准备工作:用纯化水浸泡滤膜,浸泡完全后放入滤杯中,包好滤杯,连同量筒、培养基、专平皿、取膜器、三角属烧瓶等一起121℃灭菌30min。灭菌后的物品一并传入洁净室中,微生物限度过滤器上连好已经灭好的滤杯,用缓冲液先润湿滤膜,抽掉缓冲液,然后倒入供试液(10倍稀释),滤过,再用缓冲液冲洗滤膜。过滤结束后取下滤膜平贴于R2A琼脂培养基平板上,32℃倒置培养5天。菌落计数(平皿上长几个菌结果就报几个菌)
⑵ 紧急求助R2A培养基的中文名称和全称是什么
R2A琼脂培养基培养基
英文名称:R2A Agar
R2A琼脂培养基用于纯水中微生物的计数。(2015版CP)
检验原理:
酵母浸出粉、蛋白胨、酸蛋白水解物提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖、为可发酵糖类;可溶性淀粉可以吸收菌在复苏过程产生的有害物质;丙酮酸钠可增强细菌的复苏。磷酸二氢钾为酸碱缓冲剂;无水硫酸镁提供二价阳离子;琼脂为凝固剂。
R2A琼脂培养基配方成分:
成分
含量(g/L)
酵母浸出粉
0.5
蛋白胨
0.5
酪蛋白水解物
0.5
葡萄糖
0.5
可溶性淀粉
0.5
磷酸二氢钾
0.3
无水硫酸镁
0.024
丙酮酸钠
0.3
琼脂
15.0
蒸馏水(干粉培养基不含此成分)
1000
最终pH 7.2±0.2
使用方法:
平板凝胶培养基使用:待检样品按照相应的标准进行处理后,取适量样品液接种于该培养基上,于药典规定的培养条件进行培养,观察结果。
脱水干粉培养基使用:称取本品干粉18.1g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,121℃高压灭菌15 min。(注:配制不同用量体积,可按比例扩增或缩小。)后续操作可参考“平板凝胶培养基使用”。
⑶ r2a琼脂培养基是营养琼脂培养基吗
呵呵,区别是琼脂培养基就是加了琼脂粉凝结成固体的LB培养基。
固体的培养基用于细菌涂板,抗性筛选挑选单克隆之用
液体的用于单克隆菌种扩大培养,提取目的基因或者蛋白之用。
⑷ 请问纯化水的微生物检测的培养基用什么
CP用营养琼脂培养细菌、玫瑰红纳琼脂培养霉菌及酵母
USP用SCDA培养总需氧菌、SDA培养霉菌及酵母
⑸ 纯化水微生物限度检查方法
在医药的生产过程中,纯化水的质量是关系到药品质量的一个首要原因。纯化水在生产,储存和运输的过程中,非常容易受到微生物的污染,因此对于水质的日常检测是质量部门一个重要工作。对于纯化水微生物限度检查,各国所使用的方法不外乎与培养基浇注法,涂布法,膜过滤法,以及最大可能数法,最大的区别在于所使用的培养基不同。
我总结了以下对于纯化水微生物限度检查方法,同时我司熟悉纯化水检测相关标准和检测项目要求,可提供专业、可靠的纯化水检测服务,出具国家认可的纯化水微生物限度检查报告。cma资质认证如下:
对于活力比较强的微生物,在高营养性培养基上可以快速大量的生长,而对于活力比较差的微生物,生长速度会比较缓慢。在日常生活中,这两种微生物经常会同时出现由由于它们的生长速率不同,会产生无法完全检出的现象,因此高营养性培养基和低营养性培养基常常会同时使用来提高微生物的检出率,
培养的温度和时间同样是影响检测的条件,高营养性培养基通常在30-35℃培养48-72小时,但是在同一个系统中,培养的时间越长,可以检出的微生物数量就越多,低营养性培养基就在这时候被设计出来,有些培养基的培养时间甚至达到14天,可以至大化的复苏低营养性微生物及受损伤的微生物。但是检测周期的延长,对于工作效率来说,是很不利的,因此我们需要一个既能保证效率,又能保证检出率的办法。
在比较了中国药典,美国药典中所记载的方法,中国药典中纯化水微生物检查所用到的培养基是 R2A 琼脂培养基,在30-35℃培养大于5天。美国药典中对于纯化水的微生物检测用何种培养基没有做强制性规定,只要求在水系统确认验证及周期性确认验证时,使用适当的方法对水系统中的微生物做出评价即可。
《中国药典》2010版、2015版以及2020版纯化水微生物限度检查中表示,生产企业必须确保纯化水的质量符合药典要求,但药典对于纯化水的规定其实也只是至低水平,满足了药典的标准不一定就能保证符合企业预期用途的要求。因此,开展纯化水微生物限度检查直接影响到生产产品的安全质量,中科检测具有纯化水微生物限度核查检测,具有独立实验室,报告具有CMA和CNAS资质。
⑹ 做纯化水微生物检验,这个是营养琼脂培养基,请问长出的那么大菌落是什么菌也是细菌吗
是不是酵母菌啊
⑺ 我问一下做纯化水注射用水的微生物限度时为什么营养琼脂上长的细菌为黄色,而玫瑰红纳琼脂上长的菌为红色
楼上说错了来一样东西自,营养琼脂是没有选择培养性的,你的这种情况应该是玫瑰红钠琼脂上有某些成分可供那种菌分解,再配有指示剂所以颜色不同,像大肠杆菌在血平板是灰白色,在麦康凯板上是玫红色一样(大肠杆菌分解麦康凯上的乳糖)
⑻ R2A琼脂培养基和胰酪大豆胨琼脂培养基有什么区别
R2A培养基可以修复被氯气损伤的细菌,支持耐受氯气的微生物的生长,酵母浸出粉、蛋白胨、酪蛋白水解物提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖、为可发酵糖类;可溶性淀粉可以吸收菌在复苏过程产生的有害物质,丙酮酸钠可增强细菌的复苏。磷酸二氢钾为酸碱缓冲剂,无水硫酸镁提供二价阳离子,琼脂为凝固剂。
TSA培养基中的胰酪胨(酪蛋白胰酶水解物)、大豆木瓜蛋白酶水解物提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。
R2A没有TSA营养高,长的相对慢一点,方便计数。
⑼ R2A琼脂培养基和胰酪大豆胨琼脂培养基有什么区别
【R2A琼脂特点】:R2A琼脂培养基的营养成分较低,比较适合一些对营养要求较低的细菌生长,其实中海R2A培养基更适用于纯化水中微生物的计数,且在纯化水微生物限度检查中具有较高的准确性和可靠性,它的灵敏度高,有利于绝大多数水系统中污染菌的检出,还有就是R2A琼脂的成分以及它的培养时间和条件,也利于受损的微生物恢复生长,使疲劳的微生物有更为显著的回收率。
【胰酪大豆胨琼脂培养基特点】:中海生物技术胰酪大豆胨琼脂培养基是一种通用的营养培养基,具有广谱的促菌生长能力,提高了微生物的检出率。培养基营养成分含量高,质量稳定,经促生长试验结果表明,培养菌的生长状态良好且菌落直径和菌落特征典型。
主要区别:R2A适用于水中微生物计数,营养成分较低;胰酪大豆胨琼脂用于普通的或营养要求较高的细菌的培养及需氧菌总数计数
⑽ 纯化水中的微生物检测怎么做 要详细
采用滤膜法进来行微生物检测源是一种国际公认的微生物标准检验方法,其得到AOAC、美国、欧洲和日本等国家的药典、FDA和EPA等组织的承认,广泛应用于环境监测、食品及饮料工业、化妆品、制药工业品质控制和电子工业等领域。赛多利斯公司的滤膜法微生物检测产品成功地应用于滤膜法已有20多年的历史,实用而且方便实用,它简化了微生物检测程序。
滤膜法微生物检测:
将适当孔径的滤膜放入滤器,过滤样品,由于滤膜的作用而将微生物保留在膜的表面上。样品中微生物生长抑制剂可在过滤后用无菌水冲洗滤器而除去。然后,将滤膜放在培养基上培养,营养物和代谢物通过滤膜的微孔进行交换,在滤膜表面上培养出的菌落可以计数,并和样品量相关。
滤膜法的优点:
- 与直接法比较,可以检测大量的样品
- 浓缩效应使微生物检测的准确度提高
- 带有菌落的滤膜,可作为检测的永久记录存档
- 可见的菌落和样品量直接对应,得出定量结果
操作具体一点就是:薄膜过滤法检测,一个样过滤一份,就是200ml的纯化水通过滤膜,将该滤膜浸泡在灭菌好的l生理盐水中,再接种到平皿中,制成10级、100级、1000级稀释倍数的细菌、霉菌和酵母菌稀释培养皿,即可