⑴ 色谱法的洗脱有哪两种方式
使用高效液相色谱仪进行分析时,常用两种洗脱方式,一种为等度洗脱,另一种为梯度洗脱。
用等度洗脱进行色谱分离时,由不同溶剂构成的流动相的组成,如流动相的极性、离子强度、pH值等,在分离的全过程中皆保持不变。用梯度洗脱进行色谱分离时,在洗脱过程中含2种或两种以上不同极性溶剂的流动相组成会连续或间歇地改变,其间可调节流动相的极性,改善样品中各组分间的分离度。
使用梯度洗脱时,也会使干扰分离的强保留杂质组分在较短的时间内从柱中清楚,使色谱柱保持干净状态,以进行下一次的分析。梯度洗脱一般是指流动相的组成随分析时间的延长呈现线性变化,即线性梯度洗脱,可用于反相和正相高效液相色谱仪及离子对色谱法。
(1)色谱级试剂需要过滤吗扩展阅读:
注意事项:
1、流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45μm或更细的膜过滤)。
2、流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。
3、不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。
4、使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗20mL以上。
⑵ 高效液相色谱的流动相要经过哪些处理
流动相要先过滤,超声脱气后方可使用。
另外选用试剂是要选用色谱级的专,过滤时选择合属适的滤膜。流动相最好现配现用,不要保存太长时间。
使用旋转蒸发仪上的真空泵 抽空气20min,可以达到脱气的作用。使用滤膜过滤掉杂质。
流动相必须过滤膜,用前要超声除气泡半个小时左右,否则基线不稳
仪器和色谱柱先要用有机溶剂(如乙腈等)好好清洗一下,待基线平衡后才能进一步工作,乙腈和水混合的流动性最好先超声抽滤脱气,准备工作做好了会节省好多时间。
若用色谱纯的乙腈和超纯水做流动相,流动相可以不用过滤膜,但超纯水需要超声约30分钟脱气。
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⑶ 请问:色谱纯与分析纯试剂的差别在哪
考虑问题不能单从片面去钻牛角尖的。我们常说色谱纯的试剂杂质比分析纯的更少。因为通常仪器分析比化学分析灵敏度更高,对于分析纯的试剂,有时候微量杂质在化学分析过程不影响结果,而在仪器分析中可能对结果影响很大或对设备损害很大,这都是不允许的。比如试剂中的微量固体杂质,化学分析可忽略影响,而仪器分析中固体会堵塞色谱分析关键部件,必须严格过滤除去。另外,绝大部分的化学试剂都有分析纯,而色谱纯试剂的种类相对就少得可怜了,主要因为目前色谱仪器分析需要使用的试剂种类不多,常见的醇,酮、酯、乙腈、烷烃等。在制备蒸馏水的过程中我们通常认为蒸馏是纯化的常用办法;实际在高纯物质纯化过程中,蒸馏不是万能的,蒸气在很多种情况下可能是共沸混合物,也可能在气流影响下带走固体粉尘等杂质,所以不是任何条件下都可以用蒸馏来实现纯化的。[ ] 查看原帖>>
⑷ 液相色谱试验用的试剂是不是都用色谱纯级的
你所指的试剂是什么?
有机溶剂必须要色谱级的。比如甲醇、乙腈,或者是正相的正己烷、乙醇等等。
水就用纯净水就可以。
不过盐不需要。一般反相色谱里面会涉及到缓冲盐,比如磷酸盐缓冲液,醋酸盐缓冲液。用的比如磷酸二氢钾,磷酸二氢钠,醋酸钠。还有调节pH用的盐酸、氢氧化钠。这些都是化学纯、分析纯。当然了,用前需要过滤。