『壹』 哪些公司会用到链霉亲和素,他们的用途是干啥,谢谢各位
这些特异的化学物质一般都是生物制剂公司或者是实验室做光化学实验用,它的作用你可以参考下面的一些属性。
链霉亲和素(streptavidin下称SA)是与亲和素(svidin下称AV)有相似生物学特性的一种蛋白质。
链霉亲和素(SA)是streptomyces avidinii菌的分泌物,其分子量及结合生物素的能力与鸡蛋清中的亲和素相似,等电点6.0,非特异性结合远比亲和素低。
一 、来源:SA 是Streptomyces avicllrdi菌培养过程中的分泌产物,主要通过2一亚氨基生物索亲和层析法提纯,1L培养液中含蛋白1 0~60mg 。
二、分子量 :链霉亲和素是四聚体蛋白,大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合,两者之间的亲和力极为强烈,链霉亲和素-生物素复合物的解离常数处于 10 mol/L 数量级,这一性质常用于分子生物学用途[1]。其中一条完整的SA肽链中有159个氨基酸残基,分子量为16450。
三、比消光系数:消光系数与蛋白中Tyr含量有关, 由于SA 中Tyr的含量比AV 多,所以SA的比消光系数也较AV 为高,两者分别为E 1mg/ml=3.40和E1mg/ml=1.57。在282nm 上这两种蛋白结合生物素后并不改变其消光系数,而在233nm上,它们结合生物素后郡便其消光系数值增高,现在一般都是利用蛋白的这种吸光特点来测定它们的活性。
『贰』 链霉亲和素为什么可以提高融合率
链霉亲和素分子由4条相同的肽链组成,其氨基酸组成中,甘氨酸和丙氨酸的含量较大,而且结合生物素的活性基团也是肽链中的色氨酸残基;链霉亲和素是一种稍偏酸性(pH6.0)的蛋白质,并且不带任何糖基。在蛋白水解酶作用下,链霉亲和素可在N端10~12和C端19-21间断裂,形成的核心链霉亲和素仍然保持完整的结合生物素的能力,所以可以提高融合率。
链霉亲和素是与亲和素有相似生物学特性的一种蛋白质,是streptomyces avidinii菌的分泌物,其分子量及结合生物素的能力与鸡蛋清中的亲和素相似,等电点6.0,非特异性结合远比亲和素低。
『叁』 免疫组化三抗是什么
(SAB)辣根过氧化物酶标记链霉亲和素
『肆』 亲和素/链霉亲和素酶,血清中有什么物质可以跟链霉亲和素结合
可以结合来生物素的活性基团也是肽链中源的色氨酸残基,可以高效分离、纯化生物素化复合物,如:小分子、肽类、蛋白、抗体、糖类、凝集素、寡核苷酸、DNA/RNA等,血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些蛋白、抗体,小分子、肽类、蛋白、抗体、糖类、,都会与链霉亲和素结合…………………… ……………………………… 更多具体材料请参考: 亲和素/链霉亲和素酶 http://proct.bio1000.com/100162/
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『伍』 蛋白纯化填料有哪几种其应用特点是什么
PurKineHis-TagNi-IDAResin PurKine组氨酸标签Ni【镍】-IDA树脂 Abbkine BMR20000
PurKineHis-TagCu-IDAResin PurKine组氨酸标签Cu【铜】-IDA树脂 Abbkine BMR20040
PurKineGST-TagGlutathioneResin PurKine谷胱甘肽S转移酶标签谷胱甘肽树脂 Abbkine BMR20100
PurKineMBP-TagDextrinResin6FF PurKine麦芽糖结合蛋白标签糊精树脂(6%交联) Abbkine BMR20206
PurKineBiotin-TagStreptavidinResin6FF PurKine生物素标签链霉亲和素树脂(6%交联) Abbkine BMR20306
PurKineBiotin- PurKine生物素标签链霉亲和素预装柱(6%交联) Abbkine BMC20306
PurKineStrepII-TagStrep-TactinResin4FF PurKineStrepII标签Strep-Tactin树脂(4%交联) Abbkine BMR20400
PurKineProteinAResin PurKine蛋白A树脂 Abbkine BMR20500
PurKineProteinGResin PurKine蛋白G树脂 Abbkine BMR20600
PurKineProteinA/GResin4FF PurKine蛋白A/G树脂(4%交联) Abbkine BMR20704
PurKineProteinLResin PurKine蛋白L树脂 Abbkine BMR20800
PurKineProteinATResin4FF PurKine蛋白AT树脂(4%交联) Abbkine BMR20904
PurKine抗体纯化SulfoLink树脂 Abbkine BMR21000
-ActivatedResin4FF PurKine抗体纯化NHS-激活树脂(4%交联) Abbkine BMR21100
PurKineHeparinResin6FF PurKine肝素树脂(6%交联) Abbkine BMR21206
PurKineBenzamidineResin4FF PurKine苯甲脒树脂(4%交联) Abbkine BMR21306
PurKineEndotoxinRemovalResin PurKine内毒素清除树脂 Abbkine BMR21400
『陆』 国内做链霉亲和素磁珠的哪个厂家的用起来效果好啊求推荐~~~~
链霉亲和素磁珠,主要用于IVD工业磁分离全自动化学发光免疫分析及生物医药基础研究中分离生物素修饰成分的复合物。链霉亲和素磁珠用于IVD的磁分离全自动化学发光免疫分析,其悬浮稳定性、磁响应速度、非特异吸附及信噪比、结构/性能的储存稳定性是定性指标,只有这些定性指标同时都满足要求才能适用,才值得考虑其分离效价和其用于单次测试的成本。用于磁分离全自动化学发光免疫分析的链霉亲和素磁珠:进口Dynal、JSR产品应用较多,Dynal分离效价接近JSR产品的两倍,Bangs的产品磁响应速度较慢且非特异性吸附较高;截止2018年8月的国产链霉亲和素磁珠中,仅重庆博蓝鹰生物技术有限公司产品亚型MSP-SAV-Z1测试满足碱性磷酸酶和吖啶酯标记系统要求,且该亚型分离效价与Dynalbeads Myone Streptabvidin T1相当,但该公司另一亚型MSP-SAV-F1仍不能满足化学发光免疫分析要求。用于基础研究分离生物素修饰成分复合物时,进口和国产链霉亲和素磁珠产品通常都能用。链霉亲和素磁珠目前都以质量(mg或g)计量,但不同厂家产品单位质量对应分离效价差异大;针对相同测试/分离对象,以单次测试/分离的成本进行比较更合理,这也是多数厂家的报价依据。但考虑用于化学发光免疫分析的定性指标是否满足要求,很多国产链霉亲和素磁珠的报价就太高了。
『柒』 链霉亲和素琼脂糖最大离心是多少
可以结合生物素的活性基团也是肽链中的色氨酸残基,可以高效分版离、纯化生物素化复合物,权如:小分子、肽类、蛋白、抗体、糖类、凝集素、寡核苷酸、DNA/RNA等,血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些蛋白、抗体,小分子、肽类、蛋白、抗体、糖类、,都会与链霉亲和素结合
『捌』 如何将两个生物素标记的颗粒用链霉亲和素连接起来
抽血检测,一般用三代酶联合免疫法 酶联免疫法,简称ELISA。 它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。 步骤:ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清(这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因,其实是误会)。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范围必须在质控范围内)。经过一个小时的孵育,然后洗板,加底物,半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后就是读数。由数值来判断结果的阴性或阳性。严格的讲,如果第一次检测为阳性的话,无论是哪个实验室,必须按照CDC的HIV操作规程来进行第二次检测,第二次的方法必须与第一次的不同,如还是阳性,将送确认实验室确认。有的医院很不负责,将初筛阳性的报告发出后就不管了,这是不对的。必须经过确认实验室确认后才可出阳性诊断。祝大家。PS,第一次检测为阳性的话,一定要去确认实验室再做一次,勇敢的去面对,也许结果就不一样了。 基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。 具体方法有: (一)双抗体夹心法 双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下: (1)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。 (2)加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。 (3)加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。 (4)加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。 根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物,即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。 (二)双位点一步法 在双抗体夹心法测定抗原时,如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体,则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步(图15-5)。这种双位点一步不但简化了操作,缩短了反应时间,如应用高亲和力的单克隆抗体,测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的ELISA提高到新水平。 在一步法测定中,应注意钩状效应(hookeffect),类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成夹心复合物,所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。 (三)间接法测抗体 间接法是检测抗体最常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。操作步骤如下: (1)将特异性抗原与固相载体连接,形成固相抗原:洗涤除去未结合的抗原及杂质。 (2)加稀释的受检血清:其中的特异抗体与抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合,在洗涤过程中被洗去。 (3)加酶标抗抗体:与固相复合物中的抗体结合,从而使该抗体间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体,可用酶标羊抗人IgG抗体。 (4)加底物显色:颜色深度代表标本中受检抗体的量。 本法只要更换不同的固相抗原,可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。 (四)竞争法 竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量呈反比。操作步骤如下: (1)将特异抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤。 (2)待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原,则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合,竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会,使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原,保温后,酶标抗原与固相抗体的结合可达最充分的量。洗涤。 (3)加底物显色:参考管中由于结合的酶标抗原最多,故颜色最深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差,代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡,表示标本中抗原含量越多。 (五)捕获法测IgM抗体 血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在,后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗本多用捕获法,先将所有血清IgM(包括异性IgM和非特异性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再测定特异性IgM。操作步骤如下: (1)将抗人IgM抗体连接在固相载体上,形成固相抗人IgM。洗涤。 (2)加入稀释的血清标本:保温反应后血清中的IgM抗体被固相抗体捕获。洗涤除去其他免疫球蛋白和血清中的杂质成分。 (3)加入特异性抗原试剂:它只与固相上的特异性IgM结合。洗涤。 (4)加入针对特异性的酶标抗体:使之与结合在固相上的抗原反应结合。洗涤。 (5)加底物显色:如有颜色显示,则表示血清标本中的特异性IgM抗体存在,是为阳性反应。 (六)应用亲和素和生物素的ELISA 亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。现在使用更多的是从链霉菌中提取的链霉和素(strepavidin)。生物素(biotin)又称维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成生物素化的产物。亲和素与生物素的结合,虽不属免疫反应,但特异性强,亲和力大,两者一经结合就极为稳定。由于1个亲和素分子有4个生物素分子的结合位置,可以连接更多的生物素化的分子,形成一种类似晶格的复合体。因此把亲和素和生物素与ELISA偶联起来,就可大提高ELISA的敏感度。 亲和素-生物素系统在ELISA中的应用有多种形式,可用于间接包被,亦可用于终反应放大。可以在固相上先预包被亲和素,原用吸附法包被固相的抗体或抗原与生物素结合,通过亲和素-生物素反应而使生物素化的抗体或抗在相化。这种包被法不仅可增加吸附的抗体或抗原量,而且使其结合点充分暴露。另外,在常规ELISA中的酶标抗体也可用生物素化的抗体替代,然后连接亲和素-酶结合物,以放大反应信号。