『壹』 waters 液相冲柱子时用纯甲醇没有问题,90的甲醇10的水压力就开始异常增大
压力大只能一节一节排除可能性。
保证混合池和在线脱气没有问题。如果专有,联系工程师来修理。多问一属句,你的流动相,也就是纯水滤过吗?还有就是瓶子刷过吗?因为有些时候,我们只过滤瓶子里的溶液,可微生物附着在瓶壁上。现在已经出现了压力高的问题。你把纯水和甲醇按照(10::90)的比例混合好,然后再试一试,排除一下流动相和脱气机的问题。
超声清洗单向阀。用5%稀硝酸、纯水、甲醇各自超声30min,看看是不是盐析了。
看看色谱柱的问题。如果不接柱子的话压力是多大?接了柱子,柱后断开压力是多大?可能是柱子不行了。这个可能性最大。不过我想知道所谓的“异常增大”是多大?什么柱子,压力能到多少?大概能有多长时间就变大了?是突然的?还是渐变的?
其他的就是一节一节管路排查。peek管或不锈钢管都有可能被折成死弯。不过甲醇没问题就应该不是这个原因。
『贰』 色谱柱能否用纯水冲洗冲洗后会有什么样的影响
如果流动相里本来就有水 短时间内没问题 切成流动相多冲一会儿就没事了
『叁』 为什么普通C18色谱柱不能用纯水冲洗
容易引起疏水坍塌,把强保留物质冲出来,会毁了柱子的,所以水相不能超过95%,最开始的梯度淋洗也是高有机相到高水相,但是不是纯水相。
『肆』 洗柱用水冲的时间长了对色谱柱有没有影响
首先你的柱子是反相柱,最好不要用纯水冲洗柱子,可以用5-10%甲醇水溶液小流速冲洗色谱柱,时间长一点,基本是没有什么大碍的,我们经常过夜冲柱子,最后保存在100%的甲醇里。
『伍』 那些HPLC色谱柱可以用纯水
你问的应该是反相色谱柱,因为凝胶过滤用纯水相是司空见惯的。
Agilent的Bonus系列,Aichorm的Aqua系列,都是回可以做纯水答相的。
但你如果只是考虑梯度起点的高水相比例,那就不必了,普通的C18、C8都可以用纯水相短时间冲洗,不超过10个柱体积,是没什么问题的。
『陆』 离子色谱柱能用纯水冲洗吗,这样是否会影响柱子的性能。
按看说明书或咨询色谱柱厂商,防止损害色谱柱,离子柱都不便宜,小心为上。
用纯水短时间内冲洗色谱柱,通常不会对色谱柱造成较大的损伤,但如果长时间用水冲洗色谱柱则
可能引起固定相流失和相塌陷现象,所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱,建议在水中加入一定
量的甲醇或乙腈进行冲洗,通常水的含量<90%不会对色谱柱造成任何影响。
原因分析:
首先,由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质,硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一
定浓度有机溶剂的流动相中要大得多,所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失,引起柱效下降。
其次,对于常规的 C18 柱而言,由于C18 长链与水是不互溶的,C18 长链之间的相互作用力大于
C18 与水分子的作用力,长时间的用水冲洗,使得C18 长链之间相互靠近,水流的冲刷,导致相互联结
的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面,对疏水性物质的保留能力下降,即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出
现相塌陷的现象,有些厂家推出了纯水柱(如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱),这种纯水柱可以用纯
水作流动相而不会产生相塌陷,这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。
第三,如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱,用纯水冲洗,并一定能将缓冲盐完全洗去。因为,由
于缓冲盐难溶于有机溶剂,C18 反相柱中用的填料是在硅胶表面上接上许许多多的C18 长链,相当于一
个疏水的有机相,而硅胶基体被有机物质包裹着,所以用纯缓冲盐水溶液做流动相时也许缓冲盐不容易
到达硅胶基质,不至损害基体。但所用的流动相通常会含一部分有机溶剂,而且这些有机溶剂与C18
长链是互溶的,因此有机溶剂的加入增强了流动相渗入硅胶基质的能力,能使部分缓冲盐达到硅胶基质。
同样的道理,用纯水冲洗只能洗掉表面的缓冲盐,而渗入深处的缓冲盐则仍然残留在那里。所以最好在
水中加入部分有机溶剂进行冲洗,一般的C18 柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要视分析
时使用的流动相来定,原则上,用于冲洗的流动相中水的比例应该等于或高于(缓冲盐用后清洗的情况,
推荐使用“等于”)分析时所用流动相中水的比例。
『柒』 液质联用洗柱子时需要打开质谱吗
你的柱子是Waters哪一款的?我现在用的Waters Symmetry Shield C18,这一款柱子可以耐纯水,所以可以用纯水冲洗柱子中的盐。而对一般的C18柱而言,若其没有耐纯水功能,建议不要用纯水冲,而应用小比较有机相(如5%甲醇 95纯水)冲洗一个小时,然后在逐渐增大有机相的比例直至封柱
『捌』 求助求助,waters的柱子不小心用纯水冲了
你问的应该是反相色谱柱,因为凝胶过滤用纯水相是司空见惯的。
Agilent的Bonus系列内,Aichorm的Aqua系列,都是可以做纯水容相的。
但你如果只是考虑梯度起点的高水相比例,那就不必了,普通的C18、C8都可以用纯水相短时间冲洗,不超过10个柱体积,是没什么问题的。
『玖』 在冲洗高效液相C18反相柱的时候,为什么不能用纯水
相C18色谱柱(即憎水柱子)如果用纯水冲洗后,如果立即停泵则由于其憎水(疏水专)的缘故使得柱子内属的水因而流失掉,长时间停泵使得柱子干掉(变干),会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷(也说成是失去支撑倒下),柱子就这样报废了。那么一旦冲洗柱子用了纯水相怎么办呢?诶!不要惊慌,只要你不停泵,上述情况不会立即发生,我们只要保证最后用有机相冲洗柱子,停泵后使柱子内留存的是有机相,就无大碍,
『拾』 液相色谱C18柱堵塞后如何冲洗柱子,能用纯水 冲柱子吗
C18柱子不能用纯抄水冲洗,再说本来就堵了,压力很高应该选择压力低的溶剂。
如果你确定是堵塞了,就用纯乙腈反冲,先用低一点的流速,比如01ml/min,看压力情况,不要超过200bar,再慢慢提高流速,但不要超过1.的流速,如果是真的堵了,可能会压力慢慢降下来的。
如果上面方法不行,那还有可能是盐析堵的,那就用乙腈:水=90:10反冲。