① 15ml,10kd超滤管转速要多大
1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10kD)。
通常应截版留分子量不应大于权目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。
2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。
注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开
离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测!膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
② 超滤分子量在10-30KD的蛋白,用外压膜好还是内压膜好
都一样抄的,超滤水是把细菌等物袭质过滤在膜外,而水通过膜,而超滤蛋白你可以选择多少以上的被截留,以下的通过膜而被纯化,这取决于你的杂蛋白的分布范围,如果你的杂蛋白分布主要是小分子量的,目的蛋白较大,你也可以选择杂蛋白通过而目的蛋白被截留在膜上,然后洗涤膜后洗脱蛋白纯化
③ 过滤膜 的孔径大小,10kd 的蛋白选用多少的孔径过滤
第一超滤管达不来到100%的与孔径源完全一致。任何滤膜都达不到和标称孔径完全一致,只能是无限的接近孔径。 其二分子量是质量,而孔径是长度单位,原则上不具有匹配性。原因是,标的物的结构会直接影响过滤精度。球状的和链状的,分子量相同,但是用相同孔径可以截住球状的,而链状的就会透过去。 因此,两者之间没有绝对的联系。
早上好,这个看你要过滤的材料要求了。如果是低黏度的,通常选择小孔径的比如0.22,如果是高黏度的,一般选择0.8或者更高的,特别粘稠比如甘油那样超过300cps的就不要过滤了……含有大量固体颗粒的,请先选择二级过滤,比如先用0.8再用0.45,直接用0.45或者0.22将会导致过滤器压力急剧升高爆膜掉。你是要过滤水相,还是有机相的?
④ 做超滤实验时,超滤膜上标的10KD、30KD单位如何对应分子的大小是否单位越大,超滤得到的物质分子越小
首先与超滤膜的材质有关,比如聚醚砜的和再生纤维的,同样是10KD的,截流能力专是不相同的属,一般要求在截流分析量的2倍-5倍以上方可实现良好的分离,同时不同公司的超滤膜本身应该有自己的说明的,参照说明要求即可。
⑤ 蛋白大小为27.8kd,应该用多大的超滤管截流
3KD指的是截留分子量
截留分子量(MWCO:molecular weight cutoff)是使用分子量大小表示的超滤膜的内截留性能,又称容作切割分子量。
由于直接测定超滤膜的孔径相当困难,所以使用已知分子量的球状物质进行测定。如膜对被截留物质的截留率大于90%时,就用被截留物质的分子量表示膜的截留性能,称为膜的截留分子量。实际上,所使用的物质并非绝对的球形,由于试验条件的限制,所测定的截留率也有一定的误差,所以截留分子量不能绝对表示膜的分离性能。也就是说3KD分子量的产品有可能透过膜也有可能被膜拦截,一般来说希望3KD的产品全部透过,需要选择截留分子量更大的膜,比如5KD
⑥ 蛋白分子量为45KD应选用截留分子量30kd的超滤管合适吗
超滤膜上标的10KD、30KD都是指截留率.单位越大,超滤得到的物质分子也越大.
⑦ 10k的超滤管能截住50nm的颗粒吗
3KD指的是截留分子量
截留分子量(MWCO:molecular weight cutoff)是使用分子量大小表示的超滤内膜的截留性能,又称作容切割分子量。
由于直接测定超滤膜的孔径相当困难,所以使用已知分子量的球状物质进行测定。如膜对被截留物质的截留率大于90%时,就用被截留物质的分子量表示膜的截留性能,称为膜的截留分子量。实际上,所使用的物质并非绝对的球形,由于试验条件的限制,所测定的截留率也有一定的误差,所以截留分子量不能绝对表示膜的分离性能。也就是说3KD分子量的产品有可能透过膜也有可能被膜拦截,一般来说希望3KD的产品全部透过,需要选择截留分子量更大的膜,比如5KD
⑧ 要50kd的蛋白用什么规格的超滤管
截留分子量5万道尔顿的超滤膜。
⑨ 超滤离心管 50kd能过滤抗体吗
3KD指的是截留分子量
截留分子量(MWCO:molecular weight cutoff)是使用分子量大小表示的超滤膜的截留性能,又内称作容切割分子量。
由于直接测定超滤膜的孔径相当困难,所以使用已知分子量的球状物质进行测定。如膜对被截留物质的截留率大于90%时,就用被截留物质的分子量表示膜的截留性能,称为膜的截留分子量。实际上,所使用的物质并非绝对的球形,由于试验条件的限制,所测定的截留率也有一定的误差,所以截留分子量不能绝对表示膜的分离性能。也就是说3KD分子量的产品有可能透过膜也有可能被膜拦截,一般来说希望3KD的产品全部透过,需要选择截留分子量更大的膜,比如5KD
⑩ millipore 超滤管区别
1、装量:0.5ML 4ML 15ML
2、截留分子量3K 10K 30K 50K 100K