纯化水微生物取样流程

⑴ 纯化水微生物限度检查方法

4.10微生物限度(薄膜过滤法)
4.10.1取相当于每张滤膜含1g或1ml供试品的供试液，加至适量的稀释剂中，混匀，过滤。若供试品每1g或1ml所含的菌数较多时，可取适量稀释剂的供试液1ml过滤。用pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液或其他适宜的冲洗液冲洗滤膜，冲洗方法和冲洗量同“计数方法的验证”。冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基或酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基平板上培养。每种培养基至少制备一张滤膜。
4.10.2阴性对照试验 取试验用的稀释液1ml，照上述薄膜过滤法操作，作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。
4.10.3培养和计数 除另有规定外，细菌培养48小时，逐日点计菌落数，一般以48小时的菌落数报告；霉菌、酵母菌培养72小时，逐日点计菌落数，一般以72小时的菌落数报告；必要时，可适当延长培养时间至5～7天进行菌落计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。点计菌落数后，计算各稀释级供试液的平均菌落数，按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平板的菌落平均数不少于15，则两个平板的菌落数不能相差1倍或以上。
4.10.4菌数报告原则 以相当于1g或1ml供试品的菌落数报告菌数；若滤膜上无菌落生长，以<1报告菌数（每张滤膜过滤1g或1ml供试品），或<1乘以稀释倍数的值报告菌数。
这是我们公司的纯化水微生物检测部分内容，请参考。

⑵ 纯净水微生物检测方法

电导率越低，水越纯。电导率很低是不是说明水中的微生物也不存在了呢？微生物检测等很长时间才出结果,要是能够通过这样的方法检测纯净水的话,那就可以省了很多微生物检测步骤.

在现代食品安全速测技术中确实有利用电导变化原理来测量微生物含量的方法，叫做：Bactometer系统,是一种用于估计微生物数量的新方法
比较快速的方法是有的，设备也比较先进，可能用的并不多
例如：直接外荧光滤过技术（DEFT）
即用胶系统(SimPlate)
Bactometer系统
Malthus微生物快速测试仪
ATP生物发光技术（BL）
微量量热法
接触酶测定仪
放射测量法

奥地利Sy-Lab公司的BacTrac4300和BioTrac4200自动微生物快速检测系统可以根据微生物在生长过程中利用低电导率的大分子物质（如蛋白质，多肽及碳水化合物等）进行新陈代谢，生成低分子带电荷的分解物，使电导率发生变化，电信号经放大后显示并记录，检测系统每10分钟检测一次电导率的变化，由计算机实时监控并自动给出结果。因此，只要先用标准方法对比做出标准曲线，就可以达到快速定量检测菌数的目的。对于致病菌或某些特殊应用场合，则不需要做标准曲线，如有电导率显著突变，则可以判断为初筛阳性，用标准方法进一步确认。

其特点是：
1。采用独创的测量培养基电导(M值)和电极电导(E值)结合的方法，测量相对电导率变化，使灵敏度大大提高，E值测量法尤其适用于一些高盐分(高电导率)的选择性增菌培养基，使电导率法用于致病菌快速初筛成为可能。
2。对于难以测量电导变化的微生物，如酵母和霉菌，直接电导测量经常会出现假阴性。Sylab公司采用测间接电导率的方法，通过测量KOH吸收微生物代谢产生CO2后电导率的变化反映微生物的生长情况，检测灵敏度大大提高，杜绝假阴性可能。
3。灵敏度高。最低可检测出0.2-1个/mL(克)样品。
4。可检测样品种类广。可检测常见的各种食品、化妆品、药品、环境拭子等，还可用于微生物代谢、防腐及消毒效果研究等。
5。检测的微生物项目多。可检测常规微生物项目(菌落总数、大肠菌群、酵母和霉菌总数)及致病微生物(沙门氏菌、李斯特菌、金黄色葡萄球菌等)。
6。检测速度快。样品含菌量越高，出结果越快，只需4-24小时即给出结果。大肠菌群最长12小时出结果。
7。检测步骤简单。厂家提供特殊配方的培养基，您只需制备好培养基，将样品加入培养基中，放入仪器，然后启动程序即可自动出结果。对于液体样品无需复杂前处理，固体样品只需进行必要的均质和稀释即可。不需要将样品进行梯度稀释，不需要人工计数，轻松完成每天繁琐的微生物检测工作，省时省力。
8。针对中国市场，厂家可以只提供干燥培养基，单次检测成本低廉，特别适合中国国情。
9。基于Windows系统的智能化软件，可对单个检测瓶进行控制，特别适合HACCP企业进行风险评估分析。
10。与标准方法相比，符合率达到90-97%，完全能满足检测机构和企业对快速检测的需要。
11。该方法通过欧洲各国的认证。

⑶ 纯化水设备系统在纯化水取样过程中有哪些注意事项并说明原因

做理化取样，保持容器干燥干净，做微生物限度，先将取样容器灭菌，取样前，将取样口用75%的酒精擦拭下，先放30秒纯化水再快速取样，以防污染。

⑷ 纯化水系统水质取样方法是怎样

净得瑞很高兴为您解答：

1.采用专用无菌瓶取样，取样后需要低温冷藏（回2-8℃）；

2.取样前先把取样点的答出水口完全打开，排水3分钟；

3.关水后用已灭菌的镊子，夹着浸过75%乙醇的药用棉花（或用浸过75%乙醇的药用棉签）抹拭水龙头内外表面各三次，再排水3分钟；

4.取水量要求：采用专用无菌瓶取样接水至1/3体积，洗涤3次，然后按要求分别接水不少于1500ml(理化检测用)；不少于200ml(微生物限度检测用)；不少于100ml（委托检验TOC）密塞。

5、附件、客户取样案例如下

附纯化水、注射用水检测报告：

1.注射用水

注：总有机碳和易氧化物两项可选做一项。

⑸ 纯化水的微生物验证大家是怎么做的

首先：只做菌落总数和总大肠菌群两项。
其次：当总大肠菌群产酸回产气时，根据需要做耐热大肠答菌群，和大肠埃希氏菌检测。
在做大肠检测时，有多管发酵法、滤膜法、酶底物法三种方法，可根据实验室实际情况选择具体方法。
标准参照“GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法 微生物指标”
需要请留邮箱

⑹ 我想问一下纯化水微生物不合格问题，管道充洗之后经纯蒸汽消毒50分钟以上待制水后各用水点排效30分钟

1、是否管路、储罐和设备内部等地方有蒸汽到不了、或温度达不到的死角？
2、对微生物作详细鉴定，是否存在芽孢杆菌？如果存在，100℃温度50分钟是杀不死的。

⑺ 纯化水微生物限度检查操作

纯化水微生物限度操作规程
文件编号
总
页
数
共
3
页
制订部门
实施日期
起
草
人
审
核
人
批
准
人
起草日期
审核日期
批准日期
1.
目的
本规程旨在为微生物限度检查提供一个标准化方法。
2.
适用范围
微生物限度实验室
3.
责任者
QC
主管生测员
4.
安全注意事项
严格无菌操作，防止微生物污染。
5.
规程
5.1
取样
a
．在车间、实验室所有用水点按序取样，标明日期和取样点位置，一个监测
点取水
3
次，一次
250mL
，送检验室按中国药典
2010
年版二部标准进行全检。
b
．
取样前将直接接触样品的容器用
75%
酒精棉球进行擦拭，
采用灭菌后瓶收
集样品。
c
．取样时，取样人洗手并消毒，取样前用纯化水淋洗检验用取样瓶和瓶塞
3
次。灭菌瓶至少取
200mL
用于微生物检验用水，微生物检验应在取样后的
1
小
时内进行，或将样品冷藏并在
4
小时内进行检验。
5.2
微生物限度检查
纯化水检验标准微生物限度检查采用平皿法和薄膜过滤法。
5.3
微生物培养
（
1
）
除另有规定，
本检查法中细菌培养温度为
30-35
℃，霉菌、酵母菌培养温
度为

⑻ 微生物活性物质分离纯化步骤或流程图、急!!!!!!!!!!!

你可以考虑以下几方面：
1）初步确定你的发酵液中的活性成份的性质，HPLC显示都是极性非常强只是说明它的水溶性很好，不足以判断它的性质；你可以查阅质料，看一下相关的菌种产生的活性物质的种类，然后设计相关的实验来进行初步验证，比如抗生素能产生抑菌圈，蛋白酶能水解蛋白质底物形成透明圈等相关实验；
2）根据活性成分的性质来设计分离纯化的方法；
3）发酵液的预处理，首先要过滤除去菌体等发酵液中不能溶解的杂质，如果产生色素的话最后先去除色素，以免干扰后面的分离过程；同时要根据活性成分成分的性质对活性成分进行一定的浓缩处理，再根据你要用的柱子来进行必要的处理，比如透析出盐等，同时要注意在预处理的过程中尽量保持活性成分的活性。

离心去菌体后，你可以先用各种有机溶剂如甲醇、氯仿等进行萃取，检查萃取液与沉淀物质的活性，确定你的活性成分的大致性质；也可以先用盐析的方法，用硫酸氨等进行盐析，测试活性。这些工作完了以后，可以过开放柱进行初步的纯化，收集活性物组分。有必要的话，上低压色谱柱或是高压色谱。收集活性峰，一般经过高效液相色谱后，就比较纯了。
如果活性物质极性很强，那你就需要换一根可以分离极性物质的柱子，好像C18或是凝胶柱。

发酵液的预处理和固液分离
根据活性物质的许可范围，可以采取酸化、加热、过滤、絮凝、离心等。

提取(分离浓缩)
经常采用的方法有化学萃取、树脂吸附、沉淀等。

精制(纯化)
常采用的方法有结晶、脱色、色谱层析等。
此外在提取步骤中应用的沉淀、吸附等方法也可用于样品的纯化。

提取方法的选择
1.产品的基本理化性能，如化学结构、化合物的溶解度、极性、pK值、官能团反映等。
2.化合物的稳定性，如耐受的pH范围、耐受的温度条件、光照、氧化等。
此外，在分离纯化过程中值得提及的是，尽可能地避免二次污染。如分离纯化过程中使用的水要求去离子，有机溶剂要求高纯级，使用的树脂应该经过预处理除去其中残留的杂质等。

Hplc纯化时可试试调节pH值，适当降低乙腈或甲醇的量