㈠ 请教T淋巴细胞活化所用的刺激因子
用50-100ng/ml PMA和1µg/ml 离子霉素刺激,可以使T淋巴细胞活化，回你 最好找一下资料，看t淋巴细胞活化后，CD25+在 细胞表面表答达的 时间是长还 是 短，如CD4+，6－8小时就 可以了，还 有我 的 记忆中 正常人血中CD25+T应该没有占到T细胞的54%-86%，你 最好找一下资料
㈡ 请教调节性T细胞系列6-FOXP3的胞内染色步骤
T细胞胞内染色前为什么需要离子霉素和佛波酯是G蛋白偶联受体的信号转导通路版中的一种途径,在[1]信号通权路中胞外信号分子与细胞表面G蛋白耦联型受体结合,激活质膜上的磷脂酶C（PLC-β）,使质膜上4,5-二磷酸磷脂酰肌醇（PIP2）水解成1,4,5-三磷酸肌醇（IP3）和二酰基甘油（DG）两个第二信使,胞外信号转换为胞内信号,这一信号系统又称为“双信使系统”（DoubleMessengerSystem）.IP3与内质网上的IP3配体门钙通道结合,开启钙通道,使胞内Ca2+浓度升高.激活各类依赖钙离子的蛋白.用Ca2+载体离子霉素（ionomycin）处理细胞会产生类似的结果.DG结合于质膜上,可活化与质膜结合的蛋白激酶C（ProteinKinaseC,PKC）.PKC以非活性形式分布于细胞溶质中,当细胞接受刺激,产生IP3,使Ca2+浓度升高,PKC便转位到质膜内表面,被DG活化,PKC可以使蛋白质的丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化视不同的细胞产生不同的反应,如细胞分泌、肌肉收缩、细胞增殖和分化等.DG的作用可用佛波醇酯（phorbolester）模拟.
㈢ T细胞胞内染色前为什么需要离子霉素和佛波酯
T细胞胞内染色前为什么需要离子霉素和佛波酯
是G蛋白偶联受体的信号转导通路中专的一种途径,在属[1]信号通路中胞外信号分子与细胞表面G蛋白耦联型受体结合,激活质膜上的磷脂酶C（PLC-β）,使质膜上4,5-二磷酸磷脂酰肌醇（PIP2）水解成1,4,5-三磷酸肌醇（IP3）和二酰基甘油（DG）两个第二信使,胞外信号转换为胞内信号,这一信号系统又称为“双信使系统”（Double Messenger System）.
IP3与内质网上的IP3配体门钙通道结合,开启钙通道,使胞内Ca2+浓度升高.激活各类依赖钙离子的蛋
白.用Ca2+载体离子霉素（ionomycin）处理细胞会产生类似的结果.
DG结合于质膜上,可活化与质膜结合的蛋白激酶C（Protein Kinase C,PKC）.PKC以非活性形式分布于细胞溶质中,当细胞接受刺激,产生IP3,使Ca2+浓度升高,PKC便转位到质膜内表面,被DG活化,PKC可以使蛋白质的丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化视不同的细胞产生不同的反应,如细胞分泌、肌肉收缩、细胞增殖和分化等.DG的作用可用佛波醇酯（phorbol ester）模拟.