大孔树脂柱层析如何洗脱

① 求解大孔吸附树脂水洗除杂的步骤谢谢！！急！

吸附树脂装柱：湿法装柱，先于吸附柱中加入一定量的纯水，然后加入树脂，也可水与内树脂同时加入柱内，这样容可以防止气泡产生
吸附树脂柱预处理：可用2倍体积1mol/l的碱液过柱，水洗至中性，后再用2倍体积1mol/l酸液过柱，水洗至中性（根据所要吸附物料的PH值大小，选择酸碱加入的顺序）。也可使用甲醇、乙醇有机溶液洗剂（效果更好）
树脂再生：根据吸附的物料性质，若吸附碱性物质，则选择酸解析，若吸附酸性物质，则选择碱解析（酸碱加热解析效果更好），若酸碱都不易解析，可选择醇溶液解析

树脂运行过程中，要注意保证树脂层上必须有液体存在，防止液体流干，出现干柱，产生偏流现象，影响吸附效果；选择合适的再生剂，否则树脂性能下降很快；吸附过程要注意流速，不可过快

暂时想到这么多，有问题可以随时找我

② 请问用柱层析法分离乙酸乙酯中的生物碱成分，应该用什么洗脱剂

乙酸乙酯层最常用的是氯仿：甲醇。氯仿：乙酸乙酯：甲醇。

③ 大孔树脂的预处理

大孔吸附树脂是一类有机单体加交联剂、致孔剂、分散剂等添加剂聚合而成,
因而购来的树脂要除去可能存在的毒性有机残留物。具体方法为,首先使用饱和食盐水（工业用）,用量约等于被处理树脂的2 倍,将树脂置于食盐中浸泡18～20 h ,然后放尽食盐水,用清水漂洗净,使排出的水不显黄色,再用2 %～4 %氢氧化钠(或5 %盐酸) 溶液(其量与上同) 浸泡2～4h(或小流量清洗) ,放尽碱或酸液后冲洗树脂直至水接近中性待用。实验室用常用>95%的乙醇。 以乙醇湿法装柱，继续用乙醇在柱上流动清洗，不时检查流出的乙醇，至与水混合不呈白色混浊为止(取1 mL乙醇液加5 mL水)。然后以大量的蒸馏水洗去乙醇，备用。少量乙醇存在将会大大降低树脂的吸附力。
3. 再生树脂柱经反复使用后,树脂表面及内部残留许多非吸附性成分或杂质使柱颜色变深,柱效降低,因而需要再生,一般用95 %乙醇洗至无色后用大量水洗去醇化即可。如树脂颜色变深可用稀酸或稀碱洗脱后水洗。如柱上方有悬浮物可用水、醇从柱下进行反洗可将悬浮物洗出,经多次使用有时柱床挤压过紧或树脂颗粒破碎影响流速,可从柱中取出树脂,盛于一较大容器中用水漂洗除去小颗粒或悬浮物再重新装柱使用。
将样品溶于少量水中加至柱的上端，也可以将样品先溶于少量乙醇中，拌入适量树脂，挥去乙醇后，再将拌有样品的树脂加到柱上。先用水，继而以乙醇-水洗脱，逐步加大醇的浓度，同时配合高效液相色谱法作指导。一般用95%的乙醇洗脱至无色时，树脂柱即已再生，然后以大量水洗去醇，即可进行下一次的提取分离。经反复使用后，吸附树脂颜色变深，吸附效果下降时，可用0.01%～1 mol/L NaOH(或HCl)洗涤或浸泡适当时间，至树脂接近原颜色为宜，继用蒸馏水洗至中性即可再用。如果柱上方沉积有悬浮物，影响流速，可用水从柱上进行反洗，以便把悬浮物顶出。经多次使用后，有时柱床挤压过紧，或树脂颗粒部分破碎而影响流速，可从柱中取出树脂，盛于一个较大容器中用水漂洗除去小颗粒和悬浮杂质，再重新装柱。大孔吸附树脂应湿态保存，若部分颗粒暴露在空气中失水，在进行水溶性杂质分离时，失水后被空气填充的颗粒会浮于水面，此时将上浮树脂用乙醇处理，将树脂内部的空气排出后使用。

④ 大孔吸附树脂洗脱蛋白的方法

蛋白质应该用离子交换树脂或凝胶柱洗脱啊，大孔树脂的层析原理不适合蛋白质
大孔树脂具有分子筛的作用，分子越小越容易洗脱，越大越难洗，蛋白质分子量很大

⑤ 如何使用三菱化学大孔吸附树脂hp20进行柱层析

上样
吸附前的药液应为溶液状态，不能有大量沉淀产生，以免堵塞树脂微孔，减少使用寿命，影响分离效果。尽可能保持分离过程中的柱温及洗脱液流速，从而使实验结果具有良好的重现性。选择不同溶剂做洗脱溶媒，梯度洗脱，或通过调节洗脱剂的pH值变化，以达到对不同物质的分离。溶剂洗脱能力强弱顺序为：丙酮 ＞甲醇＞ 乙醇 ＞水树脂的再生 树脂经过多次使用后，发现其吸附能力有所减弱，需再生处理后继续使用。使用甲醇、丙酮、水的反复再生处理，即可恢复树脂的吸附能力。 树脂经过几次简单再生使用后如果吸附性能下降较多时需强化再生：先用不同浓度的有机溶剂洗脱后，反复用大体积稀酸稀碱溶液交替强化洗脱，然后用水洗至PH值中性即可使用。

⑥ 做大孔吸附树脂纯化试验，考察不同浓度洗脱剂洗脱效果具体怎么操作

与食品药品相关的产品尽量选择乙醇！
至于上样量最好做一下静态吸附实验！
做完静态试验你的上样量就能把握住！
最好是梯度洗脱先高后低同一批就行！

⑦ 用乙醇洗脱大孔树脂上的吸附的原理

大孔树脂吸附的是分子态的物质,乙醇洗脱就是和大孔树脂进行对分子态的物质竞争吸附,使物质转为溶解于乙醇,从而被乙醇洗脱液带走

⑧ 大孔树脂吸附原理

大孔树脂吸附原理：

大孔树脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附质) 之间的范德华引力，通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作，使有机化合物根据有吸附力及其分子量大小可以经一定溶剂洗脱分开而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的。

大孔吸附树脂为吸附性和筛选性原理相结合的分离材料。大孔吸附树脂的吸附实质为一种物体高度分散或表面分子受作用力不均等而产生的表面吸附现象，这种吸附性能是由于范德华引力或生成氢键的结果。

同时由于大孔吸附树脂的多孔性结构使其对分子大小不同的物质具有筛选作用。通过上述这种吸附和筛选原理，有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附树脂上经一定的溶剂洗脱而达到分离的目的。

(8)大孔树脂柱层析如何洗脱扩展阅读：

大孔树脂吸附的用途：

大孔吸附树脂吸附技术最早用于废水处理、医药工业、化学工业、分析化学、临床检定和治疗等领域，近年来在我国已广泛用于中草药有效成分的提取、分离、纯化工作中。

与中药制剂传统工艺比较，应用大孔吸附树脂技术所得提取物体积小、不吸潮、易制成外型美观的各种剂型，特别适用于颗粒剂、胶囊剂和片剂，改变了传统中药制剂的粗、黑、大现象，有利于中药制剂剂型的升级换代，促进了中药现代化研究的发展。

国家中医药管理局等单位联合发布的2002~2010《医药科学技术政策》明确提出：研制开发中药动态逆流提取、超临界萃取、中药饮片浸润、大孔树脂分离等技术。

⑨ 大孔吸附树脂用于白头翁皂苷的分离时洗脱次序有何规律

大孔吸附树脂用于白头翁皂苷的分离时洗脱次序规律为：分离、纯化、除杂、浓缩。

以酒精为例，酒精溶剂浸提得到较粗的白头翁总皂苷，脱脂后，经大孔树脂层析得到高产，高纯的白头翁总皂苷，得率为9.4%。总皂苷经硅胶柱层析得到无色的,纯度较高的单体皂苷,得率为22.8%。

通过薄层层析把纯化的单体皂苷与标准品白头翁皂苷Ⅲ进行对照，分离纯化的单体皂苷与标准品相同，是3-O-[α-L-鼠李糖基(1→2)-α-L-阿拉伯糖苷]-3β，23-羟基-△20(29)-羽扇豆烯-28-O-[α-L-鼠李糖基(1→4)-β-D-葡萄糖基(1→6)]-β-D-葡萄糖酯苷。

大孔吸附树脂吸附机理

大孔吸附树脂的吸附实质为一种物体高度分散或表面分子受作用力不均等而产生的表面吸附现象，这种吸附性能是由于范德华引力或生成氢键的结果。同时由于大孔吸附树脂的多孔结构使其对分子大小不同的物质具有筛选作用。

通过这种吸附和筛选原理，有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附树脂上经一定溶剂洗脱而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的。

非极性物质在极性介质+(水)+内被非极性吸附剂吸附，极性物质在非极性介质中被极性吸附剂吸附，带强极性基团的吸附剂在非极性溶剂里能很好的吸附极性化合物。

聚苯乙烯树脂一般适用于非极性和弱极性物质的化合物，如皂苷类和黄酮类；聚丙烯酸类树脂，一般带有酯基或酰氨基，对中极性和极性化合物如黄酮醇和酚类的吸附较好。

参考资料来源：网络-大孔吸附树脂

⑩ 大孔树脂洗脱几个柱体积

5倍柱体积。
大孔树脂处理方法步骤：
1、新树脂用95%乙醇冲至无浑浊。
2、蒸馏水冲至无醇味，大概5倍柱体积。
3、5-10%HCL2-3倍柱体积浸泡。
4、蒸馏水冲至流出液pH等于7。
5、5-10%NaOH2-3倍柱体积浸泡6、蒸馏水冲至流出液pH等于7备用，而长时间不用保存，待活化后，再用95%乙醇浸泡。