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2. 强离子交换柱和弱离子交换柱的区别
阴树脂和阳树脂有什么不同?
交换原理:
阴离子交换树脂体内含有大量的碱性基团,是通过氯来与水中的杂质交换,而阳离子交换树脂则含有大量的酸性基团,是通过钠离子或者氢离子与水中的杂质进行交换。
交换顺序:
1、混床树脂的交换顺序一般是先阳离子,然后才是阴离子,阳离子交换树脂会释放出酸性基团,而阴离子交换树脂则会释放出碱性基团,两者中和,成为纯水。
2、离子所带有的电荷多,就容易被树脂吸附,而所带有的电荷较少,则比较难吸附。
3、如果带有相同电荷量的离子,原子序数大的元素,形成离子的水合半径小,较易被吸着。
温度:
阳离子交换树脂的耐温性比较好,所以一般阳离子交换树脂的使用温度或者储存温度都要比阴离子交换树脂高一些。
预处理:
阴阳离子交换树脂的功能基团不同,所以树脂预处理时使用的溶液也不同,阴阳树脂在使用饱和食盐水浸泡18-20小时之后,使用清水清洗干净。
阴树脂使用浓度为5%的氯化氢进行浸泡4-8小时,清洗干净,再使用浓度在2%-4%左右的氢氧化钠浸泡4-8小时,清洗至中性即可。
而阳树脂则使用浓度在2%-4%左右的氢氧化钠浸泡2-4小时,清洗干净后,使用浓度为5%的氯化氢进行浸泡4-8小时,清洗至中性即可。
3. 离子交换实验中,为什么阳树脂柱要放在阴树脂柱前
阳离子柱提供钠离子,置换掉水中的多价金属离子,比如钙离子,镁离子等。形成的物质更能溶于水。不会沉淀。可以进入下一级处理。
4. 为什么通过阳离子交换住ph下降
通过阳离子交换柱ph下降原因是离子交换树脂的离子交换性能下降了。根据查询相关资料得知,离子交换树脂在离子交换过程中,如用氢离子交换水中的钠离子时,钠不断地被交换,离子交换树脂上的氢离子减少,树脂与钠离子结合较稳定,不易电离,其导电率下降。交换柱内载体是阳离子交换树脂为阳离子交换柱,载体为阴离子交换树脂就是阴离子交换柱。
5. 用离子交换法纯化蛋白如何选定缓冲液
也可以用AEC,主要以流穿模式做。sspxiaoji(站内联系TA)用阳离子交换柱,可以考虑pH6.0-7.0的缓冲液,因内为容大部分蛋白质的等电点在这附近,带电荷少,这样容易穿透除去其他杂蛋白。而你的目的蛋白PI在11,挂柱应该比较牢固。但是有个问题需要注意,PH离你的目标蛋白PI太远,有可能导致挂柱后难以洗脱。
6. 用阳离子交换柱分离氨基酸,在pH=2.0时,碱性氨基酸和酸性氨基酸相比,哪一个先被洗脱为什么
【答案】:酸性氨基酸先被洗脱。
阳离子交换柱层析是一种用阳离子交换树脂作支持剂的层析法。阳离子交换树脂上含有酸性或碱性基团可以解离出氢离子,与溶液中的阳离子发生交换。在pH=2.0时,氨基酸的羧基不发生解离,氨基发生质子化,因此氨基酸主要以阳离子形式存在。碱性氨基酸带2个氨基,1个羧基;酸性氨基酸带2个羧基,1个氨基。发生质子化后,碱性氨基酸带正电荷明显多于酸性氨基酸。氨基酸与树脂的亲和力主要取决于他们之间的静电吸引,因此碱性氨基酸与树脂上的阳离子发生交换而被“挂”在树脂上的机会多,结合力强,相反,酸性氨基酸结合力弱。因此用缓冲液洗脱氨基酸时,酸性氨基酸先被洗脱。
7. 732阳离子交换树脂钠型如何转氢型 转型后出水PH 有什么 变化(钠型出水PH增高) 转型的树脂如何再生
没有国家标准。原理加经验就可以了。钠型转为H型是用盐酸,如何操作要看你的版柱的直径。和权填充的树脂高度。转型过程一般是从底部通过入5%左右的盐酸水溶液。按1米直径估计,流量大至在每小时3--5个立方米。时间估计在1小时左右即可。然后用同样流量的清水,也是从底部通入。时间则看你的出水PH接近7即可。然后从上部通入清水,流量估计在10-15立方米左右。一直到出水中基本检测不出硬度即可。这时出水是酸性的。你可以用两个柱。一个是钠型柱,用盐来再生。一个是H型柱,用酸来再生。实际生产时,两个柱的出水混合,水就是基本中性的。但是两个柱各自的出水量是多少要看你当地的水的硬度才能估计。所以你的经验非常重要。
8. 磺酸基阳离子交换键合硅胶色谱柱,怎样维护保养及活化
在使用系统之前,首要任务是检查色谱柱是否受到微生物污染,否则可能会导致柱子堵塞,使得柱压升高到无法接受的水平。首先,不连接检测器,正向安装色谱柱,使用纯甲醇以0.6ml/min流速冲洗大约10倍柱体积。接着,连接检测器,继续使用纯甲醇以相同流速冲洗约20倍柱体积。随后,改用去离子水以相同流速冲洗约20倍柱体积。
为确保色谱柱的最佳性能,建议连接保护柱(通常由制造商提供),然后用选定的洗脱液以0.6ml/min流速平衡柱子至少1小时。在用分析洗脱液进行平衡前,如果洗脱液中含有缓冲盐,应先使用不含缓冲盐的同比例洗脱液过渡,冲洗约10倍柱体积,以避免缓冲盐在分析柱内析出。
在进行洗脱液选择时,需注意阳离子交换柱多使用柠檬酸或酒石酸缓冲液(或其混合溶液)、邻苯二甲酸缓冲液,pH范围从2.5到6.5;阴离子交换柱则多使用磷酸缓冲液、硝酸铵溶液(1mMol/L),邻苯二甲酸缓冲液,pH范围同样从2.5到6.5。绝对禁止使用水杨酸缓冲液,因为水杨酸的分解产物会改变固定相的性质。洗脱液在使用前必须通过0.45um滤膜过滤并彻底脱气,以避免检测和泵送问题。
为了提高分析的稳定性,建议在室温条件下使用色谱柱,如果需要,可以将柱温设置为高于室温5~10℃。避免在40℃以上使用,以防损坏色谱柱。
在使用过程中,切勿超过色谱柱的耐受最高压力。调整流速时,应采取小的间隔变化以避免柱床扰动。更换柱子时,务必先将流量降至0,等待洗脱液完全流出柱子,压力变化到0(约2min)后再进行更换。
防止将来自流动相或样品中的疏水性或与流动相极性差别很大的化合物进入色谱柱,尤其要避免导入颗粒杂质,以防止操作压力增高,污染物难以或不能去除。
分析完毕后,采用与C18柱类似的净化程序,首先用去离子水以0.6ml/min流速冲洗约20倍柱体积,然后用甲醇以相同流速冲洗约10倍柱体积,确保纯甲醇饱和后密封保存。
对于长时间保存后的重新使用,重复上述步骤即可。
9. 离子交换树脂氢型柱制作方法
1、树脂装柱
将树脂装入交换器中,用清水反洗树脂,至出水澄清为止。通入 2 倍树专脂体积的
5-8%NaCl溶液浸泡4-8h,再用属清水洗到出水无色无味为止(如树脂是新树脂,也未失水,则可免去5-8%NaCl
溶液浸泡)。
2、阳离子交换树脂
先通入两倍树脂体积的约 4%HCl 溶液,将后一倍再生液浸泡树脂 4-8h,用清水洗到 pH 为 3-5 左右,再用两倍树脂体积的约 4%NaOH 溶液,将后一倍再生液浸泡树脂 4-8h,用清水洗到 pH 为 8-9 左右。之后就可再生使用(通入三倍树脂体积的约 4%HCl 溶液,将后一倍再生液浸泡树脂 4-8h,用清水洗到 pH 为 5 -6)
如果嫌麻烦,也可以直接双倍再生,即通入4倍树脂体积的约 4%HCl 溶液,将后一倍再生液浸泡树脂 4-8h,用清水洗到 pH 为 5 -6即可投入使用。
清洗水要注意原水中硬度是否偏高(最好采用软化水),如果没有条件采用软化水冲洗,则建议免去酸碱预处理过程,以免造成阳树脂通过NaOH转型后,用软化水冲洗时,导致树脂内部形成Ca(OH)2,Ma(OH)2沉淀,反而造成运行时钠超标。