『壹』 液相色谱C18柱堵塞后如何冲洗柱子,能用纯水 冲柱子吗
C18柱子不能用纯抄水冲洗,再说本来就堵了,压力很高应该选择压力低的溶剂。
如果你确定是堵塞了,就用纯乙腈反冲,先用低一点的流速,比如01ml/min,看压力情况,不要超过200bar,再慢慢提高流速,但不要超过1.的流速,如果是真的堵了,可能会压力慢慢降下来的。
如果上面方法不行,那还有可能是盐析堵的,那就用乙腈:水=90:10反冲。
『贰』 离子色谱柱能用纯水冲洗吗,这样是否会影响柱子的性能。
按看说明书或咨询色谱柱厂商,防止损害色谱柱,离子柱都不便宜,小心为上。
用纯水短时间内冲洗色谱柱,通常不会对色谱柱造成较大的损伤,但如果长时间用水冲洗色谱柱则
可能引起固定相流失和相塌陷现象,所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱,建议在水中加入一定
量的甲醇或乙腈进行冲洗,通常水的含量<90%不会对色谱柱造成任何影响。
原因分析:
首先,由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质,硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一
定浓度有机溶剂的流动相中要大得多,所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失,引起柱效下降。
其次,对于常规的 C18 柱而言,由于C18 长链与水是不互溶的,C18 长链之间的相互作用力大于
C18 与水分子的作用力,长时间的用水冲洗,使得C18 长链之间相互靠近,水流的冲刷,导致相互联结
的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面,对疏水性物质的保留能力下降,即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出
现相塌陷的现象,有些厂家推出了纯水柱(如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱),这种纯水柱可以用纯
水作流动相而不会产生相塌陷,这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。
第三,如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱,用纯水冲洗,并一定能将缓冲盐完全洗去。因为,由
于缓冲盐难溶于有机溶剂,C18 反相柱中用的填料是在硅胶表面上接上许许多多的C18 长链,相当于一
个疏水的有机相,而硅胶基体被有机物质包裹着,所以用纯缓冲盐水溶液做流动相时也许缓冲盐不容易
到达硅胶基质,不至损害基体。但所用的流动相通常会含一部分有机溶剂,而且这些有机溶剂与C18
长链是互溶的,因此有机溶剂的加入增强了流动相渗入硅胶基质的能力,能使部分缓冲盐达到硅胶基质。
同样的道理,用纯水冲洗只能洗掉表面的缓冲盐,而渗入深处的缓冲盐则仍然残留在那里。所以最好在
水中加入部分有机溶剂进行冲洗,一般的C18 柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要视分析
时使用的流动相来定,原则上,用于冲洗的流动相中水的比例应该等于或高于(缓冲盐用后清洗的情况,
推荐使用“等于”)分析时所用流动相中水的比例。
『叁』 为什么普通C18色谱柱不能用纯水冲洗
容易引起疏水坍塌,把强保留物质冲出来,会毁了柱子的,所以水相不能超过95%,最开始的梯度淋洗也是高有机相到高水相,但是不是纯水相。
『肆』 菲罗门色谱柱 gemini c18能走100%的水吗
可以。
但是对柱子损伤有点大,寿命会缩减很多。不光是菲罗门的,一般的色谱柱都会这样。即便官方说是100%耐水的柱子,用纯水相对于色谱柱也会有很大的伤害的。
记得用完之后一定要用甲醇或者乙腈封存。不然容易长微生物。
『伍』 老师,我做液相的,昨晚Agilent XDB C18的柱子被我用水冲了40分钟,有什么解救方法
你好,咱们C18的柱子一般是不能走纯水的,40min水应该还不是很严重,你用纯甲醇版低流速冲色谱柱2小时,进权样一个以前走过的物质,看看柱效情况。如果不理想了,进一针二氯甲烷,再用甲醇冲。冲完后,在进样看看。
『陆』 diamonsil C18(2) 如何洗
一般反相的C18色谱柱,建议先用10%甲醇水溶液冲洗半小时,然后再用纯甲醇冲洗即可。
刚刚找到的色谱柱柱效测试报告上的解答
2、色谱柱的保存
1)反相色谱柱每天实验后的保养:
使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗45分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗45分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
(2)长期保存色谱柱:
如色谱柱要长时间保存,可以储存于纯甲醇或乙腈中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温。
3、色谱柱的再生
因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。
依次采用20-30倍的色谱柱体积的甲醇:水=10:90 (V/V),乙腈,异丙醇作为流动相冲洗色谱柱,完成后再以相反顺序冲洗色谱柱。
『柒』 安捷伦zorbax sb c18色谱柱能用水冲么
最好不要,色谱柱这款柱子我记得是不耐受纯水的,就用乙腈或者甲醇冲吧
『捌』 在冲洗高效液相C18反相柱的时候,为什么不能用纯水
相C18色谱柱(即憎水柱子)如果用纯水冲洗后,如果立即停泵则由于其憎水(疏水专)的缘故使得柱子内属的水因而流失掉,长时间停泵使得柱子干掉(变干),会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷(也说成是失去支撑倒下),柱子就这样报废了。那么一旦冲洗柱子用了纯水相怎么办呢?诶!不要惊慌,只要你不停泵,上述情况不会立即发生,我们只要保证最后用有机相冲洗柱子,停泵后使柱子内留存的是有机相,就无大碍,
『玖』 碳十八色谱柱能进水吗
可以。不知道你说的“进水”是用水做流动相还是用水作为样品,不过都是可以的。
C18是最常见的回反相色谱答柱。反相的色谱柱都是可以用水作为流动相的。
不过一般来说,至少要有10%的有机相,也就是流动相里最好加入至少10%的甲醇或者乙腈。也有色谱柱的厂家说可以耐受100%的纯水相,不过如果用100%的水作为流动相,对色谱柱和的损伤有点大,会减少寿命。
样品进水溶液就更没有问题了,流动相那么大体积的水溶液都可以进柱子,进样不过几微升的体积而已,当然也是可以的。