纯水做流动相压力过大

『壹』 waters 液相冲柱子时用纯甲醇没有问题，90的甲醇10的水压力就开始异常增大

压力大只能一节一节排除可能性。

1. 保证混合池和在线脱气没有问题。如果专有，联系工程师来修理。多问一属句，你的流动相，也就是纯水滤过吗？还有就是瓶子刷过吗？因为有些时候，我们只过滤瓶子里的溶液，可微生物附着在瓶壁上。现在已经出现了压力高的问题。你把纯水和甲醇按照（10：:90）的比例混合好，然后再试一试，排除一下流动相和脱气机的问题。

   
   

2. 超声清洗单向阀。用5%稀硝酸、纯水、甲醇各自超声30min，看看是不是盐析了。

   
   

3. 看看色谱柱的问题。如果不接柱子的话压力是多大？接了柱子，柱后断开压力是多大？可能是柱子不行了。这个可能性最大。不过我想知道所谓的“异常增大”是多大？什么柱子，压力能到多少？大概能有多长时间就变大了？是突然的？还是渐变的？

   
   

4. 其他的就是一节一节管路排查。peek管或不锈钢管都有可能被折成死弯。不过甲醇没问题就应该不是这个原因。

『贰』 液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题

1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时，流动相在恢复到室温前，基线水平很难稳定，特别是发生漂移，也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时，混合液变化大，往往会与室温相差很大，务必注意。

2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水，水相流动相需经常更换，防止长菌变质。使用去离子水、针剂水、纯净水（炊用）并不合适、尤其是做梯度洗脱时，水中的不纯物会成为鬼峰，从而干扰分析结果。

3、流动相的pH值过高或过低，流动相使用纯水，使用高浓度磷酸盐缓冲溶液，使用离子对试剂等，均可能造成色谱柱填料被化学破坏，这种对色谱柱固定相及键合相的破坏通常是不可修复的。

4、用缓冲盐做流动相时，在使用前和使用后都要用水清洗流路，绝对禁止将缓冲溶液留在流路中静置或更长时间。

5、在更换两种互不相容的流动相时，中间要用异丙醇溶液清洗过渡。例如：先用甲醇水做流动相，然后再用正己烷做流动相时，一定要先用异丙醇溶液冲洗甲醇水，然后用正己烷冲洗异丙醇，反之也是一样。在更换流动相时还要考虑色谱柱是否更换。

『叁』 waters c18 5u 250*4.6,纯乙睛、10%乙睛、甲醇、纯水各作为流动相流量为1ml时，压力多少正常

一般说来，衡量色谱柱的柱压高低主要以甲醇为流动相时的柱压为准。不同的液专相仪柱压也略有差异。属
你所提供的色谱柱，一般情况下，以甲醇为流动相，流速为1ml/min时，柱压在700-900psi，压差在50psi以下均为正常。
10%乙腈我没用过，30%乙腈的一般在1500psi左右，10%乙腈应该比它低。
纯水可能损坏色谱柱，纯乙腈可能堵塞单向阀，不建议使用上述流动相。

『肆』 纯水机压力桶泄压或压力大的影响

压力桶泄压纯水机高压保护不起作用，不停工作。
压力过大是高压开关坏，一般不会出这个问题，有高压保护。

『伍』 纯化水设备给水压力高的原因是什么

(1)高压泵出口门来调节不当；
(2)从高自压泵到反渗透器之间的管道堵塞；
(3)浓水调节门关的太紧或堵塞，浓水排放流量小；
(4)回收率太低。
遇到这种故障时需要检查水阀、管路堵塞、浓水调节等因素。
还有什么不白欢迎咨询
净
得
瑞

『陆』 液相色谱使用时，用甲醇冲洗，压力过大怎么回事

压力增大可能有几个原因:
1、色谱柱堵塞，如果是这种情况，用10%的甲醇冲柱，专也可先行询问色属谱柱生产厂家，若你们使用的色谱柱可以反冲(一般的色谱柱不允许反冲)，反冲一段时间效果会更好些。
2、流路系统堵塞，如果是这种情况，取下色谱柱，换上二通，先用水冲洗流路系统，再换甲醇，异丙醇冲洗，使用异丙醇冲洗时流速最好不要超过0.5mL/min，否则可能压力过大损伤流通池。
3、溶剂瓶中的过滤头堵塞，如果是这种情况，可将过滤头拆下，纯水洗干净。
4、如果你使用的是安捷伦液相，若压力突然过大，可拆下过滤白头检查，若过滤白头变黑，更换过滤白头，压力即可恢复正常。
你遇到的这种情况，压力增大不多，应该没有太大的问题，不用着急。另外，50%的水和50%的甲醇混合时，液相的压力就是最大的，一般不建议使用这种比例冲柱。

『柒』 为什么高效液相色谱要用甲醇和水做洗脱剂

因为水的极性最高，甲醇也是强极性的，如果你是做反相色谱（流动相极性强于固定相）通常就是用甲醇和水做流动相，如果是正相色谱可以使用极性较低的溶剂，如乙酸乙酯、苯之类的，一般来讲液相色谱法大多数是反相色谱，所以使用甲醇水做流动相很常见，流动相可以100%的甲醇，但是没办法100%的水，因为纯水做流动相压力过大，仪器承受不住。

『捌』 液相压力太大是否与流动相的酸度有关

和酸度的关系不大。就算是有，也不过是0.XMPa的变化。
一般和流动相的关系比较大。主要是有机相和水相的比例有关系。比如水相比较多，一般压力较大。而使用甲醇的压力比用乙腈的大。
另外和色谱柱有直接的关系。比如同一个厂家，有些柱子的pH范围较广，出厂的柱压力就比较高。再比如有些国产柱子，质量不太尽如人意。那压力我都不敢看。柱子的话建议你在购买的时候询问好工程师，我就买过一根默克的柱子，柱子很好，但是压力很高，跑梯度的时候上限压力会把柱子接口崩开，和麻烦的。

『玖』 液相色谱柱柱压很高怎么办

1. 你得分析一下为什么柱压高。

   有的色谱柱出厂的时候柱压就很高，比如同样是迪马的色谱柱，一代柱压力低，二代柱压力高。虽然填料差不多，不过二代柱是国内填充的。可能工艺上不好。或者pH耐受范围广的，压力可能会高。这种情况不能改变。只能更换色谱柱。

2. 如果是压力不高，而是之后实验过程导致，那也有很多可能。反正就是堵住了。因为不通所以压力高，处理的话通开了就好。

   a.气泡堵住了。这种情况不但柱压高，而且波动大。用纯的甲醇或者乙腈低流速冲洗，色谱柱出口朝上，尽量让气泡从上面流出来

   b.盐堵住了。这个只能是10-15%的甲醇水冲洗，把柱温加到35℃。看看能不能把盐溶出来

   c.强保留物质。这个几乎没办法冲洗，每一根就柱子的柱前都不是填料本身的白色，而是黄色的。这个就是……样品溶液中的强保留物质。所以样品进入仪器前一定要过滤！拿甲醇反冲冲冲看吧，运气好可以冲掉。

   d.微生物。一般老实验员不会犯这种错误，纯水或者纯盐的流动相，即便过滤了，最多放置一天。再久就会长细菌了。这个你自己看看流动相的瓶子，把里面的流动相倒出来，摸摸瓶壁如果滑滑的，那就是长细菌了。这个挺麻烦的，先用纯甲醇冲洗，然后用DMF低流速冲洗，据说可以冲掉70%的细菌和细菌尸体。

目前就想到这些，再多了只能你结合试验情况自己分析了。

『拾』 做液相色谱时，泵压力过大怎么办

先检查是什么原因导致压力过大。
1、柱子的原因：用10%甲醇水冲柱子，再用纯甲醇冲柱子。
2、泵堵了：用纯水冲管路或者超声清洗。