组织不可缺少的,不同外植体对2,4-D浓度要求不同,茎尖需0.125毫克/升2,4-D的MS培养基,试管苗的茎需0.5毫克/升2,4-D的MS培养基。

细胞分裂素:主要具有促进细胞分裂和从愈伤组织或器官上分化不定芽,有助于使腋芽从顶端优势的抑制下解放出来,促进茎的增殖作用。常用的细胞分裂素有BAP(苄氨基嘌呤)或6-BA(6-苄基腺嘌呤)、ZT(玉米素)和KT(激动素)等,其中以6-BA最为常用。

赤霉素:具有促进大蒜茎尖发生多芽及稳定微管、拮抗鳞茎形成的作用。赤霉素有20多种,主要由根系供给,去除根系可促进叶鞘细胞的膨大,有利于鳞茎形成。在大蒜鳞茎形成过程中,赤霉素含量先下降,后上升,赤霉素含量降低对鳞茎形成有利。长日照诱导大蒜植株体内赤霉素含量降低是事实,故长日照对鳞茎形成的促进作用是通过影响内源赤霉素水平实现的。

乙烯:乙烯通过改变细胞壁形状和纤维素微纤丝的排列方向来刺激叶鞘细胞的侧向膨大,而不是纵向拉长。另外,乙烯可诱导叶片衰老,通过抑制叶片生长,使叶身和叶鞘长度相对比例发生改变,从而有利于鳞茎形成。

④酸碱度要求:在灭菌前,培养基的酸碱度一般调至pH5~6。当pH<5时,培养基(琼脂)不能凝固;pH>6时,培养基将会变硬。但熊正琴(1999)观察到,大蒜幼芽在pH=6.4时生长最佳,增殖最快。刘高琼(1995)认为,徐州白蒜和太仓白蒜组培幼芽分化数、发根数和幼芽生长的最佳培养基酸碱度为pH=7.5(微碱性)。

⑤温度和光照要求:

温度:在大蒜试管苗培育中,温度一般为15~20℃,较低的温度及较大的温差有利于培育壮苗;试管蒜苗必须经过一段低温(<20℃)春化阶段后,进入较高温度和较长、较强的光照条件后才能诱导试管鳞茎的形成与膨大,大蒜试管鳞茎形成与膨大的适温是20~25℃。

光照:对光照的要求实质上是对光周期、光强、光质的要求。

光周期:试管苗培育的光周期以12小时为宜。光周期长短对鳞茎形成至关重要,较长的日照条件有利于鳞茎膨大。但鳞茎形成对光周期反应的要求因大蒜品种生态型而异,如低温反应迟钝型蒜种,在12小时日照下,一般不形成鳞茎,日照长达16小时虽能形成鳞茎,但发育不良;而低温反应敏感型蒜种,在12小时日照下鳞茎发育良好。

光强:在一定的光周期下,强光照比弱光照条件下易于形成鳞茎。光照强,合成的碳水化合物就增多,其积累的多少是鳞茎膨大的物质基础。但对鳞茎形成的诱导,即使弱光照,只要光照时数超过临界周期,均可开始形成鳞茎。

光质:对大蒜使用白炽灯补光,对试管鳞茎形成与膨大具有明显的促进作用。植物光敏素的光平衡态Φ值与光质关系很大,通常用R∶FR(红光:远红光)光量子比率来衡量,随着R∶FR值降低,鳞茎膨大速度加快,光质在鳞茎形成中起着重要的调节作用,且这种调节作用与其内源乙烯生成可能有关。

(2)脱毒大蒜组培培养基的制备

①配制浓缩储备液:大量元素浓缩20倍、微量元素浓缩200倍,铁盐浓缩200倍,除蔗糖之外的有机物质浓缩200倍。在配制这4种储备液时,应使每种成分分别溶解,然后再把它们彼此混合。

各种激素的储备液应当分别配制,如果不溶于水,则应先溶解在少量的适当溶剂中,然后再加蒸馏水到最终容积。根据所要求的激素浓度水平,其储备液的浓度可以为0.001~0.01微摩尔/升。生长素一般溶于95%酒精或0.01微摩尔/升的氢氧化钠中,后者的溶解效果更好。细胞分裂素一般溶于0.5~1微摩尔/升的盐酸或稀的氢氧化钠溶液中。赤霉素易溶于冷水,但GA3溶于水后不稳定,容易分解,最好用95%酒精配成母液。

所有的储备液应储存在适宜的塑料瓶或玻璃瓶中,放置冰箱中保存。铁盐储备液必须储存于棕色玻璃瓶中。在使用这些储备液之前,轻轻晃动瓶子,如果发现其中有沉淀、悬浮物或微生物污染,则必须立即将其淘汰。在制备储备液和培养基时,应当使用蒸馏水或去离子水以及高纯度的化学试剂。

②制备培养基的步骤

a.称量规定数量的琼脂和蔗糖,加水到最终容积的2/3,加热使之溶解。因蔗糖易溶解,也可以在琼脂溶解之后加入。

b.分别加入一定量的各种储备液。如果由于特殊原因需要在高压灭菌之后再加入维生素和激素,则可在调节这些物质溶液的pH后,使之通过微孔滤器(孔径为0.22~0.45微米)消毒。

c.加蒸馏水至培养基的最终容积。

d.充分混合后,用0.1微摩尔/升。氢氧化钠和0.1微摩尔/升盐酸调节培养基的pH。

e.趁热将培养基(为均匀的液态)分装到所选用的培养容器中(约为容器容积的1/3)。

f.用包在纱布中的棉塞或铝箔、牛皮纸等其他适宜的塞或盖封严瓶口。

g.将其在121℃,1.15×105帕斯卡压力下灭菌15~20分钟。

h.使培养基在室温下冷却后低温下保存,所有培养容器都必须做好标记,使得在高压灭菌和贮藏后也能清楚地识别。

(3)脱毒大蒜微繁的操作技术

①脱毒大蒜组培的技术体系可以是试管苗,也可以为试管鳞茎。从外植体可以直接诱导芽的再生、增殖,保持种性稳定,也可以先诱导形成愈伤组织,再增殖分化。因此,大蒜组织培养可分为四条途径:一是由外植体诱导再生试管苗;二是由外植体直接诱导形成试管苗;三是诱导愈伤组织再生植株后在试管内形成小鳞茎;四是由直接萌芽形成的试管苗在试管内形成小鳞茎。

由于经愈伤组织途径容易发生变异,因此,在以保持品种优良特性为原则的脱毒扩繁过程中应慎用。

②脱毒大蒜组织无菌培养的一般步骤:

a.将大蒜瓣(或蒜薹切段)置于玻璃瓶中,在超净工作台上,先用75%酒精进行表面消毒5分钟(或40秒),再在含有几滴活化剂的种类及浓度适当的消毒液(如0.2%升汞液)中消毒20分钟或12分钟。在消毒期间需摇动玻璃瓶2~3次。

b.消毒处理后,将消毒液倒出,加入适量的无菌蒸馏水,摇动数次,将水倒掉,如此重复3~4次。

c.将材料取出,置于已经灭菌的培养皿中。

d.在对大蒜材料进行消毒处理的同时,对所要使用的器械进行消毒,方法是把它们浸入95%酒精中,取出后再置酒精灯火焰上灼烧,待冷却后即可使用。所有器械往往需要在每次使用后消毒1次。

e.使用这些消毒过的器械从已经过表面消毒的材料上切取适当的外植体——茎尖。

f.将培养容器的盖或塞打开,将外植体接种到培养基上。如果使用的是玻璃容器,把瓶口置酒精灯火焰上烘烤数秒,然后迅速用瓶盖或瓶塞封严。

g.培养基及器皿灭菌采用常规方法即高压灭菌法操作。

③脱毒大蒜试管微繁的操作技术:

a.从外植体直接诱导芽和根的形成。从外植体直接诱导产生不定芽和根,一般要经过起始培养、不定芽的诱导和生根培养等过程。各种外植体在MS、B5、LS培养基中均可再生为完整植株。

细胞分裂素的存在是芽形成的前提。较高浓度的BA促进芽形成,添加1~2毫克/升BA即可诱导芽的形成。无激素培养基利于生根,培养基中添加NAA促进生根,但添加BA会抑制生根。

外植体来源不同,对激素要求不同。从花薹再生芽只需0.1毫克/升NNA的MS培养基。从蒜瓣分化芽中,低浓度生长素(NAA)与高浓度细胞分裂素(KT)配合分化最好;幼芽的增殖要求生长素浓度高于细胞分裂素,添加0.1毫克/升玉米素(ZT)时促进带幼叶的茎盘中不定芽的分化而形成丛生芽。加入一定浓度GA3有利于茎尖诱芽。青霉素的存在有利于芽的形成,同时降低污染。

贮藏温度对产殖珠影响随外植体而异。蒜瓣5℃低温贮藏后促进芽和根的形成。而气生鳞茎60天5~7℃低温处理后只促进发芽率,并不影响芽数。取材部位不同,萌芽能力差异很大。只有带节处的花茎培养才能诱导萌芽,花茎其他切段无效。

b.试管苗的驯化、田间生长。试管苗一般需先用蛭石、岩棉、珍珠岩等做基质,营养液浇灌,进行驯化栽培。在移栽时接种Glomus mosseae可促进试管苗生根,提高成活率。具根小鳞茎的试管苗移栽成活率达92%,明显高于有根但无小鳞茎的试管苗(53%)。

④脱毒试管鳞茎微繁的操作技术:试管鳞茎的培育一般要经起始培养、芽的增殖、试管鳞茎形成3个阶段。在外植体启动,愈伤组织诱导,试管苗生根等大蒜离体培养中均有关于大蒜试管鳞茎形成的实例。用茎尖、茎盘、带幼叶的茎盘、双鳞片、花薹等外植体,在MS、或B5、或LS培养基上均能形成试管鳞茎。

低浓度激素(BA、NAA)促进鳞茎形成,甚至以无激素培养基为优。以茎尖为外植体时,低浓度的激素促进鳞茎的形成;茎盘为外植体时,2毫克/升BA促进鳞茎的形成,高浓度BA促进芽形成。NAA有利于小鳞茎根的形成,培养基中1.0毫克/升NAA使80%小鳞茎生根。鳞茎在2毫克/升NAA+BA0.05毫克/升的MS培养基上有利形成,无激素上膨大。

较高浓度(90~120克/升)的蔗糖有利于鳞茎形成。在培养基中添加(5克/升)活性炭能促进鳞茎的形成。长光照、远红光促进鳞茎形成与膨大。

不同生态型品种在同一离体条件下形成鳞茎的数量、质量有差异。离体条件下,试管鳞茎的形成对光周期的要求在春、秋品种间差异显著,3~4℃低温预处理促进鳞茎形成,春蒜品种必需经过低温预处理才能形成鳞茎。

环境条件对鳞茎形成的诱导作用不能用改变培养基成分来替代。试管鳞茎不需驯化,直接移栽。试管鳞茎大小与田间发芽率、株高、产量呈正相关。试管鳞茎大小及种植密度影响鳞茎的产量及质量。形成的试管鳞茎(晚熟种)经35~20~5℃后可打破休眠。

熊正琴等(1999)用生长整齐一致的徐州白蒜脱毒试管苗为外植体,经起始培养基、继代增殖培养基、鳞茎诱导培养基的连续培养后,可使鳞茎诱导率达90%,鳞茎鲜重达300毫克以上,鳞茎直径达15毫米。

⑤提高微繁系数:

a.选择适宜的外植体。芽是脱毒蒜速繁的基础,诱导外植体直接产生脱毒多芽,可大大提高快繁基数。

大蒜品种间茎尖发生芽数差异明显。休眠鳞茎茎尖发芽数显著少于已经打破休眠的鳞茎。通过低温处理种蒜可明显增加茎尖发芽数,剥离茎尖大小也影响所发生的芽数,带2~3个叶原基的大茎尖比带1个叶原基的小茎尖发生的芽数多,但大茎尖所得苗的脱毒率低于小茎尖。将鳞茎置于37℃热处理20~30天,大茎尖苗脱毒率与小茎尖相似。因此,先将鳞茎热处理,再剥离大茎尖培养,即可获得脱毒率高的多芽。

蒜薹可以产生多气生鳞茎,表明具有很强的腋芽萌发潜力;同时作为生殖器官和分生组织,生殖茎尖具有更多的腋芽原基和更强的脱毒潜力。大蒜不同品种间生殖茎尖发生芽数差异明显,芽多者往往生长较弱,必须切割分离多芽进行壮苗培养。

b.提高代增殖系数。适时切割起始培养基中形成的多芽进行继代增殖,是提高代增殖系数关键环节。培养基中的激素种类、浓度及比例以及愈伤组织的诱导、分化及鳞茎形成等都会影响代增殖系数。

愈伤组织的诱导:培养基MS、B5、改良B5(BDS)、LS、N6中均可诱导愈伤组织产生。外植体不同,对激素要求有差异。茎尖和叶片在含1~2毫克/升IAA或0.05~1.0毫克/升2,4-D的培养基上具有很好的出愈率。2,4-D和KT对诱导花梗形成愈伤组织是必要的。添加2,4-D后,花薹就会形成愈伤组织。花药培养在2毫克/升NAA的B5培养基中,诱导愈伤组织效果好。分生状根瘤(MRTs)的形成需较低浓度(0.5毫克/升)NAA及无KT,根瘤的形成与正常生根能力呈负相关。蒜瓣低温贮藏促进愈伤组织形成,但无2,4-D时,蒜瓣低温预处理并不促进愈伤组织的形成。花药5℃低温预处理1~2天有利于愈伤组织的诱导。

愈伤组织的增殖:愈伤组织的生长一般不要求光照,温度以25℃较宜。定轨摇床培养时,70转/分种时利于愈伤组织生长,150转/分钟时促进球状体的形成,继而可再生成苗。茎尖愈伤组织在含较高浓度BA、NAAR的MS培养基中增殖生长最快。2毫克/升IAA促进愈伤组织的生长,而IBA、BA无此作用。

愈伤组织的分化:愈伤组织的分化通常要求光照。不同来源的愈伤组织分化能力不同。从叶原基来的愈伤组织比从茎尖诱导的更易分化;从花药来的外植体最有利于芽的形成、增殖和生根,不正常的根容易分化不定芽,在0.5毫克/升IAA+5毫克/升BA中最佳。分生状根瘤(MRTs)可作为一种好的外植体,因其形成的愈伤组织具有很好的器官形成能力。小根和花梗上部比大根、花梗基部来的愈伤组织易于芽和根的再生。

芽、根的分化条件有异:高浓度NH4+利于芽分化。BA对幼苗的分化是不可缺少的。无2,4-D时利于再生。王洪隆报道,高浓度细胞分裂素和低浓度的生长素利于芽的分化,在无激素的MS培养基中可生根。低浓度的BA、NAA利于植株再生。

不同来源愈伤组织的分化对激素要求有异。从花薹来的愈伤组织在2,4-D存在时即可分化芽和根。试管苗根尖形成的根瘤分生组织可在0.5毫克/升NAA或0.5~1.0毫克/升NAA+1.0毫克/升KT的MS培养基中再生为完整植株。愈伤组织的分化随培养基的不同,对激素要求也不同。不定芽的发生在B5培养基中需要高浓度的KT(2~4毫克/升),在LS培养基中需要低浓度的BA(0.25毫克/升)。花药愈伤组织在B5培养基上分化效果比在LS培养基上好。花梗愈伤组织经低温处理对芽分化是必要的。从愈伤组织分化出来的当代植株,由于根主要是从愈伤组织块上长出来,而不是从幼苗基部长出,最终造成根、芽脱离,移栽成活率只有10%~20%,有效的解决方法是从幼苗直接诱导出鳞茎。

愈伤组织的变异:愈伤组织形成过程中的染色体变异可能与生长调节剂种类、浓度有关。Dolezel等用BDS培养基研究表明,5~50微摩尔/升NAA增加有丝分裂异常的细胞数目,但当总的激素浓度达500微摩尔/升时显著抑制有丝分裂活性,使有丝分裂异常,所以较低浓度的激素可使细胞有丝分裂正常化。

随继代时间延长,变异加重。愈伤组织继代4个月后,二倍体从开始的52%下降至16%,且再生频率降低。继代时间一年后,芽的分化率从60%降至10%。1~3戈瑞辐照叶片后可促进愈伤组织生长,且不影响苗的再生,可用于突变体筛选。

综上所述,使试管苗健壮生长、提高试管鳞茎诱导率并促进其膨大的所有因素,都将影响脱毒大蒜微繁系数的提高。

⑥注意事项:

a.病毒检测。尽管在切取茎尖时十分小心,并且对其进行了各种有利于消除病毒的处理,也只有一部分培养物能够产生无病毒植株。因此,对于每一个由茎尖产生的植株,在用做母株以生产无病毒原种之前,必须针对特定的病毒进行检验。培养植物中,很多病毒具有一个延迟的复苏期。因此在头18个月内必须对植株进行若干次检验。只有那些的确已经脱除了某种病毒,才可以在生产上推广使用。由于经病毒检验的植株仍有可能重新感染,因而在繁殖过程和各个阶段还需进行重复检验。必须在能杜绝任何侵染可能性的条件下繁殖这些确已脱毒的植株。

b.优选株系。将培养后代按生长势分类,每次选用生长一致的植株进行继代培养,个体间就会生长充分,不受抑制。

c.适时诱导鳞茎形成。试管鳞茎的培育一般要经起始培养、芽的增殖、试管鳞茎形成3个阶段。但芽的增殖阶段不能无限地进行下去,必须适时诱导鳞茎形成。试管鳞茎形成需要一定的幼苗生长为前提,同时应尽可能在温度较高的夏秋季节诱导鳞茎形成,以降低生产成本,并能与大田生长季节相衔接。

d.适时更新换代,防止玻璃化。当一种无菌培养方法建立后,很容易连续繁殖下去,而不与原亲本植株进行比较,就可能使培养早期发生的变异积累起来。同时,根据研究经验,若不断重复进行离体繁殖,部分培养物的叶片常常变成渍水状,几乎是半透明的,此类试管苗的生长和繁殖速度将会下降,最后甚至死亡,这就是玻璃化现象,很难彻底消除。因此,应当注意适时更新换代,防止玻璃化。

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