⑴ 生物制药设备的清洁
生物制药设备的清洁
摘要：生物制药设备因其药品本身成分和生产过程的特殊性，具有比一般药品设备更容易形成残留物，更难清洁的特性。
2010版药品生产质量管理规范(GMP)明确要求了清洁方法应当经过验证，证实其清洁的效果，以有效防止污染和交叉污染。
本文旨在对最近各类现行法规对清洁验证的要求，生物制药设备的清洁剂的选择和清洁方法的开发，检测方法的确定，清洁周期的确定及再验证，做一系统性综述。
关键词：清洁验证; 生产设备; 生物制品
生物制品具有成分复杂，易变性，使用的原辅料多为生物活性物质，去除无效成分过程复杂，最终制品要求无菌，设备清洁难度较大的特点。
其整个生产过程存在较高的风险。
为了保证制品的安全，有效，最终无菌，必须做好清洁验证。
生物制品生产工艺较为复杂，一般包括：细胞复苏，病毒培养，病毒收获，浓缩，纯化，(灭活)，配制，灌装，冻干，包装等步骤，不同的工艺步骤需要使用不同的生产设备。
一般认为与产品(中间品)直接接触的设备为关键生产设备，比如发酵罐，配制罐，灌装机等等。
本文就各类法规对清洁验证要求进行总结，并对生物制品生产设备清洁验证过程中的清洁方法的确定，检测方法的确定，清洁周期的确定及再验证进行探讨。
1、各类法规对清洁验证的要求：
《药品生产质量管理规范(2010年修订)》已经于2011年3月1日施行，要求制药企业保证生产设备洁净。
GMP第一百四十三条规定：“清洁方法应当经过验证，证实其清洁效果，以有效防止污染和交叉污染。
清洁验证应当综合考虑设备使用情况，所使用的清洁剂和消毒剂、取样方法和位置以及相应的取样回收率，残留物的性质和限度、残留物检验方法的灵敏度等因素。”[1]根据美国联邦法规CFR 211的规定：“制药企业需要在适当的时间间隔内，对设备和器具按照官方或其他已制定的规范进行清洁、维护和消毒，防止那些能改变药物产品的安全、特性、浓度、质量、纯度的故障或交叉污染，从而保证药品的质量。”
国家FDA检查药品生产设备时，将以GMP为依据，要求制药企业提供有效的、连续的清洁验证数据及报告，能够证明一个特定的清洁程序能一贯地在某个预先确定的限度内清洁设备;取样和分析方法必须具有科学性和提供足够的科学基本原理来支持此验证。
WHO GMP 第155条对清洁验证的原则是：清洁方法应该经过验证，证实其清洁的效果，以有效防止污染和交叉污染。
清洁验证应综合考虑设备的使用情况，所使用的清洁剂和消毒剂，取样方法和位置，以及相应的取样回收率残留物的性质和限度，残留物检验方法的灵敏度等因素。[2]
2 、生物制药设备的清洁剂的选择和方法的开发
2.1在实施清洁和清洁验证时，选择合适的清洁剂和清洁方法是清洁验证中最关键的第一步。
首先要考虑的是选择何种清洁剂。
对于清洁剂的选择，一般情况应基于对最难清洁的物质进行分析，该物质可能是药物的活性成分，也可能是药品的辅料。
根据生产工艺的不同，以及生产设备的不同，最难清洁的物质是不一而同的。
清洁剂的选择应依据设备及残留物的具体情况而定。
必须考虑清洁剂的安全，无危害性，对设备无腐蚀性，易于清洗并有足够灵敏的方法检测清洁剂的残留。
另外，还应注意到水的影响，水的性质，纯度，硬度对清洁剂的清洁效果产生影响。
[3]一般生物制药设备的清洁剂有纯化水，1%～2%的强碱溶液 (去除蛋白质类残留)，1%～2%的碳酸钠溶液 ，乙醇，注射用水(最后一遍清洗时)等。
2.2工艺设备的清洁方式，通常可分为手工清洁方式和自动清洁方式，或者两者的结合。
清洁方式的选择应综合考虑设备的材质，结构，设备的用途和清洁效果等各个方面。
手工清洗的主要特征是人持清洁工具对设备进行清洁，通常需要将设备拆卸到一定程度，并转移到指定区域，比较繁琐，人为影响因素较多。
但是某些清洁设备或区域只能进行人工清洗。
比如一些小容积的发酵罐，需要拆卸后进行清洁。
自动清洗(CIP)是指设备按照一定的程序自动完成清洁，对设备要求较高，但是自动清洗的重现性较好。
2.3制定清洁方法的SOP一般应该包括：清洁的范围和对象，责任人，洁具，清洁剂和消毒剂，是否为在线清洗，设备是否需要拆卸 ，清洗过程的步骤指导，清洁过程的监控和记录，清洁后如何检查，清洁的合格标准，清洗后的.设备如何存放，存放的有效期。
3清洁后的检测方法
3.1在选定清洁剂和清洁方法进行清洁后，还应对清洗效果进行检测。
对清洗后设备的取样一般有最终淋洗水取样和擦拭取样两种。
取样完毕后则需要对样品进行检测，对于非关键设备，尤其是专用设备，一般只要求清洁后无可见残留物即可。
对于一些简单的生物制药设备，其清洗方法为使用一定浓度的氢氧化钠处理，对应的检测方法是通过对最终淋洗水的PH的测定，来判定其是否已经达到清洗的合格标准。
对于一些关键设备，尤其是在线清洁的设备，则采取总有机碳(TOC)检测方法，通过检测水中有机碳的含量来推测水中杂质的含量，这种方法被广泛应用于清洗效果检测中，而且TOC检测方法具有省时，省力，节能减排的优势[4].
3.2清洁验证的分析对象是残留物，清洁验证中所用的分析方法也需要进行方法学验证，若采用的是国家药典标准，该方法的验证可以省略，但是需要对检验方法和检验仪器的系统适应性进行验证。
清洁验证中的残留物的检测一般为定量或限量检测方法，依据药典标准，其分析方法学验证的内容应包括：方法的专属性、准确度、精密度(重复性、中间精密度)线性和范围、检测度和定量限等等。[5]
4清洁有效期的确定及再验证
4.1 清洁的有效期的确定
清洁有效期的验证一般按以下方法进行：清洁结束后按照清洁规程对设备进行干燥，储存，储存期间每隔一段时间在不同的最难清洁部位连续取样，检查微生物残留限度，当微生物测定结果接近微生物残留标准时，此时设备保持清洁的时间即为清洁的有效期，之后的生产过程中清洁后的设备不应超过此有效期。
4.2再验证
如果清洁剂浓度或品种改变，或清洁程序有重大修改，增加生产相对更难清洁的产品或者生产的产品改变，设备有重大变更，已经到了设备清洁规程规定的再验证周期，等情况，都应进行再验证，以保证清洁有效和生物制品的质量安全。
参考文献：
[1]药品生产质量管理规范2010版[S]
[2]WHO清洁验证指南TRS-937版[S]
[3]周庆凯.孙巍.曹凤兰.杭太俊.关于药品GMP生产设备的清洁验证的探讨[J].海峡药学，2011，23(12)258-259.
[4]王燕.梁毅.在线总有机碳分析应用于清洁验证的可行性研究[J].机电信息，2010，23：24-29..
[5]陈雯秋.清洁验证中的分析方法验证[J].中国药业，2005，14(4)：17-19.
⑵ 专业水箱清洗后水质取样时间多久
24小时。
根据《城市供水水质管理脊誉规定》散纯规定，物业公司应每半年清洗一次供水水箱，清洗 后24小时内取水样，送专业检测单位进行检验，要求检验合格并出具检樱掘段验报告，直饮水系 统可参照此规定。
⑶ 水样的采集与保存
水样的分类，
综合水样
把从不同采样点同时采集的各个瞬时水样混合起来所得到的样品称作“综合水样”
为几条排污河渠建设综合处理厂，从各个河道取单样分析就不如综合样更为科学合理，因为各股污水的相互反应可能对设施的处理性能及其成分产生显著的影响
瞬时水样
混合水样
是指在同一采样点上于不同时间所采集的瞬时样的混合样叫做时间混合样
按一定的流量采集适当比例的水样混合而成叫做流量比例混合样(可以使用流量比例采样器)
平均污水样
在排放流量不稳定的情况下，可将一个排污口不同时间的污水样，按照流量的大小，按比例混合，可得到称之为平均比例混合的污水样
其他水样
地表水和地下水样的采集
水样的类型
表层水(采样时注意不能混入漂浮于水面上的物质)
一定深度的水(需使用直立式或有机玻璃采水器)
泉水，井水(需将停滞在抽水管的水汲取出，新水更替之后，在进行采样)
自来水或抽水设备中的水(需先放水几分钟，将旧水和杂质排除)
地表水采样的注意事项
不可搅动水地部的沉积物，
保证位置精确，
认真填写水质采样记录表，
保证采样按时，准确，安全，
采样结束前，应核对计划，记录与水样，如有错误，立即重新采取，
如采样现场水体很不均匀，无法采到代表性样品，则要相信记录情况和实际采样情况，参考数据，将现场向上级或者环境保护行政主管部门反应，
测定油类水样，应在水面至水的表面下300mm采样柱状水样，并单独采样，全部用于测定
测溶解氧，生化需氧量和有机污染物等项目时的水样，必须注满容器，不留空间，并封口
如果水样中含沉降性固定，则应分离除去，
水质采样记录
一般包括采样现场描述和现场测定项目两部分。
水温，PH，DO，透明度，电导率，氧化还原单位，浊度，水样感官指标的描述(颜色和气味)，水文参数，气象参数，
污水采样
采样频次
监督性监测，企业自控监测，对于污染治理，环境科研，污染源调查和评价等工作中的污水检测，根据管理需要进行调查性监测，代表性监测
污水采样方法
污水的监测项目按照行业类型有不同要求
不同检测项目的要求
自动采样
实际采样位置的设置
注意事项
采样容器至少冲洗三次再采样，采样时应去除水面的杂物，垃圾等漂浮物，测定悬浮物，硫化物等水样时需要单独定容采样，全部用于测定，在使用特殊采样器采样时应按照该采样器的使用方法采样，采样时应认真填写记录表，凡需现场监测的项目，应进行现场监测
污水采样时的流量测量
流量测量原则
流量测量方法
污水流量计法
容积法
流速仪法
量水槽法
溢流堰法
统计法
水样的保存与运输
水样的保存，
导致水质变化的因素有生物因素，化学因素，物理因素。
水样的保存方法
冷藏或冷冻，样品在4℃冷藏或将水样迅速冷冻，贮存于暗处，可以抑制生物活动，减缓物理挥发作用和化学反应速度
加入化学保存剂，
控制溶液PH，加入抑制剂，加入氧化剂，加入还原剂，
水样的管理与运输
摘自<水和废水监测分析方法>
⑷ 环境监测类 采集测定微生物水样和油类水样时，采样设备和容器为什么不能用水样清洗
先说采油。正确的采法是用采水面下30cm处的水样。因为水表面可能有一层油膜。用玻璃瓶装水版样。瓶子不能用权水样清洗。因为如果清洗会导致容器壁上留有水样中的一些油的成份。这样你下次你再用这个容器采水样可能就会导致油偏高。
微生物不知道你指的是什么项目。如果是细菌项目就跟油类是同理。
⑸ 纯化水取样方法及注意事项有哪些
1.纯化水的取样点选择的正确性
纯化水取样必须要选择有代表性的取样点为之后的纯化水检测提供更精确的数据基础；同时在取样之前应该让取样点有15秒以上的纯化水排出，等到
水流稳定之后方可取样。这样可以避免采集到受取样点污染的纯化水。
2.纯化水取样容器的洁净性
针对不用纯化水检测要求需要采用不同的纯化水设备取样容器处理方法如：
a、阳离子、全硅分析用取样瓶处理方法：将3瓶500 mL的纯净水瓶子或盛过优级纯以上纯度的盐酸瓶子，用1mol盐酸浸泡过夜之后，用超纯水清洗10
次以上（每次以150 mL左右纯水用力摇晃1分钟弃之再重复清洗），注满纯水并用以纯水清洗干净的瓶盖封严，静泡过夜。
b、阴离子及颗粒分析用取样瓶处理方法：将3瓶500 mL的纯净水瓶子或盛过优级纯以上纯度的H2O2瓶子，用1mol NaOH溶液浸泡过夜之后，清洗同1.)
c、细菌及TOC分析用取样瓶处理方法：将3瓶50 mL-100 mL的磨口玻璃瓶子以重铬酸钾硫酸洗液充满加盖酸浸泡过夜之后，用超纯水清洗10次以上（每
次用力摇晃1分钟弃之再重复清洗），并用以纯水清洗干净的瓶盖封严，后置入高压灭菌锅中进行高压蒸汽灭菌30分钟
3.纯化水取样方法的正确性
a、阴、阳离子及颗粒分析用取样瓶，在正式取样前，倾出瓶中水以超纯水重新清洗10次以上，一次性注入350-400mL超纯水，并用以纯水重新清洗干
净的瓶盖封严。用洁净的塑料袋封严。
b、细菌及TOC分析用取样瓶，在正式取样时，倒出瓶中水，立即以超纯水充满取样瓶，并以灭过菌的瓶盖立即封严，用洁净的塑料袋封严。
⑹ 清洁验证的取样方法
⑴ 擦拭取样法
是在假定污染物均匀分布于设备表面的基础上进行的。取样时，取样者用一根末端带有一种惰性材料（通常是药棉或类似物）的取样棒进行擦拭。通常是把取样棉签的一面压在取样点上，按第一步图示缓慢有力地擦拭设备表面。然后按第二步图示以取样棉签的另一面进行擦拭 。 取样点的面积是不固定的，可根据设备的种类不同而有所改变。通常的擦拭面积是 10×10cm²。
优点：可通过物理的擦拭对那些已经干燥的或者不溶的残留取样，
可对最难清洁并能触到的地方进行评估。
缺点：有些地方（如管道）无法取样。假定污染物在表面均匀分布，而实际上污染物分布总是不均匀的。必须由取样面积推算至整个面积。必须检查从设备表面到棉签和从棉签到溶液的提取效率，因为擦拭取到的污染物，在实验室里可能不能将其释放到提取溶液中。
取样要求
要求设备表面材料的取样回收率已知 ，且与取样方法之间不存在干扰。每台设备至少3个取样点，取样点应有代表性。
选择取样点
取样点的选择原则是：取样点要能表明污染物的分布，可通过取样点来推断评估设备表面上的残留量。所以应考虑设备中，不当的清洁操作可能导致不可接受的风险的区域或部位：包括高浓度区域，难以清洁的区域，被污染后可能污染产品的区域，与产品接触的残留物均匀分布的表面，残留物料会均一的分布在下一批产品中的位置。如关键点、热点、均一表面。
热点：物料会均一的分布在下一批产品中的位置，如搅拌桨，其上的残留物会在生产下一批产品时溶解出来，分布在下一批产品中造成交叉污染。
关键点：不当清洁操作可能导致不可接受的风险的设备区域或部位，包括高浓度区域，难以清洁的区域，被污染后可能污染产品的区域，如压片机的冲头。
均一表面：与产品接触的表面，残留物会均匀的分布于其上。
⑵ 淋洗取样法
是一种间接的取样方法，可以对大面积难以到达的系统或日常不能拆卸的部分进行取样。可以对清洗液残留进行非专属 、简单的测试。由于残留物或污染物可能不溶或滞留在设备内，因此淋洗取样的清洁证据不够充分，应与擦拭法结合使用。
此法较适用于检测清洁剂残留。
⑶空白批法
空白批法是指生产一个空白批然后检测前批产品在其中的残留。此法应与淋洗和/或擦拭取样接合使用。其缺点是很难保证污染物可以均匀地从设备表面脱落，且费钱费力，不常用。
⑷微生物取样和评估
微生物评估与化学评估同样重要，在企业的验证策略中应包括微生物风险评估分析。应考虑待清洁设备的存放时间，已清洁设备的存储时间和条件。在任何情况下，设备在清洁后都不应有积水残留。
原文http://bbs.sdatc.com/read.php?tid=150610
⑺ 纯化水设备系统在纯化水取样过程中有哪些注意事项并说明原因
纯化水的取样方法及容器和处理
1、纯化水的取样方法因测试项目、要求技术指标的不同而变化。
对非在线测试：预先采好水样，尽早上机分析。水样的采集必须选择有代表性的采样点。取样点的选择直接关系到检测数据的结果。
2、容器的准备
a、对于硅、阳离子、阴离子、微粒的取样，须使用聚乙烯塑料容器。
b、 对于总有机碳、细菌的取样，必须使用带磨口塞的玻璃瓶 。
3、取样瓶处理方法
a、阳离子、全硅分析用取样瓶处理方法：将3瓶500 mL的纯净水瓶子或盛过优级纯以上纯度的盐酸瓶子，用1mol盐酸浸泡过夜之后，用超纯水清洗10次以上（每次以150 mL左右纯水用力摇晃1分钟弃之再重复清洗），注满纯水并用以纯水清洗干净的瓶盖封严，静泡过夜。
b、阴离子及颗粒分析用取样瓶处理方法：将3瓶500 mL的纯净水瓶子或盛过优级纯以上纯度的H2O2瓶子，用1mol NaOH溶液浸泡过夜之后，清洗同1.)
c、细菌及TOC分析用取样瓶处理方法：将3瓶50 mL-100 mL的磨口玻璃瓶子以重铬酸钾硫酸洗液充满加盖酸浸泡过夜之后，用超纯水清洗10次以上（每次用力摇晃1分钟弃之再重复清洗），并用以纯水清洗干净的瓶盖封严，后置入高压灭菌锅中进行高压蒸汽灭菌30分钟
4、取样方法
a、 阴、阳离子及颗粒分析用取样瓶，在正式取样前，倾出瓶中水以超纯水重新清洗10次以上，一次性注入350-400mL超纯水，并用以纯水重新清洗干净的瓶盖封严。用洁净的塑料袋封严。
b、 细菌及TOC分析用取样瓶，在正式取样时，倒出瓶中水，立即以超纯水充满取样瓶，并以灭过菌的瓶盖立即封严，用洁净的塑料袋封严。
⑻ 污水厂化验取水样应注意什么
污水厂化验取水样注意事项
（1）采样时，除生物检测项目的盛装容器外，其它应在采内样时涮洗1～2次。用样品容容器直接采样时，必须用水样冲洗三次后再行采样。但当水面有浮油时，采油的容器不能冲洗。
（2）采样时应注意除去水面的杂物、垃圾等漂浮物。
（3）采样时应认真填写“污水检测委托合同单”