1. 液相色谱C18柱堵塞后如何冲洗柱子,能用纯水 冲柱子吗
C18柱子不能用纯抄水冲洗,再说本来就堵了,压力很高应该选择压力低的溶剂。
如果你确定是堵塞了,就用纯乙腈反冲,先用低一点的流速,比如01ml/min,看压力情况,不要超过200bar,再慢慢提高流速,但不要超过1.的流速,如果是真的堵了,可能会压力慢慢降下来的。
如果上面方法不行,那还有可能是盐析堵的,那就用乙腈:水=90:10反冲。
2. 老师,我做液相的,昨晚Agilent XDB C18的柱子被我用水冲了40分钟,有什么解救方法
你好,咱们C18的柱子一般是不能走纯水的,40min水应该还不是很严重,你用纯甲醇版低流速冲色谱柱2小时,进权样一个以前走过的物质,看看柱效情况。如果不理想了,进一针二氯甲烷,再用甲醇冲。冲完后,在进样看看。
3. 液相色谱可以用100%水冲吗,我的色谱柱不小心用纯水冲了10分钟左右,然后压力就上不去了,我该怎
如果流动相里本来就有水 短时间内没问题 切成流动相多冲一会儿就没事了
4. 离子色谱柱能用纯水冲洗吗,这样是否会影响柱子的性能。
按看说明书或咨询色谱柱厂商,防止损害色谱柱,离子柱都不便宜,小心为上。
用纯水短时间内冲洗色谱柱,通常不会对色谱柱造成较大的损伤,但如果长时间用水冲洗色谱柱则
可能引起固定相流失和相塌陷现象,所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱,建议在水中加入一定
量的甲醇或乙腈进行冲洗,通常水的含量<90%不会对色谱柱造成任何影响。
原因分析:
首先,由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质,硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一
定浓度有机溶剂的流动相中要大得多,所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失,引起柱效下降。
其次,对于常规的 C18 柱而言,由于C18 长链与水是不互溶的,C18 长链之间的相互作用力大于
C18 与水分子的作用力,长时间的用水冲洗,使得C18 长链之间相互靠近,水流的冲刷,导致相互联结
的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面,对疏水性物质的保留能力下降,即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出
现相塌陷的现象,有些厂家推出了纯水柱(如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱),这种纯水柱可以用纯
水作流动相而不会产生相塌陷,这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。
第三,如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱,用纯水冲洗,并一定能将缓冲盐完全洗去。因为,由
于缓冲盐难溶于有机溶剂,C18 反相柱中用的填料是在硅胶表面上接上许许多多的C18 长链,相当于一
个疏水的有机相,而硅胶基体被有机物质包裹着,所以用纯缓冲盐水溶液做流动相时也许缓冲盐不容易
到达硅胶基质,不至损害基体。但所用的流动相通常会含一部分有机溶剂,而且这些有机溶剂与C18
长链是互溶的,因此有机溶剂的加入增强了流动相渗入硅胶基质的能力,能使部分缓冲盐达到硅胶基质。
同样的道理,用纯水冲洗只能洗掉表面的缓冲盐,而渗入深处的缓冲盐则仍然残留在那里。所以最好在
水中加入部分有机溶剂进行冲洗,一般的C18 柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要视分析
时使用的流动相来定,原则上,用于冲洗的流动相中水的比例应该等于或高于(缓冲盐用后清洗的情况,
推荐使用“等于”)分析时所用流动相中水的比例。
5. 为什么普通C18色谱柱不能用纯水冲洗
容易引起疏水坍塌,把强保留物质冲出来,会毁了柱子的,所以水相不能超过95%,最开始的梯度淋洗也是高有机相到高水相,但是不是纯水相。
6. 色谱柱能否用纯水冲洗冲洗后会有什么样的影响
如果流动相里本来就有水 短时间内没问题 切成流动相多冲一会儿就没事了
7. 苯基键合硅胶色谱柱柱为什么不能用纯水冲洗
这个问题比较难回答。因为注意的东西比较多,比如:
首先是色谱柱的方向问题。大多数色谱柱会标明方向。这个傻子都知道,安装的时候要顺着方向安装。不过也有一些色谱柱没有方向,这些是双相填料的色谱柱。第一次使用时的方向就是它的方向。不过所有的色谱柱都是,一旦开始使用,就不要转换方向。这样会损毁色谱柱。
第二个是柱压问题。一般的色谱柱压力最好不要超过20MPa,压力过高会加速损毁色谱柱。
第三,柱温。色谱柱温度最好不要超过45℃。也是会加速损毁色谱柱。
还有pH值。色谱柱的pH值范围是不同的。大多数色谱柱的pH值范围是4-7左右。有些偏向酸性,有些偏向碱性的,还有一些pH值广泛的。这些按照说明书操作即可。
除此之外,色谱柱还有别的一些需要注意的事情。
首先,键合硅胶色谱柱分成几种。比如C18、C8、苯基柱这些的使用方法都差不多。是反相色谱柱。它们的流动相中还有大量的水,还有无机盐。这个时候需要注意,无机盐是不能够长时间留在色谱柱里面的。色谱柱最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面。但是无机盐不能溶于纯甲醇或者纯乙腈。所以中间要过渡甲醇水或者乙腈水。
而有些色谱柱比较特殊,比如氨基柱、氰基柱。他们是可以用于正相,也可以用于反相。所以使用的时候注意区分。配置流动相的时候也避免使用大量的水相。
其他的暂时想不到。或者说你想问的问题可以提出来,大家讨论讨论。
8. 求助求助,waters的柱子不小心用纯水冲了
你问的应该是反相色谱柱,因为凝胶过滤用纯水相是司空见惯的。
Agilent的Bonus系列内,Aichorm的Aqua系列,都是可以做纯水容相的。
但你如果只是考虑梯度起点的高水相比例,那就不必了,普通的C18、C8都可以用纯水相短时间冲洗,不超过10个柱体积,是没什么问题的。
9. 洗柱用水冲的时间长了对色谱柱有没有影响
首先你的柱子是反相柱,最好不要用纯水冲洗柱子,可以用5-10%甲醇水溶液小流速冲洗色谱柱,时间长一点,基本是没有什么大碍的,我们经常过夜冲柱子,最后保存在100%的甲醇里。
10. 在冲洗高效液相C18反相柱的时候,为什么不能用纯水
相C18色谱柱(即憎水柱子)如果用纯水冲洗后,如果立即停泵则由于其憎水(疏水专)的缘故使得柱子内属的水因而流失掉,长时间停泵使得柱子干掉(变干),会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷(也说成是失去支撑倒下),柱子就这样报废了。那么一旦冲洗柱子用了纯水相怎么办呢?诶!不要惊慌,只要你不停泵,上述情况不会立即发生,我们只要保证最后用有机相冲洗柱子,停泵后使柱子内留存的是有机相,就无大碍,