⑴ 高效液相基线不稳的原因,在线求解
几种可能性:
你的水相和有机相是怎么混合的?不要用在线排气,人为混合,然后减压抽滤之后再试一试。
这根柱子的粒径是多少。长度是10cm,那么粒径呢?是5um?还是3.5um或是更小?粒径很小的柱子就不能开太大流速。柱压高不说,也没有必要。
甲醇是不是干净?你的波长太低了。190nm的波长,甲醇已经有吸收了。这样对要不你就用乙腈进行试验,要不你就用好一点的甲醇。比如Fisher或者默克的色谱级甲醇再试一下。
⑵ 岛津液相基线不稳,怎么回事
1、可能是还没有平衡。一般更换色谱柱、流动相之后,系统需要一段时间平衡。大约30-60min左右。有时候系统里面有缓冲盐,那么平衡时间可能就更长了。等过了那个时间就好了。当然,这是针对等度条件说的。如果是梯度洗脱,那么基线肯定是会有变化的。这个在情理之中的。
2、流动相不干净。色谱仪器需要用色谱纯,如果是反相体系,那么水应该是超纯水,如果用到无机盐,那么需要用0.45um或者0.22um的滤膜过滤才行。如果用的是国产的甲醇乙腈,那就换一下吧。
3、氘灯寿命过长。一般岛津的氘灯可以使用2000个小时,但是寿命到了之后它不会坏掉,实验员也就继续使用了。但事实上在氘灯到了寿命之后,它检测样品的线性就会不好,而且在基线会不稳。这种情况在低波长下尤其明显。这个解决方法就只能是更换到等了。
4、其他的实验原因。这个我没办法一一给你说明。比如实验室的温度不稳定。那么对基线肯定是会有影响的。比如在示差检测器里面,那么温度的影响就会相当大。再比如在线脱气,如果流动相是在线混合,那么基线很有可能不稳定。方法也很简单,手混过滤就好了。这个需要具体问题具体分析。
⑶ 液相色谱仪的基线不稳是不是流动相不对
这个不一定。有很多种可能:
1.波长低的时候就容易基线不稳定,需要把AB相混合,手动脱气,然后再跑基线。
2.氘灯的能量不足,使用时间太长也会出现基线不稳的情况。
3.是因为单向阀盐析了,但是又没有堵死,压力上下波动,基线肯定也是不稳的。
4.是因为流动相不干净,比如水或者有机相有污染,或者厂家本身就不好,换个品牌的试剂看看。
5.当然也有时候是色谱柱的问题。
你只能一一排查才能确定。
⑷ 液相色谱基线的问题
用的什么色谱柱,什么样的流动相,用的什么检测器,在什么样的波长下的漂移?你的问题不知道怎么回答。建议如下:1,如果流动相是离子对试剂,那么需要长时间的平衡,2,如果流动相就是甲醇水之类的,那可能是你的试剂有问题,换个质量好点的甲醇或者乙腈。3,走一下纯甲醇看是否漂移。如果不好可能是流通池有污染,建议清洗下再说。
⑸ 液相色谱基线不稳的原因
我是从事液相色谱生产调试的,一一回答你问题
1.背压不足主要是在梯度是出现,因为检测器(流过池)两端压力差比等度时大,所以如背压不足液相色谱基线出现波动
2.流动性不纯,不同流动相黏度不同,造成压力波动,会导致液相色谱基线不稳
3.漏液不用说,更加造成压力波动,会导致液相色谱基线不稳
总之以上液相色谱基线不稳归根结底是压力造成,跟检测器无多大关系
如有不明QQ316084722
⑹ 在高效液相色谱分析中,如果基线不稳定,是什么原因引起的
高效液相色谱仪分析中的基线不稳定的原因一般是硬件引起的可以从两个大方向去判断:
1、产品质量方面的故障:仪器本身的电噪声,仪器无法屏蔽产品的外部信号的干扰信号,工作站软件的信号线连接时接触非仪器方面的输入信号,都会引起基线的规则性波动和突发性波动;这种不稳定一般可以通过基线信号的规律判断出来的;
2、使用和维护范围内的基线不稳定:流动相流路中有气泡会引起规律性的小波动;色谱柱污染则会导致基线大幅度的波动和各种不规则的出峰,检测器污染也会导致基线的不稳定1、柱温波动。(即使是很小的温度变化 都会引起基线的波动。通常影响示差检测 器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测 器或其它光电类检测器。) 1、控制好柱 子和流动相的温度,在检测器之前使用热 交换器图 2、流动相不均匀。(流动相条件变化引 起的基线漂移大于温度导致的漂移。) 2 、使用HPLC级的溶剂,高纯度的盐和添 加剂。流动相在使用前进行脱气,使用中 使用氦气。 3、流通池被污染或有气体 3、用甲醇或 其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要, 可以用1N的硝酸。(不要用盐酸) 4、检测器出口阻塞。(高压造成流通池 窗口破裂,产生噪音基线) 4、取出阻塞 物或更换管子。参考检测器手册更换流通 池窗。 5、流动相配比不当或流速变化 5、更改 配比或流速。为避免这个问题可定期检查 流动相组成及流速。 6、柱平衡慢,特别是流动相发生变化时 6、用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流 动相时,在分析前用10-20倍体积的新流 动相对柱子进行冲洗。 7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配 成 7、检查流动相的组成。使用高品质的 化学试剂及HPLC级的溶剂 8、样品中有强保留的物质(高K 值)以 馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步 升高的基线。 8、使用保护柱,如有必要 ,在进样之间或在分析过程中,定期用强 溶剂冲洗柱子。 9、使用循环溶剂,但检测器未调整。 9 、重新设定基线。当检测器动力学范围发 生变化时,使用新的流动相。 10、检测器没有设定在最大吸收波长处,将波长调整至最大吸收波长处
⑺ 哪位朋友知道液相色谱仪的基线不稳是什么原因
这种情况我们一般判断都是有气泡,把柱子换成二通管,用异丙醇加大流速冲15min左右就好了。
还不好的话就考虑柱子是否该换了
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⑻ 高效液相色谱的常见问题比如说基线不稳
1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。) 1、控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器图
2、流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。) 2、使用HPLC级的溶剂,高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气,使用中使用氦气。
3、流通池被污染或有气体 3、用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要,可以用1N的硝酸。(不要用盐酸)
4、检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破裂,产生噪音基线) 4、取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。
5、流动相配比不当或流速变化 5、更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。
6、柱平衡慢,特别是流动相发生变化时 6、用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流动相时,在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。
7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 7、检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂
8、样品中有强保留的物质(高K’值)以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。 8、使用保护柱,如有必要,在进样之间或在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子。
9、使用循环溶剂,但检测器未调整。 9、重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时,使用新的流动相。
10、检测器没有设定在最大吸收波长处。 10、将波长调整至最大吸收波长处
⑼ 液相色谱基线问题
“用流动相之前先用液相级甲醇清洗柱子半小时左右,基线走得很直,后上流动相一小时,走基线抖动得很厉害”
问题就出在这里!
因为柱子走流动相之前,里面充满的是100%甲醇;随后如果马上过流动相,流动相中的盐分在纯甲醇中难以溶解,形成盐析出,导致基线波动!
所以,过流动相之前,可以先用50%甲醇:水跑20min,然后再换上流动相!就ok了
⑽ 求助:高效液相色谱基线跑不平
视差要用1个泵跑基线,两个泵很难跑平基线。有时候柱温箱温度波动也会导致基线的上下波动,和色谱柱本身应该没什么关系。顺说很多柱子用纯水都会坏的...