树脂载玻片

❶ 免疫荧光甩片能将细胞固定在载玻片上么

免疫荧光基本实验步骤

基本实验步骤：
（1） 细胞准备。对单层生长细胞，在传代培养时，将细胞接种到预先放置有处理过的盖玻片的培养皿中，待细胞接近长成单层后取出盖玻片，PBS洗两次；对悬浮生长细胞，取对数生长细胞，用PBS离心洗涤（1000rpm，5min）2次，用细胞离心甩片机制备细胞片或直接制备细胞涂片。
（2） 固定。根据需要选择适当的固定剂固定细胞。固定完毕后的细胞可置于含叠氮纳的PBS中4℃保存3个月。PBS洗涤3×5 min。
（3） 通透。使用交联剂（如多聚甲醛）固定后的细胞，一般需要在加入抗体孵育前，对细胞进行通透处理，以保证抗体能够到达抗原部位。选择通透剂应充分考虑抗原蛋白的性质。通透的时间一般在5-15min。通透后用PBS洗涤3×5 min。
（4） 封闭。使用封闭液对细胞进行封闭，时间一般为30min。
（5） 一抗结合。室温孵育1h或者4℃过夜。PBST漂洗3次，每次冲洗5min。
（6） 二抗结合。间接免疫荧光需要使用二抗。室温避光孵育1h。PBST漂洗3次，每次冲洗5min后，再用蒸馏水漂洗一次。
（7） 封片及检测。滴加封片剂一滴，封片，荧光显微镜检查。

（一）细胞准备
用于免疫荧光实验的细胞可以是直接生长在盖玻片上的贴壁细胞，也可以是经过离心后涂片的悬浮细胞或者是将取自体内的组织细胞悬液离心后涂片。贴壁良好的细胞一般在培养时直接放入coverslips让细胞生长在其上即可，尽量避免使用贴壁性能不好的细胞进行免疫荧光实验，以免后续的漂洗操作引起细胞脱落。少数实验需要使用这类细胞或者悬浮细胞进行免疫荧光观察，建议使用细胞离心甩片机制备细胞片或直接制备细胞涂片。

（二）固定和通透
除研究细胞表面抗原或不稳定抗原可不固定外，一般均应固定。固定的目的有三：
①防止细胞从玻片上脱落；
②除去防碍抗原-抗体结合的类脂；
③使标本易于保存。

标本的固定原则是：
①不能损伤细胞内的抗原；
②不能凝集蛋白质；
③应保持细胞和亚细胞结构；
④固定后应保持通透性，以保证抗体自由进入所有细胞与亚细胞组分与抗原结合。
常用的固定剂有多种，应根据所研究抗原的性质和所使用的抗体特性选择适当的固定剂。通常固定方法可以分为两类：有机溶剂和交联剂。有机溶剂如甲醇和丙酮等可去除类脂并使细胞脱水，同时将细胞结构蛋白沉淀。交联剂如多聚甲醛通常通过自由氨基酸基团形成分子间桥连，从而产生一种抗原相互连接的网络结构。交联剂比有机溶剂更易于保持细胞的结构，但因为交联阻碍抗体结合，可能会降低一些细胞组分的抗原性，因此需要增加一个通透步骤以使抗体能够进入标本。两种固定方法都可能使蛋白抗原变性，因此使用变性蛋白作为抗原生产的抗体在免疫荧光中可能更为有效。
最常用的固定剂有多聚甲醛和甲醇，少数情况也使用乙醇，丙酮及戊二醛等进行固定。通常，细胞结构抗原、病毒及一些酶类抗原使用丙酮、乙醇及高浓度的甲醛固定可获得较好的结果，而细胞膜相关组分抗原一般以多聚甲醛固定。细胞器和细胞颗粒内的抗原一般也用多聚甲醛固定，并需要进行通透以使抗体能达到抗原表位。
通透步骤只在检测细胞内抗原表位的时候才需要，因为抗体需要进入细胞内部去检测蛋白。但是，如果待检测的是跨膜蛋白，且其抗原表位处于胞质内区域，则同样需要对细胞进行通透。相反，如果所检测的抗原表位位于膜蛋白的胞外段，则不需要进行通透。丙酮本身具有通透作用，因此用丙酮作为固定剂时是不需要通透的。甲醇同样具有通透作用，但有些场合并不适合用甲醇，因为一些表位对甲醇非常敏感。常用的通透剂是去垢剂，如Triton ，NP-40，以及Tween 20, Saponin, Digitonin 和 Leucoperm等。Triton和NP-40属于烈性去垢剂，可部分溶解细胞核膜，因此非常适合核抗原检测。但应该注意的是，如果在高浓度下使用或者作用时间过长，它们将破坏蛋白，从而影响实验结果。Triton X-100是最常用的通透剂，但是它将破坏细胞膜，因此不适用于细胞膜相关抗原。后面一组去垢剂要温和得多，它们可以在细胞质膜上形成足够大的孔隙以允许抗体通过，但是不会溶解细胞质膜。适于胞质抗原或者质膜上靠近胞质一面的抗原，也适于可溶性的核抗原。
一般的操作程序是先固定后通透，但针对有些水不溶性的目的抗原的检测宜先通透再固定，这样做的原因主要是可以通过通透去除许多水溶性的蛋白，从而大大减少了免疫荧光的背景和非特异性信号。固定后以冷PBS液漂洗，最后以蒸馏水冲洗，防止自发性荧光。

（三）封闭
封闭的目的是为了减少抗体的非特异性结合，最常用的封闭剂为1% BSA, PBS pH 7.5，其他可选择的封闭剂还有 1% gelatin, 1%bovine 或与二抗种属相同的血清（3-10%）等。

（四）抗体孵育
直接免疫荧光法中的一抗和间接免疫荧光法中的二抗都是荧光抗体，因此在这些抗体孵育的时候必须注意避光。此外，为保证结合质量和防止干燥，抗体孵育应尽量在湿盒中进行。

（五）封片及荧光观察
标记好荧光的细胞片原则上可以直接进行观察，特别是有时候封片不当反而使得前功尽弃。但在绝大多数情况下，为了保存结果，以便进一步观察、照像、统计分析等，需作封片处理。常规的方法是采用甘油或中性树脂封片，为了增强封片的效果，往往需要在封片时添加特殊的抗荧光淬灭剂。

（六）标本保存
由于荧光色素和蛋白质分子的稳定性都是相对的，因此随着保存时间的延长，在各种条件影响下，标记蛋白可能变性解离，失去其应有的亮度和特异性。因此给标本的保存带来一定的困难，所以在标本进行荧光染色之后应立即观察。由于性能良好的抗荧光淬灭剂的出现，荧光标记的标本可以在低温（4℃或-20℃）下保存相当长的时间。在某些情形下，考虑到实验的成本及实验条件，也可以采取权宜的办法，比如固定标本片后低温保存，在需要时再进行荧光标记，即随用随染。

❷ 密胺树脂的XRD是什么样的，谁做过

高聚物树脂在做抄XRD时，怎么制备成为袭表面平滑的样品？有的书中介绍使用冷压机冷压制样，可是实验室没有冷压机；有的是说先将聚合物溶解，然后制备成为膜，但是我想通过XRD来分析结晶度，溶解过程会不会改变其结晶性呢？各位高手支招帮助一下吧，不胜感激
495950615
XRD要求样品表面比较平整，因而压制、成膜等方法当然都可以。关键看你想得到的是什么成型条件下的样品的结晶情况，因为不同加工历史和热历史、以及溶剂等处理条件，样品的结晶情况，包括晶型和结晶度等，都会发生很大变化。想做那种成型条件的结晶情况，就用那种热历史和处理条件制样。
如果你只是手里有一些原料，想测得样品的本征信息，可以问一下测试老师能否做粉末样，因为大部分XRD除了可以做平整表面，还可以做粉末样，

hwweven
如果你能把样品磨成粉末，那就可以直接做粉末XRD了。

FL平凡
磨成粉末，然后弄到XRD的载玻片吧...

❸ 位错研究方法有哪些

有多种方法可以观察和研究位错的分布、位错的密度、位错的方向以及确定位错的性质，主要包括：
（1）表面法（即浸蚀法）：通过化学浸蚀、电浸蚀或热浸蚀，将暴露于晶体颗粒表面的位错显示出来。不同类型的位错，其表现有所差异。
（2）缀饰法：在透明晶体内以沉淀颗粒缀饰位错，以显示位错的位置。
（3）透射电子显微镜分析：用它可以以极高放大倍率研究从0.1～0.4μm厚度样品中的位错，这是应用最广泛的一种技术。
（4）X射线衍射法：利用X射线散射的局部差异来显示位错。
（5）场离子显微术：它可以显示单个原子的位置。
在上述分析方法中，应用透射电子显微镜开展的位错研究最为有效和常用，广泛用于观察位错及层错、双晶、晶界及空洞等其他晶体缺陷。
透射电子显微镜技术主要是利用衬度技术获得位错等显微构造的图像，它可以将各种位错的形态类型清楚地显示出来。同时，还可以用衍射花样确定入射电子束及被观察样品部分的结晶学方位。
透射电子显微镜观察所需要的薄片需要特殊的制备工艺，一般需要用很薄的超薄片，其厚度取决于矿物的吸收系数和入射电子能。在100kV要求的厚度为1～0.3μm。电压为1MeV时，厚度为1μm。样品制备过程是先将块状样品切割成薄片，将其一面磨平并抛光，用光学树脂胶（热熔性胶）将样品光面粘在载玻片上，研磨至小于0.03mm左右的薄片，抛光样品表面。然后在光学显微镜和立体显微镜下，选择合适的目标矿物颗粒。用环氧树脂胶在目标样品上粘一个透射电镜专用铜环。固化后，在酒精灯火焰上烤熔样品和载玻片之间的光学树脂胶，取下目标样品。要获得超薄片最有效的办法是离子减薄法，将样品放入离子减薄仪在高真空的条件下用氩离子轰击，进行离子减薄，直至在样品中心穿孔，并出现薄区。然后镀上碳膜即可在TEM下对超薄片或击穿孔薄片的边缘部分进行观察。观察时要求迅速快捷，以防电子辐射损伤严重影响图像。

❹ 怎样用中性树脂封片

晾干后滴在上面两滴中性树脂然后放盖玻片，轻压盖玻片让液滴充满整个玻片，然后晾干，最好晾一个星期再看，不然容易脱落。当然不用油镜的话应该就不用晾那么久了。

❺ 载玻片是什么 如题

您好： 作用：载玻片是用显微镜观察东西诗用来放东西的玻璃片,然后将盖玻片放置其上,用作观察生物.
用法：
1、涂片法是将材料均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法.
涂片材料有单细胞生物、小型藻类、血液、细菌培养液、动植物的疏松组织、精巢、花药等.
涂片时应注意：（1）载玻片必须清洁.（2）载玻片要持平.（3）涂层须均匀.涂抹液滴在载玻片中间偏右,用解剖刀刃或牙签等涂匀.（4）涂层要薄.用另一载玻片作推片,沿滴有涂抹液的载玻片面（二载玻片夹角应为30°-45°）由右向左轻轻推动,涂成均匀一薄层.（5）固定.如需固定可用化学固定剂或干燥法（细菌）固定.（6）染色.细菌用亚甲基蓝,血液用瑞氏染液.染色液要盖住全部涂面.（7）冲洗.用吸水纸吸干或烤干.（8）封片.长期保存用加拿大的树胶封片.
2、压片法是将生物材料置于载玻片和盖片之间,施加一定压力,将组织细胞压散的一种制片方法.
3、装片法是将生物材料采取整体封固制成玻片标本的方法,用此法可制成临时或永久装片.
装片材料有：微小生物如衣藻、水绵、变形虫、水螅,植物的叶表皮；昆虫的翅、足、口器,人的口腔上皮细胞等.
装片法制作时应注意：（1）手持载玻片时,应注意持平,或放在平台上.滴水时水量要适当,以恰好被盖玻片盖满为度.（2）应将材料用解剖针或镊子展开不使重叠,展平在同一平面上.（3）放盖玻片时,从一侧慢慢盖在水滴上,防止出现气泡.（4）染色时,将一滴染色液滴在盖玻片的一侧,用吸水纸从另一侧吸引,使盖玻片下的标本均匀着色.着色后,用同样的方法,滴一滴清水,把染色液吸出后,在显微镜下观察.
4、切片 是用从生物体上切取的薄片制成的玻片标本.
因要求不同,可用刀片进行徒手切片,也可将组织块包埋于石蜡或火棉胶中或以低温冰冻,用切片机切片.切成5～10微米薄片,供光学显微镜观察.用环氧树脂或甲基丙烯酸包埋组织块切制的超薄切片,其厚度在20～50纳米,专供在电子显微镜下观察.一般教学用的如根尖、茎的切片通称石蜡切片.
清理方法：用清水洗或用酒精洗,然后再用棉花或纱布擦干净（最好用擦镜纸,手指避免接触载玻片,以免在其上留下指纹,影响下次观察使用）

❻ 番茄果肉液汁制成的玻片标本是装片还是涂片

1、涂片法是将材料均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法。
涂片材料有单细胞生物、小型藻类、血液、细菌培养液、动植物的疏松组织、精巢、花药等。
涂片时应注意：（1）载玻片必须清洁。（2）载玻片要持平。（3）涂层须均匀。涂抹液滴在载玻片中间偏右，用解剖刀刃或牙签等涂匀。（4）涂层要薄。用另一载玻片作推片，沿滴有涂抹液的载玻片面（二载玻片夹角应为30°-45°）由右向左轻轻推动，涂成均匀一薄层。（5）固定。如需固定可用化学固定剂或干燥法（细菌）固定。（6）染色。细菌用亚甲基蓝，血液用瑞氏染液。染色液要盖住全部涂面。（7）冲洗。用吸水纸吸干或烤干。（8）封片。长期保存用加拿大的树胶封片。

2、压片法是将生物材料置于载玻片和盖片之间，施加一定压力，将组织细胞压散的一种制片方法。

3、装片法是将生物材料采取整体封固制成玻片标本的方法，用此法可制成临时或永久装片。
装片材料有：微小生物如衣藻、水绵、变形虫、水螅，植物的叶表皮；昆虫的翅、足、口器，人的口腔上皮细胞等。
装片法制作时应注意：（1）手持载玻片时，应注意持平，或放在平台上。滴水时水量要适当，以恰好被盖玻片盖满为度。（2）应将材料用解剖针或镊子展开不使重叠，展平在同一平面上。（3）放盖玻片时，从一侧慢慢盖在水滴上，防止出现气泡。（4）染色时，将一滴染色液滴在盖玻片的一侧，用吸水纸从另一侧吸引，使盖玻片下的标本均匀着色。着色后，用同样的方法，滴一滴清水，把染色液吸出后，在显微镜下观察。

4、切片 是用从生物体上切取的薄片制成的玻片标本。
因要求不同，可用刀片进行徒手切片，也可将组织块包埋于石蜡或火棉胶中或以低温冰冻，用切片机切片。切成5～10微米薄片，供光学显微镜观察。用环氧树脂或甲基丙烯酸包埋组织块切制的超薄切片，其厚度在20～50纳米，专供在电子显微镜下观察。一般教学用的如根尖、茎的切片通称石蜡切片。

❼ 怎样制作 玻片标本(答案)

取载玻片，点液，加盖玻片，压实，OK

❽ 中学常用的四种制载玻片的方法

1、涂片法是将材料均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法。
涂片材料有单细胞生物、小型藻类、血液、细菌培养液、动植物的疏松组织、精巢、花药等。
涂片时应注意：（1）载玻片必须清洁。（2）载玻片要持平。（3）涂层须均匀。涂抹液滴在载玻片中间偏右，用解剖刀刃或牙签等涂匀。（4）涂层要薄。用另一载玻片作推片，沿滴有涂抹液的载玻片面（二载玻片夹角应为30°-45°）由右向左轻轻推动，涂成均匀一薄层。（5）固定。如需固定可用化学固定剂或干燥法（细菌）固定。（6）染色。细菌用亚甲基蓝，血液用瑞氏染液。染色液要盖住全部涂面。（7）冲洗。用吸水纸吸干或烤干。（8）封片。长期保存用加拿大的树胶封片。

2、压片法是将生物材料置于载玻片和盖片之间，施加一定压力，将组织细胞压散的一种制片方法。

3、装片法是将生物材料采取整体封固制成玻片标本的方法，用此法可制成临时或永久装片。
装片材料有：微小生物如衣藻、水绵、变形虫、水螅，植物的叶表皮；昆虫的翅、足、口器，人的口腔上皮细胞等。
装片法制作时应注意：（1）手持载玻片时，应注意持平，或放在平台上。滴水时水量要适当，以恰好被盖玻片盖满为度。（2）应将材料用解剖针或镊子展开不使重叠，展平在同一平面上。（3）放盖玻片时，从一侧慢慢盖在水滴上，防止出现气泡。（4）染色时，将一滴染色液滴在盖玻片的一侧，用吸水纸从另一侧吸引，使盖玻片下的标本均匀着色。着色后，用同样的方法，滴一滴清水，把染色液吸出后，在显微镜下观察。

4、切片 是用从生物体上切取的薄片制成的玻片标本。
因要求不同，可用刀片进行徒手切片，也可将组织块包埋于石蜡或火棉胶中或以低温冰冻，用切片机切片。切成5～10微米薄片，供光学显微镜观察。用环氧树脂或甲基丙烯酸包埋组织块切制的超薄切片，其厚度在20～50纳米，专供在电子显微镜下观察。一般教学用的如根尖、茎的切片通称石蜡切片。

❾ 昆虫树脂标本如何制作

工具/原料：ab树脂胶、硅胶磨具、一次性塑料水杯、电子天平等，制作流回程如下：答

1、准备好一个一次性杯子和一个大小合适的模具。

❿ 把载玻片和压玻片粘在一起的胶水可以是普通胶水吗怎么粘

那不是胶水。。。。
用的是树脂或者蜡。