Ⅰ 片剂溶解于缓冲盐中,流动相是已腈:纯水为29:71。进样后怎么冲洗柱子
片剂溶解于缓冲盐中,流动相是已腈:纯水为29:71。进样分析完毕后,可以先用流动相冲洗柱子,然后换成甲醇和纯水的溶液将柱子冲洗干净即可。
下次进样前,先用流动相置换甲醇水溶液,基线跑稳后,即可进样。
Ⅱ 离子色谱柱能用纯水冲洗吗,这样是否会影响柱子的性能。
按看说明书或咨询色谱柱厂商,防止损害色谱柱,离子柱都不便宜,小心为上。
用纯水短时间内冲洗色谱柱,通常不会对色谱柱造成较大的损伤,但如果长时间用水冲洗色谱柱则
可能引起固定相流失和相塌陷现象,所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱,建议在水中加入一定
量的甲醇或乙腈进行冲洗,通常水的含量<90%不会对色谱柱造成任何影响。
原因分析:
首先,由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质,硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一
定浓度有机溶剂的流动相中要大得多,所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失,引起柱效下降。
其次,对于常规的 C18 柱而言,由于C18 长链与水是不互溶的,C18 长链之间的相互作用力大于
C18 与水分子的作用力,长时间的用水冲洗,使得C18 长链之间相互靠近,水流的冲刷,导致相互联结
的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面,对疏水性物质的保留能力下降,即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出
现相塌陷的现象,有些厂家推出了纯水柱(如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱),这种纯水柱可以用纯
水作流动相而不会产生相塌陷,这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。
第三,如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱,用纯水冲洗,并一定能将缓冲盐完全洗去。因为,由
于缓冲盐难溶于有机溶剂,C18 反相柱中用的填料是在硅胶表面上接上许许多多的C18 长链,相当于一
个疏水的有机相,而硅胶基体被有机物质包裹着,所以用纯缓冲盐水溶液做流动相时也许缓冲盐不容易
到达硅胶基质,不至损害基体。但所用的流动相通常会含一部分有机溶剂,而且这些有机溶剂与C18
长链是互溶的,因此有机溶剂的加入增强了流动相渗入硅胶基质的能力,能使部分缓冲盐达到硅胶基质。
同样的道理,用纯水冲洗只能洗掉表面的缓冲盐,而渗入深处的缓冲盐则仍然残留在那里。所以最好在
水中加入部分有机溶剂进行冲洗,一般的C18 柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要视分析
时使用的流动相来定,原则上,用于冲洗的流动相中水的比例应该等于或高于(缓冲盐用后清洗的情况,
推荐使用“等于”)分析时所用流动相中水的比例。
Ⅲ 在冲洗高效液相C18反相柱的时候,为什么不能用纯水
相C18色谱柱(即憎水柱子)如果用纯水冲洗后,如果立即停泵则由于其憎水(疏水专)的缘故使得柱子内属的水因而流失掉,长时间停泵使得柱子干掉(变干),会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷(也说成是失去支撑倒下),柱子就这样报废了。那么一旦冲洗柱子用了纯水相怎么办呢?诶!不要惊慌,只要你不停泵,上述情况不会立即发生,我们只要保证最后用有机相冲洗柱子,停泵后使柱子内留存的是有机相,就无大碍,
Ⅳ 为什么普通C18色谱柱不能用纯水冲洗
容易引起疏水坍塌,把强保留物质冲出来,会毁了柱子的,所以水相不能超过95%,最开始的梯度淋洗也是高有机相到高水相,但是不是纯水相。
Ⅳ 洗柱用水冲的时间长了对色谱柱有没有影响
首先你的柱子是反相柱,最好不要用纯水冲洗柱子,可以用5-10%甲醇水溶液小流速冲洗色谱柱,时间长一点,基本是没有什么大碍的,我们经常过夜冲柱子,最后保存在100%的甲醇里。
Ⅵ 求助求助,waters的柱子不小心用纯水冲了
你问的应该是反相色谱柱,因为凝胶过滤用纯水相是司空见惯的。
Agilent的Bonus系列内,Aichorm的Aqua系列,都是可以做纯水容相的。
但你如果只是考虑梯度起点的高水相比例,那就不必了,普通的C18、C8都可以用纯水相短时间冲洗,不超过10个柱体积,是没什么问题的。
Ⅶ 高校液相色谱仪流动相冲柱子的时,不开进样系统,进样系统里液体会不会流到色谱
摘要 1.流动相溶剂应选择HPLC的溶剂或依此为标准的溶剂。流动相使用前用0.45μm滤膜过滤、脱气,清除微粒和灰尘。 在送液泵内,为了防止杂物(固体)进入流路,装有吸滤器,但网孔径为10μm,比此更小的颗粒仍然可通过,这会导致流路和柱子堵塞和污染。为此,建议常用0.45μm滤膜过滤。流动相溶剂须经脱气,如不脱气,在溶剂混合时,或压力温度变化时容易产生大量气泡,会导致泵误动作和输液不畅,检测器产生噪声信号等。
Ⅷ 液相色谱C18柱堵塞后如何冲洗柱子,能用纯水 冲柱子吗
C18柱子不能用纯抄水冲洗,再说本来就堵了,压力很高应该选择压力低的溶剂。
如果你确定是堵塞了,就用纯乙腈反冲,先用低一点的流速,比如01ml/min,看压力情况,不要超过200bar,再慢慢提高流速,但不要超过1.的流速,如果是真的堵了,可能会压力慢慢降下来的。
如果上面方法不行,那还有可能是盐析堵的,那就用乙腈:水=90:10反冲。
Ⅸ HPLC色谱柱能用纯蒸馏水冲吗
一般不能。HPLC多用C8,C18色谱柱,而这些柱子要求最少也要有5%的有机相,用纯水相容易破坏固定性,从而使柱效下降。
Ⅹ 色谱柱能否用纯水冲洗冲洗后会有什么样的影响
如果流动相里本来就有水 短时间内没问题 切成流动相多冲一会儿就没事了