A. 盐析法得到的蛋白质如何脱盐
常用的是凝胶过滤层析脱盐,利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。
蛋白质溶液中盐分子和蛋白质分子大小相差较大,盐分子较小,会随着层析流动相进入孔径较小的固定相,在层析中迁移速率小,而蛋白质分子尺寸较大,不能随流动相进入固定相,迁移速率大,首先从层析术中流出,实现脱盐。
(1)盐析的蛋白质加蒸馏水扩展阅读
盐析作用的实质是高浓度的强电解质破坏蛋白质分子表面的水化膜,同时电解质离子中和了蛋白质所带的电荷,蛋白质的稳定因素被消除,使蛋白质分子相互碰撞而凝聚沉淀。
蛋白质在水溶液中的溶解度取决于蛋白质分子表面离子周围的水分子数目,亦即主要是由蛋白质分子外周亲水基团与水形成水化膜的程度以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。
蛋白质溶液中加入中性盐后,由于中性盐与水分子的亲和力大于蛋白质,致使蛋白质分子周围的水化层减弱乃至消失。
同时,中性盐加入蛋白质溶液后由于离子强度发生改变,蛋白质表面的电荷大量被中和,更加导致蛋白质溶解度降低,之蛋白质分子之间聚集而沉淀。
由于各种蛋白质在不同盐浓度中的溶解度不同,不同饱和度的盐溶液沉淀的蛋白质不同,从而使之从其他蛋白中分离出来。简单的说就是将硫酸铵、硫化钠或氯化钠等加入蛋白质溶液,使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏,导致蛋白质在水溶液中的稳定性因素去除而沉淀。
B. 蛋白质加蒸馏水摇匀沸水浴会发生什么变化
化学反应。有的蛋白质溶于水,他们是以胶体状态存在的,而加入蒸馏水中摇匀沸水浴,蛋白质会沉淀析出,发生了盐析,蛋白质受热会发生凝固。
C. 盐析后的蛋白质有哪些方法可以将蛋白质与盐分离,得到纯度高的蛋白质
如果你对蛋白的纯度要求比较低,那你就先过滤,再透析吧(透析完最好对残余的盐离子进行检测一下,如果是硫酸铵就奈斯试剂)
纯度要求较高,那就先透析,再过柱子吧(一般使用离子交换色谱)
D. 盛1ml鸡蛋清加入1ml热水振荡,加入1ml蒸馏水振荡
蛋白质在遇到高温 硝酸 重金属盐的时候会发生变性而生成絮状物
这种内是蛋白质内部结构被容破坏 比如说肽链 肽键断裂 或者原来折叠在一起的多肽被拆开等等
这种变化肯定是不可逆的 就有点像生物上的酶遇高温失活 酶大多是蛋白质
E. 鸡蛋白加热后冷却再加入蒸馏水现象及结论
①有的蛋白质溶于水,他们是以胶体状态存在的.②当向鸡蛋白中加入少量的浓的硫酸钠溶液时,蛋白质会沉淀析出,发生了盐析.③蛋白质受热会发生凝固.④蛋白质加入如含铅的重金属离子的溶液,会发生变性而凝结.⑤浓硝酸能使蛋白质发生颜色反应,生成黄色溶液.⑥灼烧蛋白质能闻到烧焦羽毛的气味,头发中含有蛋白质,所以在酒精灯上灼烧一根头发,能闻到烧焦羽毛的气味.
故答案为:①溶液略显浑浊、能;
②溶液变浑浊、减小;
③出现白色固体、凝固;
④出现黄色固体、重金属盐;
⑤出现黄色固体、化学;
⑥能燃烧,并有一种特殊的气味、烧焦羽毛、蛋白质.