『壹』 培养基灭菌的方法
1、高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适用于耐高温培养基、接种器具和蒸馏水的灭菌。培养基在配制过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,灭菌工作至少应在24小时内完成。一般可在0.105MPa压力、121℃温度下灭菌15 ~ 30分钟。消毒时间不能太长,也不能超过规定的压力范围,否则有机物,特别是维生素,在高温下会分解,失去营养功能,使培养基变质、变色,甚至难以凝固。将蒸馏水或自来水放入三角瓶中,含水量一般不超过瓶子的2/3,用牛皮纸或硫酸纸包好密封,然后放入高压锅中灭菌,得到无菌水。灭菌后的培养基可以在培养室中预培养3天。如果没有污染,证明灭菌完成,可以使用。暂时不用的培养基最好保存在10℃下。含IAA或GA3的培养基应在一周内用完,其他培养基最多不超过一个月。2、过滤灭菌:一些植物生长调节剂和有机物质,如IAA、GA3、ZT、CM等。,加热时易分解,不能用培养基高温灭菌,所以要用细菌过滤器把杂菌过滤掉。细菌过滤器和滤膜(孔径0.45微米)在使用前应高压灭菌。过滤后的溶液应立即加入培养基中。如果是液体培养基,可以在培养基冷却到30℃时添加。如果是固体培养基,必须在培养基凝固前(50-60℃)加入,溶液必须摇匀,与其他成分混合均匀。
『贰』 什么是灭菌水
就是经过灭菌(121摄氏度,15~20分)的水,用于害怕被杂菌污染的试剂配制或操作。
『叁』 无菌水的制作
很容易的。就是用三角瓶装蒸馏水,然后拿去高压灭菌锅灭菌就可以了。。相信我,我们做实验就是这样做的。。