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超滤管规格

发布时间:2025-01-08 15:33:46

『壹』 超滤离心管怎么使用

蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。
1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时,【取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mg/ml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测】,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的Buffer,直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再浓缩至1ml左右,连续三次,最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作,用黄枪头(200ul)取,轻轻顺着边缘插入枪头,轻轻吹打、混匀蛋白液,注意不要碰到超滤膜,然后吸取浓缩液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取,否则难度太大,有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中,没过超滤膜,防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管,重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水,用milliQ水轻轻润洗几次,【若管底有可见的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用枪头吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀悬起,然后倒掉,不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液,室温放置20min,期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液,将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时,不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗,内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯,加至接近满的MilliQ水,50ml管也加满MilliQ水,将管芯慢慢放入50ml
离心管,排出部分水,然后盖上盖子,放4度保存,直到下次使用。一般来说,按照上述步骤和注意事项,每根管用三四年不会坏。

『贰』 各大品牌超滤膜孔径尺寸数据

超滤膜是通过压力使水通过膜孔径以过滤水中杂质的设备,孔径是其关键因素,范围通常在0.001-0.02微米之间,并非统一标准。不同品牌超滤膜的孔径和功能有所不同。

陶氏超滤膜孔径大小大致在0.005~0.1微米之间,截留分子量为1000~500,000道尔顿。该膜材质多样,包括PVDF、PES、PP、PE、PS、PAN、PVC等,有效去除细菌、病毒、大分子有机物等。

海德能超滤膜孔径为0.01微米,截留分子量分为10万、5万、1万、6千等类型,能100%清除水中的病菌和微生物。

科氏超滤膜孔径在0.002~0.1微米之间,截留分子量约1000~500000道尔顿。膜结构有管式、中空纤维、卷式、平板式等。

诺芮特超滤膜平均孔径为0.010~0.025微米,最大不超过0.025微米。它能完全过滤水中的胶体、固体颗粒、病菌、隐性孢子等,具有出色的耐化学腐蚀和抗氧化性能。

苏伊士GE超滤膜孔径大小为0.2-0.02微米,材质有PVDF、复合纤维(TFM)。根据截留分子量和用途,分为GE、GH、GK、PT、PW、MW系列。

立升超滤膜采用改性PVC材质,孔径为0.02微米,平均截留分子量为100,000道尔顿。有效去除水中的悬浮微粒、胶体、微生物等杂质,提供多种规格膜组件。

美能超滤膜孔径在0.002~0.1微米之间,截留分子量为1000~500000道尔顿。有效过滤水中的胶体、蛋白质、微生物及大分子有机物,主要材料为PVDF和PES。

『叁』 要50kd的蛋白用什么规格的超滤管

截留分子量5万道尔顿的超滤膜。

『肆』 想买管式超滤膜有人给介绍下么

管式超滤膜组件容易清洗和更换,在原水状态好的情况下,压力损失较小,抗高压能力强。能够有效处理含有悬浮物、黏度高和容易堵塞管路的固体污染物质等。

『伍』 超滤膜哪种最好

不同的膜具有不同的功能作用,没有说哪种最好。
家用净水器的话,一般常用的超滤膜版主要材料为聚丙烯腈权,主要就是应用在净水过滤,你可以选择此类超滤膜。另外还有一种超滤膜主要材料为聚氯乙烯,也用于净水过滤,还有工业水处理。这两种都是常用的材料,综合来看聚氯乙烯有一种合金毛细管式超滤膜,使用感较好,可以去有效水中的杂质。

『陆』 超滤管规格太小怎么放进离心机

1、首先将超滤内管插入所提供的一个微量离心管中。
2、其次向超滤管内管中加入不超过500微升的样本,并盖上盖子。
3、最后让盖子的连接带朝着转子的中央,用一个超滤管平衡即可。

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