截留分子量超滤管

① 超滤管截留分子量与孔径之间的对应关系是怎样的

第一超滤管达不到100%的与孔径完全一致。任何滤膜都达不到和标称孔径完全内一致，只能是无限的接容近孔径。
其二分子量是质量，而孔径是长度单位，原则上不具有匹配性。原因是，标的物的结构会直接影响过滤精度。球状的和链状的，分子量相同，但是用相同孔径可以截住球状的，而链状的就会透过去。

因此，两者之间没有绝对的联系。

② 超滤离心管怎么使用

蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。
1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的Buffer，直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作，用黄枪头（200ul）取，轻轻顺着边缘插入枪头，轻轻吹打、混匀蛋白液，注意不要碰到超滤膜，然后吸取浓缩液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取，否则难度太大，有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中，没过超滤膜，防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管，重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水，用milliQ水轻轻润洗几次，【若管底有可见的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用枪头吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀悬起，然后倒掉，不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液，室温放置20min，期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液，将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时，不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗，内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯，加至接近满的MilliQ水，50ml管也加满MilliQ水，将管芯慢慢放入50ml
离心管，排出部分水，然后盖上盖子，放4度保存，直到下次使用。一般来说，按照上述步骤和注意事项，每根管用三四年不会坏。

③ 3kd的超滤管最大转速

4000rpm。超滤离心管是净水器中一个过滤物品，其中3KD指的是截留分子量，是使用分子量大小表示的超滤膜的截留性能，又称作专切割分子量，而超滤管的最大转速也是由截留性能所进行决定的，3kd的最大转速为4000rpm，是一个最安全并且能源消耗较少的最大转速。

④ 如何用蛋白浓缩管

选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，最常见的是Ultra-15（10kD）。

通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。

新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。

(4)截留分子量超滤管扩展阅读：

超滤浓缩离心管，最新推出专利产品Hydrosart膜2K型，具有极低的蛋白吸附特性，高流速、高通量，是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜。

备有四种材质的超滤膜：聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart，可根据不同要求灵活选用；两种回收浓缩液的方法：既可用吸管直接吸取并回收，又可将离心管放入离心机反甩，将浓缩液甩入回收帽中，加盖保存。这两种方法都可使浓缩液达到近乎完全回收；

⑤ 超滤截留分子量与膜孔径

超滤膜截留的分子量 10000 30000 50000 60000 100000 200000 300000 500000 1000000..
对应超滤膜孔径(μm) 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.1
也就是说100kD（10万）的截留分子量对应50nm的孔径

⑥ 超滤离心管如何选择以及使用方法

超滤离心管在蛋白质、DNA和生物分子的浓缩、纯化和脱盐过程中被广泛应用。选择和使用超滤离心管时，需要理解其与微滤的区别。

微滤（Microfiltration）利用微孔膜介质去除溶液中尺寸为0.1 μm至10.0 μm的颗粒或生物体，广泛应用于生物制药预过滤和除菌过滤。微滤在细胞实验中常用于样品和培养基灭菌，以及从细胞裂解物中去除完整细胞和碎片，确保下游应用结果准确性。

超滤（Ultrafiltration）通过压力或浓度梯度使料液通过半透膜进行分离，能截留尺寸范围为1-1000kDa的分子，并允许盐和水等小分子通过。它广泛应用于蛋白质溶液的分离和纯化，以及核酸样品制备，如分子克隆和质粒纯化。与沉淀法相比，超滤更为温和，避免生物大分子失活。

超滤离心管是一种利用离心力驱动溶液通过超滤膜进行快速浓缩、渗滤和缓冲液置换的装置，由盖子、过滤装置和离心管组成。通过选择适合的膜孔径，可进行除热源、澄清和分离大分子污染物，或浓缩和脱盐目标分子。

选择超滤离心管时，需考虑样品起始量及超滤膜的截留分子量（MWCO）。样品体积决定离心管尺寸，而截留分子量则需根据目标大分子的分子量选择，通常选择比目标分子小2-3倍的膜。

使用超滤离心管涉及准备、加样、离心和回收步骤。准备阶段需冲洗设备以消除甘油残留，然后在离心前加入适量纯水或缓冲溶液。离心前确保离心机转子平衡，以保持稳定。回收时，从过滤装置或离心管中轻轻提取样品，注意不要接触或损坏超滤膜。

遵循上述步骤，正确选择和使用超滤离心管，将有效实现蛋白质、DNA和生物分子的高效浓缩、纯化和脱盐，为科学研究和工业应用提供可靠支持。

⑦ 超滤管分子量怎么算

1/3。超滤管为了得到高收率，所选滤膜的截留分子量MWCO选择所需截留分子大小的1/3，不超过目标分子量的一半。因此超滤管分子量所需截留分子大小的1/3这样来计算。超滤离心管常用于闷郑做细胞培养上清的蛋白浓缩的实验，它会有内管和外管的两个部拍罩或分，内管中是带有一定分子量的膜，当高速离心时，分子量袭伍比它小的就漏到下面的管子（即外管）中了，分子量比它大的就截留在上面（即内管中），这就是超滤的原理。

⑧ 超滤离心管能分离蛋白和聚乙二醇吗

超滤离心管可以用来分离蛋白和聚乙二醇的
聚乙二醇（PEG）是一种分子量内很小的试剂，而超滤管的容截留分子量一般是在3000道尔顿~10000道尔顿之间。绝大多数蛋白可以被截留在超滤管上层，而聚乙二醇可以穿透滤膜到达超滤管下层
所以超滤离心管可以用来分离蛋白和聚乙二醇的

⑨ 微滤 超滤 能截留多大以上的分子量

超滤（一万膜）能截留10000D的分子量物质,截留率>90%,微滤（0.5微米）大约能截留500万D分子量直径>0.5微米的物质